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離子通道與受體-文庫吧資料

2024-08-28 23:59本頁面
  

【正文】 進(jìn)而引起生物學(xué)效應(yīng)的特殊蛋白質(zhì),個別是糖脂。 β與 γ分別有 524和 222個氨基酸,分子量分別為 55 KD和 32 KD, β亞單位為非糖多肽, δ亞單位為 KD的糖多肽,氨基酸數(shù)目不明。 除了 α、 β、γ亞單位外,還有 δ亞單位附著于 α2上。 L型鈣通道是由 3種蛋白質(zhì)亞單位( α、 β、γ) 構(gòu)成的高分子糖蛋白復(fù)合體。 受體活化 Ca2+ 通道 第二信使活化 Ca2+ 通道 機(jī)械活化 Ca2+ 通道 靜息活化 Ca2+ 通道 (4)電壓依賴性鈣通道的分子生物學(xué) 在各種鈣通道中 , 對 L型通道的分子結(jié)構(gòu)研究較深入 。 Na+通道有備用 、 激活和失活三種狀態(tài) 。 2個 β亞單位附在 α亞單位上 。 五 、 電壓門控通道 ( 1) Na+通道 由一個 α亞單位和 2個 β亞單位構(gòu)成 。 通道可被某些物質(zhì)阻斷 。 離子通過通道都是被動的 , 不消耗能量 。 通道開閉的速度 小于 10 μs 四、離子通道的特性 無論是電壓門控通道還是配基門控通道 其 “ 開放 ” 和 “ 關(guān)閉 ” 都是突然發(fā)生的 。 處于不應(yīng)期則為失活狀態(tài) 。 ( 3) 機(jī)械門控 當(dāng)細(xì)胞收到牽拉時通道蛋白勾象改變 。 引起開閉 。 基因工程法: 根據(jù)不同種族的同一通道基因產(chǎn)生想象中的通道再與最初的通道進(jìn)行比較分析通道不同部分的功能。 (1) 結(jié)構(gòu)的測定: 通道的一級結(jié)構(gòu)可用 Edman降解法和重組 DNA方法分析測定;利用計(jì)算機(jī)可從一級結(jié)構(gòu)預(yù)期二級結(jié)構(gòu);x線晶體衍射圖象可確定三級結(jié)構(gòu)。 有四級結(jié)構(gòu) 。 離子通道是較大的糖蛋白分子 ( 分子量- 25萬 ) 。 通常用于特定細(xì)胞研究第二信使參與通道活性的調(diào)制作用 , 將所要研究的物質(zhì)加入浸浴液 , 直接作用于細(xì)胞漿膜的內(nèi)側(cè)面 。這一種膜型適用于一些較為復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)研究,如劑量一效應(yīng)關(guān)系等。這種膜片鉗適用于研究配體,如神經(jīng)遞質(zhì)、激素或通過膜外作用的藥物對通道產(chǎn)生影響。因此,全細(xì)胞膜片鉗測定的電流為大電流(macroscopic current)(全細(xì)胞電流 )。 舉例: 膜片鉗構(gòu)型 (configuration) 膜片鉗是一種能測定單離子通道( single ion channels) 電生理新研究技術(shù) ( 1) 細(xì)胞貼附式 (cell attached mode): 這種構(gòu)型適用于在完整的細(xì)胞膜上 (全細(xì)胞 )測定單通道電流 , 用于研究某些特殊物質(zhì) , 如神經(jīng)遞質(zhì) (加入到細(xì)胞浸溶液中 ),引起通道的改變 (調(diào)制或調(diào)節(jié)作用 )。 ③封接 使微電極與一小片細(xì)胞膜接觸通過電極內(nèi)負(fù)壓吸引而封接封接電阻可達(dá)幾億兆歐,與細(xì)胞的其它部分在電學(xué)上完全隔離開來,用微電極記錄到的膜電流只與這一小片膜通道分子功能有關(guān)。 膜片鉗技術(shù)要點(diǎn): ①對被測細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理 (酶消化)保持膜清潔。 二、離子通道的現(xiàn)代研究方法: -結(jié)構(gòu)和功能的研究 (一)功能研究: -膜片鉗 patch clamp技術(shù)應(yīng)用 膜片鉗技術(shù) 是研究單通道功能的重要方法。 水溶液是一種極性環(huán)境,陽離子
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