胚胎干細胞的研究與應用畢業(yè)論文正文-文庫吧資料
2025-06-28 19:06本頁面
【正文】 治療白內障的一個可能途徑，而且可以很好的解決術后調節(jié)問題。一些細胞群內可見色素上皮細胞的存在。目前，人工晶狀體植入在白內障治療中得到世界范圍的廣泛應用，其手術方法的安全性是明確的，但是術后的調節(jié)問題一直沒有得到很好的解決。由此可見，對于雙眼完全性角膜緣干細胞缺乏的病例，ESCs很有可能為角膜緣干細胞移植和眼表重建提供充足的細胞來源。然后將誘導后的上皮祖細胞移植到以n－庚醇制備的角膜損傷小鼠模型，移植后24h可見受損角膜重新上皮化，修復細胞來源于移植的干細胞。2001年，喻瓴等將大鼠ESC 細胞與兔角膜緣上皮細胞共同培養(yǎng)以誘導其分化,結果由ESCs分化出的細胞具有上皮細胞表型,并且還表達角膜上皮細胞特異性標志物細胞角蛋白K3/ K12。雖然目前自體角膜緣干細胞移植[15]和口唇粘膜移植可以成功的進行眼表重建，但一些嚴重的眼表疾病如StevensJohnson綜合癥，通常是雙眼發(fā)生病變，且口唇粘膜同時受累，因此，將ESCs誘導形成角膜緣干細胞，為治療此類疾病提供了新的思路。近年來，大量實驗研究表明多種中藥對胚胎干細胞的定向分化有調控作用，這些發(fā)現(xiàn)不僅為干細胞的定向分化開辟了新的途徑，而且對于中藥作用機制的研究、中藥新藥的研制開發(fā)、某些疑難疾病防治水平的提高等都具有重要意義。由于這類細胞本質上可以無限量地產(chǎn)生人體細胞，它們對于旨在發(fā)現(xiàn)稀有人蛋白的研究計劃理應有用。另外，由于胚胎干細胞類似于早期胚胎的細胞，它們有可能用來揭示哪些藥物干擾胎兒發(fā)育和引起出生缺陷。當細胞系實驗表明藥品是安全的且效果良好，才有資格在實驗室進行動物和人體的進一步實驗。目前用于藥物篩選的細胞都來源于動物或癌細胞這樣非正常的人體細胞，而胚胎干細胞可以經(jīng)體外定向誘導，為人類提供各種組織類型的人體細胞，這使得更多類型的細胞實驗成為可能。它發(fā)展為胚體后的生物系統(tǒng)，可模擬體內細胞與組織間復雜的相互作用，這在藥物研究領域具有廣泛的用途。 動物發(fā)育生物學研究 近年來細胞分化是發(fā)育生物學的核心問題之一，至今有許多問題還不清楚，而體外培養(yǎng)PGCs并建立ESCs系提供了在細胞和分子水平上研究哺乳動物發(fā)育生物學提供了理想的實驗體系。5．3 組織和器官的修復 由于ES細胞具有多能性，可發(fā)育分化為三胚層細胞，即發(fā)育分化成機體所有類型組織細胞的能力，任何因物理、化學或生物因素等造成的細胞損傷或病變都可以通過移植由ES細胞定向分化而來的特異組織細胞或器官來治療。5．1 克隆動物的生產(chǎn) 由于ESCs具有全能性和多能性，并可以在體外增殖、 分化，因而是克隆動物的理想材料，ESCs的運用大大加快了家畜育種工作的進程，迅速提高有利于基因及其組合在群體中的比例。而且能有效地抑制體外培養(yǎng)中PGCs的分化，的確是一項值得繼續(xù)研究與開發(fā)的好方法。近年來，研究人員通過實驗發(fā)現(xiàn)，以睪丸支持細胞(SCs)作為飼養(yǎng)層與PGCs共飼養(yǎng)，可明顯提高PGCs的增殖能力[11]，SCs除可以產(chǎn)生大量CL外， 還可產(chǎn)生層粘連蛋白(LN)(一種黏附蛋白)，另外，SCs還能分泌多種內源性生長因子和分泌抑制因子，包括LIF、SCF(干細胞生長因子)、bFGF(堿性成纖維細胞因子)等。由于后者所模擬的體外培養(yǎng)條件與PGCs在體內生長的環(huán)境更為接近。 飼養(yǎng)層對胚胎干細胞的影響 適宜飼養(yǎng)層的使用使得體外培養(yǎng)的PGCs增殖成為可能。因DMEM比較適于生長速度快和呈集落狀生長的細胞，而PGCs正符合這一特點。 PGCs用于ESCs培養(yǎng)的影響因素 基礎培養(yǎng)基的選擇 ESCs的體外培養(yǎng)工作要求在嚴格的無菌條件下進行。第四章 PGCs用于胚胎干細胞培養(yǎng)4．1 意義 ESCs因其發(fā)育的全能性和多樣性而備受關注。細胞全能性的實質是細胞基因組中決定蛋白質編碼的所有基因按一定的時空順序依次表達。 3．2．3全能性(totipotenty) ESCs的全能性是指其在解除分化抑制的條件下，能發(fā)育為構成機體不同細胞類型中包括生殖腺在內的任何一種細胞的潛 力。②用于移植時，不易產(chǎn)生免疫排斥反應。3．2．2可操作性 ESCs的可操作性，是指ESCs可進行遺傳操作選擇(如導入異源基因、基因重組)等生物學特性。②特定組織：將ESCs在含有特定添加物的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，可定向分化形成特定組織。表明ESCs發(fā)育多能性的檢測方法很多，主要有：①形成類胚體：體外培養(yǎng)誘導分化實驗，將ESCs在不含分化抑制物的培養(yǎng)基上培養(yǎng)?？偟膩碚f，ESCs具有與胚胎細胞相似的形態(tài)特征。在體外培養(yǎng)的小鼠ESCs緊密
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