【正文】 ification, LOQ)：用添加方法能檢測出待測物在樣品中的最低含量（以mg/kg為單位表示）。n 靈敏度：單位時間或單位體積載氣內(nèi)一定量的物質(zhì)通過檢測器時所產(chǎn)生的信號的大小。檢測系統(tǒng)n 檢測器是測量柱后流出物質(zhì)成分和濃度變化的裝置，通過化學(xué)和物理作用，將流出物質(zhì)成分和濃度的變化轉(zhuǎn)換為電信號。n 每次開機(jī)前都應(yīng)先開載氣，再開儀器、工作站，再設(shè)定方法；關(guān)機(jī)前都應(yīng)將柱箱溫度降到50℃以下，然后再關(guān)電源和載氣。n 暫時不用的色譜柱從儀器上卸下后，柱兩端應(yīng)當(dāng)用一塊硅橡膠（可利用廢進(jìn)樣隔墊）堵上。n 接頭不要擰得太緊，以免將色譜柱壓裂或壓碎。將石墨墊套在柱頭后，應(yīng)將柱頭截去1~2cm。毛細(xì)管色譜柱毛細(xì)管的特點：柱效能高、柱滲透率大、柱容量小，分辨能力、靈敏度、分析速度以及色譜柱的相對惰性都優(yōu)于填充柱。常用的有U形和螺旋形，內(nèi)徑一般在2~4mm，~2m。色譜柱是色譜分離的心臟。 襯管能起到保護(hù)色譜柱的作用，注意及時清洗和更換。 熱聚焦：初始柱溫低于待測分析樣品的沸點150 ℃。 固定相聚焦：初始柱溫要低。進(jìn)樣口和操作參數(shù)的選擇應(yīng)注意的問題：n 樣品的穩(wěn)定性：在保證樣品有效汽化的前提下，進(jìn)樣口溫度應(yīng)盡可能的低一些。n 頂空進(jìn)樣：只取復(fù)雜樣品基體上方的氣體部分進(jìn)行分析，適合于環(huán)境分析、食品分析及固體材料中的可揮發(fā)物分析等。n 程序升溫進(jìn)樣口：將分流/不分流進(jìn)樣和冷柱上進(jìn)樣結(jié)合起來，功能多，適用范圍廣，是較為理想的GC進(jìn)樣口。分析精密度高，重現(xiàn)性好。分流進(jìn)樣最為普遍，操作簡單，但有分流歧視和樣品可能分解的問題，不分流進(jìn)樣雖然操作復(fù)雜一些，但分析靈敏度高，常用于痕量分析。需插入石英玻璃襯管n 隔墊吹掃功能（3ml/min）常見GC進(jìn)樣口及其選擇： 常見GC進(jìn)樣口和進(jìn)樣技術(shù)：n 填充柱進(jìn)樣口：最簡單的進(jìn)樣口，所有汽化的樣品均進(jìn)入色譜柱，可接玻璃和不銹鋼填充柱，也可接大口徑毛細(xì)管柱進(jìn)行直接進(jìn)樣。 幾項技術(shù)指標(biāo)：n 操作溫度范圍：350~420℃n 載氣壓力和流量設(shè)定范圍：0~100psi，0~200ml/min。 純度要求：% 凈化裝置：分子篩、變色硅膠 鋼瓶放置位置：實驗室以外的安全地方n 氣路控制系統(tǒng) 氣路控制系統(tǒng)的好壞直接影響分析重現(xiàn)性。 3800GC 美國瓦里安 電子氣流控制(EFC)也可選擇手動控制 可同時配置三個進(jìn)樣口可同時配置三個檢測器 可全部由工作站控制，也可用積分儀控制；主機(jī)有控制鍵盤。n 進(jìn)樣系統(tǒng)：進(jìn)樣器和氣化室n 柱系統(tǒng)：色譜柱和恒溫箱n 檢測系統(tǒng)：檢測器、恒溫室和放大器n 記錄和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 幾種高檔GC儀器的配置儀器型號廠商氣路系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)檢測系統(tǒng)控制及數(shù)據(jù)處理 Agilent6890 美國安捷倫 電子氣路控制(EPC)也可選擇手動控制可同時配置兩個進(jìn)樣口 可同時配置兩個檢測器 可全部由工作站控制，也可用積分儀控制；主機(jī)有控制鍵盤。 2. 改變柱溫（程序升溫） 3. 改變固定相，即更換色譜柱 4. 利用化學(xué)作用，如通過衍生化反應(yīng)改變待 測物的結(jié)構(gòu)。 薄的液膜和大的擴(kuò)散系數(shù)（或在較高柱溫下）有利于傳質(zhì)。所以較高的載氣流速和黏度大的流動相（或在較低柱溫下）有利于抑制縱向擴(kuò)散。可見在填充柱中，填料粒度越小越有利。 H=A+B/μ+Cμ 式中A為渦流擴(kuò)散項，B/μ為分子擴(kuò)散項，Cμ為傳質(zhì)阻力項，μ為載氣線速度。塔板理論的缺點：n 快速平衡的假設(shè)是難以實現(xiàn)的；n 流動相的不連續(xù)流動是不符合實際的；n 忽略了因濃度差等因素引起的縱向擴(kuò)散；n 流出曲線方程未能描述色譜參數(shù)如載氣流速、固定相性質(zhì)等對峰展寬的影響。 當(dāng)n50時，就可以得到對稱的峰形曲線。n 所有組分開始時都集中于0號板上，而且組分的縱向擴(kuò)散可忽略。塔板理論假設(shè)：n 在柱內(nèi)一小段長度H內(nèi)，組分可以在兩相間迅速達(dá)到平衡，這一小段柱長稱為理論塔板高度H。n 色譜柱越長，分離度R越高。 k=ms/mm，是衡量色譜柱對被分離組分保留能力的重要參數(shù)，k值越大，保留時間越長。K=Cs/Cm，是由組分和固定相的熱力學(xué)性質(zhì)決定的，它是每一組分的特征值，只隨柱溫和柱壓變化。R值越大，分離越好。 分離度R：兩個相鄰組分的保留值之差與其平均峰寬之比。15. 選擇因子、分離度 選擇因子α：也稱相對保留值，是固定液對兩個相鄰組分的調(diào)整保留值之比。半高峰寬（W1/2)：峰高的中點作平行于峰底的直線，此直線與峰兩側(cè)相交兩點之間的距離。峰高：色譜峰最高點到峰底的距離。 tR’= tR t014. 色譜柱效參數(shù)色譜峰：色譜柱流出組分通過檢測器時所產(chǎn)生的響應(yīng)信號曲線。死時間t0：不被固定相溶解或吸附的組分的保留時間（即組分在流動相中所消耗的時間），或流動相充滿柱內(nèi)空隙體積占據(jù)的空間所需要的時間，又稱流動相保留時間。 （儀器未穩(wěn)定造成）最小檢出量：產(chǎn)生3倍噪音信號時 組分的量。（穩(wěn)定—平直直線）噪音：儀器本身所固有的，以噪音 帶表示。第四章 農(nóng)藥殘留分析檢測技術(shù)第一節(jié) 氣相色譜檢測方法及應(yīng)用 氣相色譜基本原理氣相色譜是一種分離技術(shù)，是利用物質(zhì)的沸點、極性及吸附性質(zhì)的差異來實現(xiàn)混合物的分離。? 自動化操作且能與其他色譜儀器聯(lián)用。 ? 集提取、濃縮、凈化（分析）為一體。常用改進(jìn)劑為NHNO2，加入量不超過10%。 萃取時間：與被萃取物質(zhì)在流體中的溶解度及其傳質(zhì)速率呈正向相關(guān)。 流程： SFC影響因素 壓力：影響溶解能力。 CO2的優(yōu)點：密度大，溶解能力強(qiáng)，傳質(zhì)速率高，壓力適中，臨界溫度31℃，便宜易得，無毒，惰性以及極易從提取產(chǎn)物中分離出來等優(yōu)點，當(dāng)前絕大部分超臨界流體提取都是以它為溶劑。SFE就是利用壓力、溫度的變化來實現(xiàn)提取和分離過程的。v SF是介于氣液之間的一種物質(zhì)，只能在物質(zhì)的溫度和壓力超過臨界點事才能存在。 優(yōu)點： 溶劑用量少、快速、提取效率高 缺點： 選擇性不高，萃取液多采用固相萃取、凝膠滲透色譜等加以凈化后再進(jìn)儀器檢測。v 流程：將樣品放入萃取池； 設(shè)定程序，自動進(jìn)行。 特點：所需溶劑少(約15ml/10g)，快速(20min)，提取效率高。v 原理是選擇合適的溶劑、通過提高溫度(50~200℃)和壓力（~）來加快萃取速度，提高萃取效率。 優(yōu)點： v 自動化程度高 v 凈化效率高 v 回收率高 v 柱子可以重復(fù)使用 缺點： 小分子的干擾物會與目標(biāo)化合物一起流出，有時須再增加凈化步驟。v 溶劑的選擇：所選用的溶劑應(yīng)該對目標(biāo)物有良好的溶解度，并對凝膠有一定的膨脹力。其原理是根據(jù)多孔凝膠對不同大小分子的排阻效應(yīng)進(jìn)行分離，樣品中的大分子先被洗脫出來，小分子后被洗脫出來。是將抗體與惰性微珠（如，瓊脂糖、纖維素）共價結(jié)合，然后裝柱，將抗原溶液過免疫親和柱，非目標(biāo)化合物不保留，最后用洗脫緩沖液洗脫抗原，從而得到純化的抗原。 v 反相吸附劑，如C8，C18，主要用來分離親脂性物質(zhì) v 正相吸附劑，用于分離極性較大的農(nóng)藥 優(yōu)點： v 樣品分析時間短 v 溶劑用量少 v 避免了樣品均化、轉(zhuǎn)溶、乳化等帶來的損失 缺點： v 取樣量小造成檢測限較高 v 雜質(zhì)凈化方面不如其他提取技術(shù)理想 4 QuEChERS 法v QuEChERS法是利用固相分散材料與樣品或樣品提取液充分接觸，吸附其中的雜質(zhì)而得到凈化的目的，或者是利用固相吸附劑吸附目標(biāo)分析物，再進(jìn)行解析而凈化。SPME的優(yōu)缺點 操作時間短(一般只需15min，是液液萃取的30%) 操作簡便 無需萃取溶劑 所需樣品量少 適用范圍廣泛 缺點：石英纖維非常脆弱，易折斷，重復(fù)性較差。v 溫度：有利于縮短平衡時間，但會減少吸附量。固相微萃取的影響因素v 固相涂層的性質(zhì)：非極性固相涂層（聚二甲基硅氧烷）；極性固相涂層（聚丙烯酸酯）v 液膜厚度：液膜越厚，吸附量越大，但平衡時間越長。固相微萃取流程v 吸附：萃取過程中應(yīng)用磁力攪拌、超聲振蕩等方式，可縮短達(dá)到平衡的時間。v 其固相是一支覆蓋著一層高聚物固定相（聚丙烯酸酯）的熔融石英纖維。它是利用固相提取的方法實現(xiàn)對樣品的分離和凈化，但所用的固相材料和分離機(jī)制不同。 流速：樣品溶液的流速一般不超過5mL/min。 影響萃取效率的因素 吸附劑選擇：盡量選擇與目標(biāo)化合物極性相似的吸附劑。v 洗去干擾雜質(zhì)：選擇合適的淋洗溶劑將干擾雜質(zhì)先淋洗出小柱，農(nóng)藥保留在小柱中。v 活化吸附劑：萃取樣品前用適當(dāng)?shù)娜軇┝芟垂滔嘀Ｈ鏢AX，SCX等。如C1C8等。如硅膠、弗羅里硅土、氧化鋁、氨基等。v 只能分離性質(zhì)差別較大的物質(zhì)。氮氣吹干法v 氮氣吹干法是直接利用氮氣流輕緩吹拂提取液及提高水浴溫度，加速溶劑的蒸發(fā)速度來濃縮樣品，可以有效防止氧化反應(yīng)但只適合于小體積濃縮。v 特點是可有效減少濃縮過程中農(nóng)藥的損失，且能直接定容測定，無需轉(zhuǎn)移樣品。v 原理是利用旋轉(zhuǎn)濃縮瓶對濃縮液起攪拌作用，并在瓶壁上形成液膜，擴(kuò)大蒸發(fā)面積，同時又通過減壓，使溶劑的沸點降低，從而達(dá)到高效率濃縮目的。3 樣品濃縮技術(shù)樣品濃縮的目的是使檢測溶液中待測物達(dá)到分析儀器靈敏度以上的濃度。v 上樣：將用溶劑稀釋的樣品溶液加在柱上，使樣品通過柱子?；钚蕴刻亢趯χ参锷赜泻軓?qiáng)的吸附能力，對脂肪、蠟質(zhì)吸附不強(qiáng)常與弗羅里硅土或氧化鋁按一定比例配合使用。加入5%~10%重量的水，混勻，放置過夜。使用前再于130 ℃活化12h。 吸附劑的基本要求：具有較大的比表面；適宜的表面孔徑和吸附活性；粒度分布范圍盡量窄，并具有一定的強(qiáng)度。主要干擾雜質(zhì)及性質(zhì)類別化合物及其性質(zhì)脂類色素蠟質(zhì)肽、氨基酸碳水化合物木質(zhì)素脂肪、油脂（動物樣品），不溶于水，溶于多少有機(jī)溶劑葉綠素、葉黃素、胡蘿卜素等（植物樣品），不溶于水，能溶于乙醇、丙酮和石油醚蠟質(zhì)（許多蔬菜），易溶于有機(jī)溶劑含氮，對NPD、FPD檢測器有干擾糖、淀粉等，對低揮發(fā)性和高水溶性農(nóng)藥有干擾酚類及其衍生物，影響氨基甲酸酯類和苯氧羧酸類農(nóng)藥酚類代謝物的分析常用凈化方法v 柱層析法v 濃硫酸處理法（水解脂類和色素，如凈化含有機(jī)氯類樣品）v 低溫冷凍（80℃）法（凈化動物樣品，除去脂肪和某些色素）柱層析法 柱層析法是應(yīng)用最普遍的傳統(tǒng)凈化方法。2 凈化技術(shù) 凈化（cleanup）是指通過物理的或化學(xué)的方法除去提取物中對測定有干擾作用的雜質(zhì)的過程。v 影響提取效率的因素： 1. 提取溶劑的選擇 2. 水相的鹽濃度 3. 水相的PH值有機(jī)相、水相、乳化物和外力是乳化形成的主要因素。v 常用的二相溶劑對系統(tǒng)有：乙酸乙酯水、二氯甲烷水，石油醚水、石油醚丙酮等。將一種溶劑加入被測溶液中，利用被測組分在兩相中的分配不同而進(jìn)入有機(jī)相，其他組分仍留在原液中而達(dá)到分離的目的。吹掃捕集法v 主要用于水樣中揮發(fā)性有機(jī)物的分析。v 提取效率高，但耗時長8h以上）v 適用于勻漿法等難提取樣品中殘留農(nóng)藥的提取或是作為其他提取方法提取效率的參照標(biāo)準(zhǔn)。在超聲波清洗槽中裝入一定量的水，將裝有樣品和提取溶劑的玻璃瓶放入其中，提取溶劑的液面要與槽中水面齊平。v 適用于蔬菜、水果等新鮮動植物組織樣品中農(nóng)藥的提取。組織搗碎法v 組織搗碎法也是一種常用的方法。它是將樣品粉碎后置于具塞三角瓶中，加入一定量的提取溶劑，用振蕩器振蕩1~3次，~1h，過濾出溶劑后，再用溶劑洗滌濾渣一次或數(shù)次，合并提取液后進(jìn)行濃縮凈化。 常用提取方法有振蕩法、搗碎法、超聲波法、索氏提取法、吹掃捕集法。 1. 溶劑的極性（“相似相溶”原理） 2. 溶劑的純度（分析純以上） 3. 溶劑的沸點（45~80℃之間）。提取原則：根據(jù)農(nóng)藥理化性質(zhì)按“相似相溶”原理進(jìn)行。 農(nóng)藥的水溶性還受溫度、含鹽量、有機(jī)質(zhì)、PH值的影響。 常用溶劑的極性大?。? 己烷（石油醚）苯乙醚氯仿二氯甲烷丙酮乙酸乙酯乙腈二甲亞砜甲醇水 2）溶解性 指農(nóng)藥在水相和有機(jī)相中的溶解能力。 農(nóng)藥的極性和溶解性是選擇提取和凈化條件的重要依據(jù)，在殘留農(nóng)藥的溶劑提取中常采用“相似相溶”原理：使用與農(nóng)藥極性相近的溶劑為提取劑，使殘留農(nóng)藥在溶劑中達(dá)到最大溶解度。（衍生化） 4）延長儀器的使用壽命。 2）提高測試精度。包括從樣品中提取殘留農(nóng)藥，濃縮提取液和去除提取液中干擾性雜質(zhì)的分離凈化等步驟，是將實驗室樣品處理成適合測定的檢測溶液的過程。規(guī)范——報告的編寫格式應(yīng)符合有關(guān)要求。eKT C為時間T時的農(nóng)藥殘留量（mg/kg） C0為施藥后原始沉積量（mg/kg） K為消解系數(shù) T為施藥后時間（天） 半衰期: T(1/2)=ln2/k檢測記錄標(biāo)準(zhǔn)樣品購買、使用記錄試劑、玻璃器皿、氣源購買、使用記錄天平使用、維護(hù)記錄氣相、液相等儀器使用、維護(hù)記錄標(biāo)準(zhǔn)溶液配制記錄方法摸索前處理記錄樣品檢測記錄、數(shù)據(jù)處理記錄6 試驗報告的撰寫v 農(nóng)藥殘留試驗報告的組成 封面 目錄 正文（前言、田間試驗、檢測方法、殘留試驗結(jié)果、結(jié)論與合理使用建議） 圖表（表格、曲線圖、譜圖）農(nóng)藥殘留試驗報告的總體要求v 農(nóng)藥殘留試驗報告的用途 農(nóng)藥生產(chǎn)企業(yè)申請農(nóng)藥殘留登記提交材料 制定農(nóng)藥合理