【正文】
織搗碎機(jī)就可達(dá)到目的。 ? 酶的提取工作應(yīng)在獲得材料后立即開始,否則應(yīng)在低溫下保存, 20~ 70℃ 為宜。 (二)酶的分離和純化 ? ◇ ? ◇ ? ◇ ? ◇ ? ◇ ? ◇ ? 選擇酶含量豐富的新鮮生物材料,一種酶含量豐富的器官或組織往往和含量較低的器官或組織相差上千倍或上萬倍。靈敏度很高,可以檢測 1012mol/L的樣品。 簡便、迅速、準(zhǔn)確。 產(chǎn)率 %(回收率) = —————— 100 每次總活力 第一次總活力 純化倍數(shù):指提純后與提純前酶比活力的比值。 在最適的反應(yīng)條件( 25℃ )下,每分鐘內(nèi)催化一微摩爾底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的酶量定為一個(gè)酶活力單位,即: 1IU=1μ mol/min 在最適條件下,每秒鐘內(nèi)使一摩爾底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物所需的酶量定為 1kat單位,即 1kat=1mol/s 1kat = 6 107IU ? 酶的比活力: 是指每毫克酶蛋白所含有的酶活力單位數(shù),它是酶制劑純度的一個(gè)指標(biāo)。 ? 初速度 反應(yīng)開始時(shí),酶反應(yīng)速度不變時(shí)的速度。反應(yīng)速率越大,酶活力越高,反之,酶活力越低。 ? 該學(xué)說認(rèn)為酶表面并沒有一種與底物互補(bǔ)的固定形狀,而只是由于底物的誘導(dǎo)才形成了互補(bǔ)形狀 . 五、酶的活力測定和分離純化 ? ◇ (一)酶活力的測定 ? ◇ (二)酶的分離和純化 (一)酶活力的測定 ? ◇ ? ◇ ? ◇ ? ◇ ? 酶活力 是指酶催化某一化學(xué)反應(yīng)的能力。 ? 認(rèn)為整個(gè)酶分子的天然構(gòu)象是具有剛性結(jié)構(gòu)的,酶表面具有特定的形狀。 脲酶 : H2N— C— NH2 + H2O O 2NH3 + CO2 (二)關(guān)于酶作用專一性的假說 ? ◇ 1.“ 三點(diǎn)結(jié)合 ” 的催化理論 ? ◇ ? ◇ 1.“ 三點(diǎn)結(jié)合 ” 的催化理論 認(rèn)為酶與底物的結(jié)合處至少有三個(gè)點(diǎn),而且只有一種情況是完全結(jié)合的形式。 酶作用的專一性 結(jié)構(gòu)專一性 立體異構(gòu)專一性 族(基團(tuán)、鍵)專一性 絕對(duì)專一性 光學(xué)異構(gòu)專一性 幾何異構(gòu)專一性 基團(tuán)、鍵專一性:可作用于一類或一些結(jié)構(gòu)很相似的底物。 ? A + B + ATP + HOH === A— B + ADP +Pi ? 例如,丙酮酸羧化酶催化的反應(yīng)。 OC H 2 O HO HO HO HO H OC H 2 O H C H 2 O HO HO HO H ? 合成酶,又稱為連接酶,能夠催化 CC、 CO、 CN 以及 CS 鍵的形成反應(yīng)。 H O O C C H = C H C O O H H 2 O H O O C C H 2 C H C O O HO H ? 異構(gòu)酶催化各種同分異構(gòu)體的相互轉(zhuǎn)化,即底物分子內(nèi)基團(tuán)或原子的重排過程。 ? 裂合酶催化從底物分子中移去一個(gè)基團(tuán)或原子而形成雙鍵的反應(yīng)及其逆反應(yīng)。 C H 3 C H C O O HN H 2H O O C C H 2 C H 2 C C O O HOH O O C C H 2 C H 2 C H C O O HN H 2C H 3 C C O O HO ? 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。 C H 3 C H C O O HO HN A D + H +C H 3 C C O O HON A D H ? 轉(zhuǎn)移酶催化基團(tuán)轉(zhuǎn)移反應(yīng),即將一個(gè)底物分子的基團(tuán)或原子轉(zhuǎn)移到另一個(gè)底物的分子上。 主要包括脫氫酶 (dehydrogenase)和氧化酶 (Oxidase)。 : 催化兩個(gè)底物的連接反應(yīng)或稱之交聯(lián)反應(yīng)。 : 催化非水解和非氧化的底物的消除反應(yīng),或裂解,生成一個(gè)雙鍵。 : 催化水解反應(yīng)。 ? 例如: ? 習(xí)慣名稱 :谷丙轉(zhuǎn)氨酶 ? 系統(tǒng)名稱 :丙氨酸: ?酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶 ? 酶催化的反應(yīng) : ? 谷氨酸 + 丙酮酸 ?? ?酮戊二酸 + 丙氨酸 (三)國際系統(tǒng)分類法及酶的編號(hào) ? : 催化氧化-還原反應(yīng)。如小牛小腸堿性磷酸酶。 ?