多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片斷-文庫吧資料
2025-06-01 06:19本頁面
【正文】 鏈溫度約為 87℃ ；其含量在 60%時， 解鏈溫度約為 95℃ 。新鏈與舊鏈構(gòu)成新的 DNA 邊解旋邊復(fù)制 (過程） 復(fù)制特點(diǎn) 半保留復(fù)制（結(jié)果） 遵循原則 堿基互補(bǔ)配對原則 精確復(fù)制的原因 1復(fù)制的意義 DNA分子通過復(fù)制使遺傳信息從親代傳給了后代， 從而保持了遺傳信息的連續(xù)性 ① 規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)為復(fù)制提供了精確的模板 ② 堿基互補(bǔ)配對能力保證了復(fù)制準(zhǔn)確無誤的進(jìn)行 ① 一條雙鏈 DNA分子，復(fù)制 N次，形成的子代 DNA分子中，含親代 DNA母鏈的有兩個 DNA分子，占子代 DNA總數(shù)的 2/2N；親代 DNA分子母鏈兩條，占子代 DNA中脫氧核苷酸鏈總數(shù)的 2/2 N+1= 1/2N ② 設(shè)一條 DNA分子中有胸腺嘧啶為 m個，則該 DNA復(fù)制 n次后，形成子代 DNA分子需游離的 胸腺嘧啶為 T=(2N1)m 1 DNA復(fù)制過程中的等量關(guān)系 （四） PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） DNA聚合酶特性 不能從頭合成 DNA，只能從 DNA的 3′ 端開始延伸DNA鏈，因此， DNA復(fù)制需要引物 DNA聚合酶作用過程 當(dāng)引物與 DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對結(jié)合后， DNA聚合酶就能從引物的 3′ 端開始延伸 DNA鏈， DNA的合成方向總是從子鏈的 5′ 端向 3′ 端延伸 PCR原理 教材 P58 參與的組分 在 DNA復(fù)制中的作用 解旋酶 打開 DNA雙鏈 DNA母鏈 提供 DNA復(fù)制模板 4種脫氧核苷酸 合成子鏈的原料 DNA聚合酶 催化合成 DNA子鏈 引物 使 DNA聚合酶能夠從引物的 3’端開 始連接脫氧核苷酸 DNA復(fù)制所需要的條件： PCR原理 ① 在 80～ 100℃ 的溫度范圍內(nèi)， DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)將解體，雙鏈分開，這個過程稱為變性 、 變性溫度與 DNA分子中 GC含量有關(guān)，因為 GC之間由三個氫鍵連接，而 AT之間只有兩個氫鍵相連，所以 GC含量高其解鏈溫度就高。在 DNA 聚合酶的作用下將引物部位換上 DNA， 此時的 DNA片斷稱為岡崎片斷 ⑤ DNA片斷的連接 在 DNA連接酶的作用下將岡崎片斷連接起來。因為 A與 T之間形成兩個氫鍵， 在 G和 C之間形成三個氫鍵， 三個氫鍵比兩個氫鍵穩(wěn)定，所以在 DNA分子中含有較多的 G－ C堿基對比含有較多的 A－ T堿基穩(wěn)定 多樣性 構(gòu)成 DNA分子的堿基對的數(shù)量不同，堿基對的排列順序千變?nèi)f化 例題：如果有 4000個堿基對，堿基對有多少種排列方式？ 答：堿基對排列方式有 44000種 特異性 不同的 DNA分子由于堿基對的排列順序存在差異，因此每一個DNA分子的堿基對都有其特定的排列順序，這種特定的排列順 序包含著特定的遺傳信息，每一種生物 (A+T)/(G+C)的比值是特定的 （三） DNA的復(fù)制 時期 有絲分裂間期減數(shù)第一次分裂前的間期 場所 細(xì)胞核（主）、線粒體、葉綠體 模板 解開螺旋的兩條 DNA母鏈 概念 由一
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