高二生物多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段-文庫(kù)吧資料
2024-11-17 23:20本頁(yè)面
【正文】 源加入 反應(yīng)環(huán)境 細(xì)胞內(nèi)環(huán)境 緩沖液 ① PCR過(guò)程需要的引物不是 RNA，而是人工合成的 DNA單鏈，其長(zhǎng)度通常為 20－ 30個(gè)脫氧核苷酸 細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和 PCR不同點(diǎn) ② PCR過(guò)程中 DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通過(guò)對(duì)反應(yīng)溫度的控制來(lái)實(shí)現(xiàn)的 （五） PCR的反應(yīng)過(guò)程 PCR的反應(yīng)步驟 PCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為三個(gè)基本步驟 ── 變性、復(fù)性和延伸 ① 變性（模板 DNA解旋） 模板 DNA經(jīng)加熱至 900C以上。新鏈與舊鏈構(gòu)成新的DNA 邊解旋邊復(fù)制 (過(guò)程） 復(fù)制特點(diǎn) 半保留復(fù)制（結(jié)果） 遵循原則 堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 精確復(fù)制的原因 1復(fù)制的意義 DNA分子通過(guò)復(fù)制使遺傳信息從親代傳給了后代，從而保持了遺傳信息的連續(xù)性 ① 規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)為復(fù)制提供了精確的模板 ② 堿基互補(bǔ)配對(duì)能力保證了復(fù)制準(zhǔn)確無(wú)誤的進(jìn)行 ① 一條雙鏈 DNA分子，復(fù)制 N次，形成的子代DNA分子中，含親代 DNA母鏈的有兩個(gè) DNA分子，占子代 DNA總數(shù)的 2/2N；親代 DNA分子母鏈兩條，占子代 DNA中脫氧核苷酸鏈總數(shù)的 2/2 N+1= 1/2N ② 設(shè)一條 DNA分子中有胸腺嘧啶為 m個(gè)，則該DNA復(fù)制 n次后，形成子代 DNA分子需游離的胸腺嘧啶為 T=(2N1)m 1 DNA復(fù)制過(guò)程中的等量關(guān)系 （四） PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） DNA聚合酶特性 不能從頭合成 DNA，只能從 DNA的 3′ 端開(kāi)始延伸 DNA鏈，因此， DNA復(fù)制需要引物 DNA聚合酶作用過(guò)程 當(dāng)引物與 DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后， DNA聚合酶就能從引物的 3′ 端開(kāi)始延伸DNA鏈， DNA的合成方向總是從子鏈的 5′端向 3′ 端延伸 PCR原理 ① 在 80－ 100176。在 DNA聚合酶的作用下將引物部位換上 DNA，此時(shí)的 DNA片斷稱為岡崎片斷 ⑤ DNA片斷的連接 在 DNA連接酶的作用下將岡崎片斷連接起來(lái)。因?yàn)?A與T之間形成兩個(gè)氫鍵， 在 G和 C之間形成三個(gè)氫鍵， 三個(gè)氫鍵比兩個(gè)氫鍵穩(wěn)定，所以在 DNA分子中含有較多的 G－ C堿基對(duì)比含有較多的 A－T堿基穩(wěn)定 多樣性 構(gòu)成 DNA分子的堿基對(duì)的數(shù)量不同，堿基對(duì)的排列順序千變?nèi)f化 例題：如果有 4000個(gè)堿基對(duì)，堿基對(duì)有多少種排列方式？ 答：堿基對(duì)排列方式有 44000種 特異性 不同的 DNA分子由于
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