基因工程-文庫吧資料
2025-07-24 20:06本頁面
【正文】 堿法制備的，會含有少量的 DNase的污染。 ②擴大酶催化反應的體積，以使?jié)撛诘囊种埔蛩乇幌鄳叵♂?。污染?DNA制劑中的某些物質，例如蛋白質、酚、氯仿、酒精、乙二胺四乙酸 (EDTA)、 SDS(十二烷基硫酸鈉 )、以及高濃度的鹽離子等，都有可能抑制核酸內切限制酶的活性。 ?平末端： 產生的DNA片段末端是平齊的。端長的稱為 5180。粘性末端， 5180。端比 5180。 ?粘性末端： 產生的 DNA片段末端的一條鏈多出一至幾個核苷酸。 Questions 1基因工程的主要理論依據(jù) :共 6點 2核酸內切酶識別序列的規(guī)律 3限制性內切酶的命名 4同位酶、同裂酶、同尾酶 識別相同序列切點不同 識別位點相同，酶的來源不同。 同尾酶：識別位點不同，切出片段有相同末端序列。 同裂酶：識別位點相同，酶的來源不同。 核酸內切酶 Restriction endonuclease GGATCC CCTAGG Bam HⅠ 限制性內切酶的命名 Hin dⅢ 屬 系 株 序 Haemophilus influenzae d株 流感嗜血桿菌 d株的第三種酶 第一個字母取自產生該酶的細菌屬名 ， 用大寫； 第二、第三個字母是該細菌的種名，用小寫； 第四個字母代表株； 用羅馬數(shù)字表示發(fā)現(xiàn)的先后次序。 識別雙鏈 DNA中特殊核苷酸序列，并在合適的反應條件下使每條鏈一定位點上的磷酸二酯鍵斷開，產生具有 3OH和 5P基團的 DNA片段的內切脫氧核糖核酸酶。而限制酶就是從其識別序列內切割 DNA分子的，因此識別序列又稱為核酸內切限制酶的切割位點或靶序列。 識別位點 絕大多數(shù)的 II型核酸內切限制酶，都能夠識別由 4～ 8個核苷酸組成的特定的核苷酸序列。羥基末端進行同質多聚物加尾 堿性磷酸酶 切除末端磷酸基 重組 DNA技術中常用的工具酶 核酸酶分類 核酸內切酶：催化水解多核苷酸內部的磷酸二酯鍵 核酸外切酶：從 DNA
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