【正文】 治療疾病種類的分類 ? 根據(jù)治療性疫苗主要針對(duì)的疾病的種類可將其分為 5種類型。 ? 通常所用的修飾分子有細(xì)胞因子如 IL IL1IFNγ、 GMCSF等，有協(xié)同刺激分子如 B7B7 CD CD2 CD3等，有趨化因子如RANTES、 IP10及 MHC分子等。 治療性疫苗的種類 基于組成成分及性質(zhì)的分類 ? 新型治療性疫苗在形式上呈多樣組合，但在組成成分及性質(zhì)上，可分為蛋白質(zhì)、基因和細(xì)胞等 3種類型。 ? 為增強(qiáng)免疫效果，治療性疫苗經(jīng)常聯(lián)合應(yīng)用形式多樣的新型免疫技術(shù)和手段，并輔以細(xì)胞因子、共刺激分子、趨化因子等分子佐劑，輔助手段因疾病種類、人群、病程、病因不同而不一。 ? 它主要應(yīng)用于發(fā)生慢性感染、腫瘤、自身免疫病、移植排斥、超敏反應(yīng)等患者，發(fā)揮治療疾病的功能，有時(shí)兼具預(yù)防功能。 ? 1999年至 2022年前后，治療性疫苗或其相關(guān)研究成果及其文章如雨后春筍般涌現(xiàn) ? 在最近三四年間，治療性疫苗的研制工作在多種重點(diǎn)疾病領(lǐng)域廣泛開展起來，尤其在 AIDS、慢性乙肝、腫瘤、自身免疫病、移植排斥等疾病治療上已獲得可喜的或相當(dāng)有啟示性的結(jié)果，進(jìn)一步激勵(lì)了大量的后續(xù)研究工作。美國 Scripps的 Chisari小組在 1995年所發(fā)表的文章中即提出了 therapeutic vaccine。 ? 另一項(xiàng)小鼠研究中 ,僅在陰道或直腸局部免疫 HIV重組 ? Sindbis病毒后方可觀察到抵抗 HIV重組 Sindbis病毒攻擊的保護(hù)作用 ,而肌肉注射或經(jīng)遠(yuǎn)端黏膜部位(如鼻腔 )接種相同疫苗載體則不能為小鼠提供抵抗陰道攻擊的保護(hù)作用。 2. 檢測(cè)雛雞 l— 5日齡期間，局部免疫器官包括眼結(jié)膜和哈氏淚腺內(nèi)，缺乏免疫活性細(xì)胞和黏膜抗體，而當(dāng) 1日齡接受疫苗免疫后，該部位的免疫活性細(xì)胞開始增多，說明早期免疫對(duì)免疫器官的活化至關(guān)重要。 ? 粘膜上皮細(xì)胞產(chǎn)生的分泌體 (secertory ponent， SC)很快以二硫鍵共價(jià)連接成 sIgA并分泌到粘膜的表面 ,能延緩小腸中蛋白酶對(duì) sIgA的降解作用，卻不影響它與抗原的親和力。 人用黏膜疫苗 ? 脊髓灰質(zhì)炎疫苗 ? 滅活霍亂全細(xì)胞 B亞單位疫苗和減毒滅活苗 ? 減毒傷寒疫苗 ? BCG活疫苗 ? 腺病毒疫苗 ? AIDS疫苗 ? IgA抗體介導(dǎo)的粘膜免疫保護(hù)效果 ? 抗原的攝取、加工、處理和呈遞，并激活抗原特異性的淋巴細(xì)胞，然后通過局部的淋巴結(jié)，進(jìn)入全身性循環(huán)，再回到粘膜組織產(chǎn)生第二階段的免疫效應(yīng)。 ? 粘膜免疫也能產(chǎn)生很高的血清抗體效價(jià)，甚至能誘導(dǎo)細(xì)胞毒 T淋巴細(xì)胞的活性。 黏膜免疫的優(yōu)點(diǎn) ? 口服疫苗可在粘膜局部產(chǎn)生特異的抗體反應(yīng)，來有效地阻止病原微生物的入侵甚至將其殺滅和清除出體外。s patches， PP)及闌尾等。 香蕉具有其他植物無可比擬的 3大優(yōu)點(diǎn)： ① 香蕉泥已經(jīng)是能被廣泛接受的嬰幼兒食品 ②香蕉是蛋白質(zhì)含量最高的水果之一 ③香蕉有厚實(shí)的外皮，保存和運(yùn)輸都十分方便。 展望 ? 雖然植物疫苗離臨床應(yīng)用還為時(shí)尚遠(yuǎn)，但這一領(lǐng)域充滿了希望，吸引著廣大科學(xué)研究者。 轉(zhuǎn)基因植物疫苗的穩(wěn)定性 ? 植物細(xì)胞壁的天然生物膠囊作用雖然能使植物疫苗避免在消化道中過早降解，但如果它久久不能釋放也顯然是致命的缺點(diǎn)。 ? 其中共轉(zhuǎn)化較容易操作，其基本原理是將一個(gè)具有抗生素標(biāo)記的質(zhì)粒和另一個(gè)僅含目的基因質(zhì)粒同時(shí)導(dǎo)人同一農(nóng)桿菌。 ? 有關(guān)在轉(zhuǎn)基因植物的子代去除抗生素基因的策略已有不少。 無抗生素抗性的轉(zhuǎn)基因植物 ? 在轉(zhuǎn)基因植物的再生過程中抗生素作為篩選標(biāo)記被廣泛應(yīng)用。 ③編碼甘氨酸的 GGG在單子葉植物基因組中非常少見，因此將插入基因中的這一編碼改為 GGA是一種更適合在植物中表達(dá)的方法。對(duì)馬鈴薯來說， patadin啟動(dòng)子更為適合。 ②選擇特異的啟動(dòng)子。 ? Carrillo等報(bào)道了他們用編碼家畜口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白 VP1的基因轉(zhuǎn)入到植物擬南芥中，然后用轉(zhuǎn)基因植物的葉子提取液來免疫小鼠，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生的特異性抗體能保護(hù)小鼠抵抗口蹄疫病毒的侵襲。 ? Mason等人于 1995年根據(jù)這個(gè)原理將 LTB的編碼基因轉(zhuǎn)入煙草及馬鈴薯，研制成功轉(zhuǎn)基因植物疫苗 結(jié)核轉(zhuǎn)基因植物疫苗 ? 卡介苗 ? 結(jié)核 DNA疫苗已在小鼠實(shí)驗(yàn)中獲得了可喜的免疫保護(hù)效果 ? 口服能表達(dá)結(jié)核桿菌蛋白質(zhì)抗原的植物，有可能在肺部產(chǎn)生特異 IgA抗體等粘膜免疫反應(yīng) ? 把結(jié)核桿菌分泌性蛋白質(zhì) MPT64和 ESTA6基因?qū)藷煵?、黃瓜、番茄和胡蘿卜的研究正在進(jìn)行之中，其中 MPT64蛋白質(zhì)的基因已經(jīng)在番茄中獲得了成功的表達(dá)。 ? 他們還用植物病毒為載體得到狂犬病植物疫苗，并且在被免疫的小鼠血清中測(cè)到了中和抗體。 ? 用轉(zhuǎn)基因馬鈴薯去喂小鼠，在小鼠血清中測(cè)到了抗諾瓦克病毒的 IgG和 IgA抗體。對(duì)這種植物源性的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，它不但保留了抗原決定簇，而且能更加耐受蛋白酶的分解。 ? Mason等人用煙草來表達(dá)諾瓦克病毒衣殼蛋白取得成功。 ? 雖然煙草源性的乙肝表面抗原產(chǎn)生抗體比較慢，而且滴度略低于現(xiàn)有的疫苗，但煙草提取液只含 3％的蛋白質(zhì)，而酵母源性的疫苗卻是純化的蛋白質(zhì)制劑。這些抗體能識(shí)別人血清中的乙肝表面抗原。 非直接口服的轉(zhuǎn)基因植物疫苗 乙型肝炎表面抗原疫苗 ? 目前市場上用的疫苗是用酵母細(xì)胞系統(tǒng)生產(chǎn)的 DNA重組乙肝病毒表面抗原疫苗 ? 將乙肝表面抗原基因轉(zhuǎn)入煙草的基因組 ,結(jié)果發(fā)現(xiàn)煙草成功表達(dá)了乙肝表面抗原。但是豆類種子中含有凝集素類物質(zhì)，因而不能生食。 ? 每個(gè)香蕉可以表達(dá) 1～ 10mg左右的外源基因蛋白質(zhì)，大約 100～ 500μg的蛋白質(zhì)抗原就足以刺激人體產(chǎn)生特異的免疫反應(yīng)，因而一個(gè)轉(zhuǎn)基因的香蕉疫苗就能給 10個(gè)嬰幼兒進(jìn)行口服免疫接種。 ? 致命的缺點(diǎn) :即馬鈴薯塊莖蛋白質(zhì)的含量較低，而且人類無生食馬鈴薯的習(xí)慣。 ? 組織培養(yǎng)快速繁殖系統(tǒng)業(yè)已成熟，可以供應(yīng)大量遺傳背景一致的種苗。 ? 雖然煙草含有尼古丁等有害物質(zhì)，但其蛋白質(zhì)含量豐富，可通過純化技術(shù)獲得蛋白質(zhì)，所以較適合于如乙型肝炎等轉(zhuǎn)基因植物疫苗的生產(chǎn)及應(yīng)用研究。 (6)安全性 植物疫苗在本質(zhì)上是人類的食品，因此安全可靠，無毒性和副作用，也無潛在的致病和致癌的危險(xiǎn)性。 轉(zhuǎn)基因植物疫苗的優(yōu)越性 (5)接種簡便 植物疫苗的接種途徑主要是口服，無需注射。轉(zhuǎn)基因植物的種子可用以再生產(chǎn)和技術(shù)轉(zhuǎn)讓。植物種植是最經(jīng)濟(jì)的蛋白質(zhì)生產(chǎn)系統(tǒng)。粘膜免疫的產(chǎn)生對(duì)某些傳染病，尤其是通過粘膜傳播的傳染病的預(yù)防是非常有效的。 轉(zhuǎn)基因植物疫苗的優(yōu)越性 (3)誘導(dǎo)粘膜免疫反應(yīng) 口服植物疫苗能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生粘膜分泌性 IgA。 轉(zhuǎn)基因植物疫苗的優(yōu)越性 (1)植物細(xì)胞的全能性 植物的組織或原生質(zhì)體在適當(dāng)?shù)臈l件下經(jīng)培養(yǎng)能得到一株完整的可育的植物體。新型疫苗 一、轉(zhuǎn)基因植物疫苗 疫苗的研究和開發(fā)歷程 ? 以全細(xì)胞疫苗為標(biāo)志的第一次疫苗革命 ? 以乙型肝炎基因工程疫苗為典型代表的第二