【正文】 胞應(yīng)答有關(guān)，其治療性疫苗設(shè)計重點在于重新消除對自身抗原的特異反應(yīng)性 T細(xì)胞克隆 4 移植用治療性疫苗 ? 用于抗移植慢性排斥反應(yīng)的治療性疫苗可通過封閉協(xié)同刺激分子、誘導(dǎo)對移植物的免疫耐受來延長移植物的存活期 ? 以多肽疫苗體外封閉移植物協(xié)同刺激分子等治療性疫苗的設(shè)計 5 變態(tài)反應(yīng)治療性疫苗 ? 變態(tài)反應(yīng)疾病屬常見病，其中的各類過敏和哮喘有致命危險 ? 思路有 :細(xì)菌未甲基化的 CpG基序或人工合成的 CpG寡核苷酸被認(rèn)為具強免疫調(diào)節(jié)力，可誘導(dǎo) Th1免疫偏離，從而有效抑制 Th2依賴的變態(tài)反應(yīng) 影響治療性疫苗效果的因素及其可能機理 ? 增強機體對疫苗的攝入 ? 改善對疫苗靶抗原的有效處理 ? 增強對靶抗原的有效呈遞 ? 誘生全面的免疫應(yīng)答 治療性疫苗分子設(shè)計的基本策略 ? 疫苗靶抗原的改造和組合 ? 以抗原表位為基礎(chǔ)的疫苗設(shè)計 ? 模擬天然病原體感染 ? 多水平基因修飾 ? 不同類型疫苗的交替 ? 新型佐劑的輔助作用 ? 疫苗和基因治療的聯(lián)合應(yīng)用 治療性疫苗的應(yīng)用 ? 治療性疫苗是在全球慢性病毒性疾病廣泛流行和腫瘤疾病缺乏治療手段的情況下應(yīng)運而生的新型疫苗。 傳統(tǒng)重組 DNA疫苗的治療作用 ? 主要用于乙型肝炎的預(yù)防。 基因疫苗 ? 基因疫苗誘生特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答的優(yōu)勢使其在治療性疫苗設(shè)計中格外受到重視。 ? AIDS使患者的免疫系統(tǒng)遭受嚴(yán)重的破壞，多重繼發(fā)感染嚴(yán)重，死亡率極高 ? 核苷抑制劑 AZT、 3TC及蛋白酶抑制劑 RTV組成的 “ 雞尾酒 ” ，新研制的藥物還有PRO54 CyanovirinN、 AOPRANTES、T20等等，均為抑制 HIV有效進入細(xì)胞的小分子物或蛋白。 展望 ? 有若干種疾病治療性疫苗已進人 Ⅰ 期和 Ⅱ 期臨床試驗 ? 治療性疫苗也面臨著許多理論和技術(shù)上的尚未解決的難題 ? 治療性疫苗的開發(fā)在極大程度上依賴于感染性疾病、腫瘤、自身免疫病、移植免疫機理的闡明，病因?qū)W基礎(chǔ)研究上的突破，聯(lián)合疫苗的策略，疫苗研制的工藝、接種疫苗的途徑等技術(shù)，才有可能加快治療性疫苗出臺的步伐 四、腫瘤疫苗 研究原由 ? 腫瘤疫苗作為腫瘤生物治療的一種重要手段， 已成為抗腫瘤研究的熱點之一。 ? 體內(nèi)的抗腫瘤免疫反應(yīng)主要是Ｔ細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫，它包括ＣＤ８ +Ｔ細(xì)胞的特異應(yīng)答和ＣＤ４ +Ｔ細(xì)胞的輔助效應(yīng)， 最終對腫瘤細(xì)胞形成直接殺傷作用的主要是細(xì)胞毒性Ｔ淋巴細(xì)胞。在該過程中 ,ＡＰＣ和ＭＨＣ抗原扮演了重要的角色。 解決的關(guān)鍵問題 ? 在腫瘤疫苗的設(shè)計中要是能否很好地確定腫瘤細(xì)胞特異性抗原 ? 在眾多同種類型的腫瘤患者中該抗原是否一致 ? 免疫系統(tǒng)能否通過對該抗原的識別激發(fā)特異性的免疫應(yīng)答 腫瘤疫苗 分類 ? 腫瘤細(xì)胞疫苗 ? 腫瘤多肽疫苗 ? 腫瘤基因疫苗 ? 腫瘤樹突狀細(xì)胞疫苗 （ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ， ＤＣ）， 1,腫瘤細(xì)胞疫苗 機制 ? 是在機體腫瘤組織中提取腫瘤細(xì)胞， 經(jīng)滅活處理后使瘤細(xì)胞喪失致瘤性， 但仍保持其免疫原性和抗原性， 將其主動免疫機體， 在理論上能提供腫瘤細(xì)胞的所有抗原， 包括特異性抗原和廣譜性抗原， 以期形成抗腫瘤免疫應(yīng)答。 ? 在設(shè)計上強調(diào)優(yōu)勢表位。 ? 添加一些免疫佐劑 : 熱休克蛋白、ＧＭ－ＣＳＦ和鳥苷－寡脫氧核苷酸 3,腫瘤基因疫苗 ? 是利用基因工程技術(shù)將編碼腫瘤特異性抗原的基因結(jié)合于表達載體上 （ 重組病毒或質(zhì)粒 ＤＮＡ） ， 再將疫苗直接注入機體， 借助載體本身和機體內(nèi)的基因表達系統(tǒng)表達出期望的抗原， 從而誘導(dǎo)出專一性的細(xì)胞免疫應(yīng)答。 4,腫瘤ＤＣ疫苗 ? ＤＣ是專職的ＡＰＣ，它是目前公認(rèn)的未致敏Ｔ細(xì)胞最強有力的誘導(dǎo)刺激細(xì)胞。 目前， 制備 ＤＣ 疫苗較為肯定的方法有如下 ３ 種 ： ? 腫瘤細(xì)胞融合ＤＣ疫苗 ? 腫瘤抗原肽負(fù)載ＤＣ疫苗 ? 腫瘤基因?qū)? ＤＣ 疫苗 (1)腫瘤細(xì)胞融合ＤＣ疫苗 ? 先將腫瘤細(xì)胞經(jīng)射線照射滅活， 再采用細(xì)胞融合技術(shù)使之與ＤＣ融合 ? 腫瘤抗原可直接在融合細(xì)胞內(nèi)被加工呈遞， 保證了抗原的完整有效及充分呈遞， 省略了一些抗原提純等較為繁瑣的中間步驟 ? Ｓｉｄｅｒｓ用電融合技術(shù)融合腫瘤細(xì)胞與 ＤＣ 制備疫苗， 并在荷瘤小鼠中誘導(dǎo)了特異性的抗腫瘤免疫 (2)腫瘤抗原肽負(fù)載ＤＣ疫苗 ? 提取腫瘤細(xì)胞的裂解物或提純腫瘤抗原， 將提取物與 ＤＣ 共同培育， 在此過程中有效抗原即被 ＤＣ 攝取呈遞， 用這種已致敏的 ＤＣ 疫苗進行接種， 可誘導(dǎo)出特異性較強的免疫應(yīng)答。 ? 該類疫苗的特點是導(dǎo)入的基因在體內(nèi)能夠長期表達腫瘤靶抗原， 并不斷被ＤＣ 呈遞， 能有效打破免疫耐受， 維持一個較為穩(wěn)定的免疫保護狀態(tài)， 是當(dāng)今較為推崇的一種改良 ＤＣ 疫苗。 ? 同時， 這種肽－ＤＮＡ 的復(fù)合成分在引發(fā)抗瘤免疫反應(yīng)的過程中具有協(xié)同效應(yīng)。 ? 抗抗獨特型抗體在不用任何載體蛋白及佐劑的協(xié)助下就能引發(fā)特異性的抗瘤免疫應(yīng)答， 若將其與 ＧＭ－ＣＳＦ 等細(xì)胞因子或 ＤＣ 耦聯(lián)， 則誘發(fā)的免疫效應(yīng)更強。 五、 DNA疫苗 DNA疫苗的概念 ? 又稱基因疫苗或核酸疫苗 ? 是一種細(xì)菌的質(zhì)粒，在克隆了特異性的基因以后，能在真核細(xì)胞中表達蛋白質(zhì)抗原， 刺激機體產(chǎn)生特異的體液 和細(xì)胞免疫反應(yīng)，尤其是 能誘導(dǎo)產(chǎn)生具細(xì)胞毒殺傷性功能的 T淋巴細(xì)胞 ，對病毒、細(xì)胞內(nèi)寄生的細(xì)菌和寄生蟲所引起的傳染病可能具有治療性效果和重要的預(yù)防作用。其中一部分蛋白質(zhì)在降解后與 MHC的 Ⅰ 類分子結(jié)合；而另一部分蛋白質(zhì)也可以分泌出去，再像外源蛋白質(zhì)一樣被 APC攝取后，在吞噬溶酶體中降解成的多肽和 MHC的 Ⅱ 類分子結(jié)合 (圖 )。 ? 以樹突狀細(xì)胞為主的抗原呈遞細(xì)胞，即采源于骨髓的 APC也可被DNA轉(zhuǎn)染。 DNA疫苗誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的原理 (2)以樹突狀細(xì)胞為主的抗原呈遞細(xì)胞 ? 都能攝取 DNA ，并能對表達的蛋白質(zhì)抗原進行加工和處理，降解后的多肽與 MHC的 Ⅰ 類分子結(jié)合，并呈遞給 CD8 T細(xì)胞而產(chǎn)生 CTL的免疫應(yīng)答。 DNA疫苗的載體 ? 本質(zhì)上是一種細(xì)菌的質(zhì)粒，含有多重限制性內(nèi)切酶的位點 ? 真核細(xì)胞啟動子 ? CpG核苷酸基序 ? 用于選擇的標(biāo)記 ? 載體的復(fù)制基因 基因槍轟擊 ? 即將 DNA分子包裹在金顆粒外面，然后在高壓槍的作用下對皮膚進行轟擊，金顆?？蓪NA分子帶人真皮層組織而誘導(dǎo)出和肌肉注射相當(dāng)?shù)拿庖叻磻?yīng)。 DNA疫苗的研究發(fā)展方向 ? DNA疫苗本身的構(gòu)建 :基因的密碼子 ,加速抗原的降解 ? 免疫調(diào)節(jié)因子 ? DNA疫苗的接種方案和途徑 ? 初次免疫和加強免疫的有效匹配