【正文】 ，向?qū)Ь`提示這一步結(jié)束，點(diǎn)擊Next進(jìn)入下一步。讀板完成后，查看每個(gè)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的檢驗(yàn)情況(根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果在以下三個(gè)對(duì)話框中填入信息)：Valid Text 條件匹配 Invalid Text 條件不匹配，計(jì)算的結(jié)果可信度不高。進(jìn)行分類的數(shù)據(jù)首先和第一個(gè)分類的標(biāo)準(zhǔn)（）進(jìn)行比較，如果小于第一臨界值就表示為L(zhǎng)OW，如果大于等于第一個(gè)臨界值則表示為“HIG”，其他依次類推，可以設(shè)定不同級(jí)別的分類標(biāo)準(zhǔn)。Cutoffs 輸入臨界值，臨界值可以是數(shù)字，也可以是公式或者孔符號(hào)。每次設(shè)置結(jié)束點(diǎn)擊OK保存設(shè)置3 Cutoff：雙擊圖標(biāo)，進(jìn)入臨界值設(shè)定界面Data In 選擇要進(jìn)行分類的數(shù)據(jù)。2 Curve Analysis：雙擊按鈕，進(jìn)入曲線分析界面Curve Name：輸入曲線的名稱Data In：選擇曲線中X、Y軸相對(duì)應(yīng)的數(shù)值Curve Fit：Curve Fit Method 選擇曲線類型；X Axis Data 、Y Axis Data：選擇軸的線性關(guān)系lin 或者log；Extrapolation Factor：外推因子，對(duì)超出標(biāo)準(zhǔn)濃度的樣本進(jìn)行推算Data Out：Concentrations 定義計(jì)算值的名稱；Interpolations在該對(duì)話框內(nèi)。 Gene5同時(shí)提供了多重公式計(jì)算的功能，如果你還需要對(duì)全部的樣品或部分樣品進(jìn)行公式計(jì)算，則可以再次雙擊按鈕，進(jìn)行再一次的賦值計(jì)算，直到完成全部計(jì)算任務(wù)。如果公式適用于所有孔，則勾選 Use single formula for all wells， 則所有的孔都進(jìn)行相應(yīng)的公式計(jì)算；如果只對(duì)單獨(dú)的孔進(jìn)行計(jì)算，則不需勾選Use single formula for all wells，輸入公式后雙擊下方的96孔板示意圖中相應(yīng)的孔，公式自動(dòng)對(duì)相應(yīng)孔進(jìn)行計(jì)算。第三步：數(shù)據(jù)分析設(shè)置雙擊Data Reduction下方的彩色圖標(biāo)進(jìn)入數(shù)據(jù)分析設(shè)置界面，該界面為您提供Transformation、Well Analysis、Curve Analysis、Cutoff、Validation、Polarization 幾個(gè)功能模塊可供選擇。Incr：表示每點(diǎn)之間＋多少濃度Fact：表示每點(diǎn)之間多少倍濃度布好的平板圖如下：實(shí)驗(yàn)不同酶標(biāo)板的排布也不盡相同，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)的需求對(duì)酶標(biāo)板進(jìn)行排布。Filling：Horz or Vert 選擇不同樣本間的排列方式，橫排還是豎排。Horz or Vert 選擇重復(fù)樣本的排列方式，橫排還是豎排。在下拉框中選擇想要定義的孔的類型，然后在下方空白的模式96孔板中進(jìn)行點(diǎn)擊排布。8 ：溫度設(shè)定，單擊Set temperature按鈕 Incubator off 溫度孵育關(guān)閉 Incubator on 溫度孵育打開，并設(shè)定時(shí)間，（并可選擇是否預(yù)熱）9 ：酶標(biāo)板的進(jìn)出控制，單擊Plate out/in按鈕，根據(jù)需要選擇酶標(biāo)板彈出，顯示對(duì)話框（ment中填寫對(duì)話），酶標(biāo)板彈入酶標(biāo)板彈出無(wú)對(duì)話框酶標(biāo)板彈入無(wú)對(duì)話框10 ：讀數(shù)結(jié)束選擇，是否選擇結(jié)束前彈出酶標(biāo)板并添加提示語(yǔ)11 ：對(duì)所編寫的程序是否符合邏輯進(jìn)行有效性的驗(yàn)證，如果不符合顯示錯(cuò)誤的問(wèn)題在第幾步注意：1以上11個(gè)步驟選擇并不是每一個(gè)程序都要用到而是根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需要來(lái)進(jìn)行任意的組合舉例：雙熒光報(bào)告基因檢測(cè)步驟設(shè)置第二步：布板在第一步檢測(cè)步驟設(shè)置成功后，點(diǎn)擊OK，精靈向?qū)?huì)提示，點(diǎn)擊Next，進(jìn)入第二步，開始對(duì)酶標(biāo)板進(jìn)行拍布。Full plate：選擇要檢測(cè)的孔（出現(xiàn)在不同步驟中，可以定義該步驟所對(duì)應(yīng)的孔）Pathlength correction：光程校正（表示對(duì)樣本孔的值進(jìn)行光程校正，因?yàn)槊笜?biāo)板各樣本孔內(nèi)樣本液的高度不一定為1cm，使用該選項(xiàng)，可自動(dòng)把吸收值校正為光程1cm時(shí)的吸收值）3 ：分液裝置（根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行設(shè)置），單擊Dispenser按鈕 Dispenser： 選擇進(jìn)樣器（一般為兩個(gè)），可以按照實(shí)驗(yàn)需要對(duì)進(jìn)樣器進(jìn)行設(shè)置Tip primer：選擇是否需要將分液器的尖端充盈，防止空氣的殘留，并選擇充盈的液體體積Dispense： 選擇進(jìn)樣的體積和進(jìn)樣的速度 4 ：振蕩，單擊Shake按鈕Intensity：選擇振蕩的強(qiáng)度（低速、中速、高速、變速）Duration：選擇振蕩的時(shí)間5 ：延時(shí)，單擊Delay按鈕Delay time：選擇在何步驟進(jìn)行停頓以及停頓的時(shí)程。2 ：讀板，單擊Read按鈕，設(shè)置讀板參數(shù)Step label：對(duì)你所進(jìn)行的讀取步驟進(jìn)行命名Detection method：對(duì)你進(jìn)行的檢測(cè)類型進(jìn)行選擇 （吸光 發(fā)光 熒光）Read type：對(duì)選擇的檢測(cè)類型定義方法 （終點(diǎn)法 面積掃描法 光譜法）Sanning 功能，點(diǎn)擊右側(cè)則彈出下面的對(duì)話框，選擇掃描的矩陣選擇該功能可以對(duì)每個(gè)孔進(jìn)行多次讀數(shù)，讀數(shù)的次數(shù)通過(guò)設(shè)置矩陣的大小來(lái)控制，讀數(shù)次數(shù)越多準(zhǔn)確度越高，但是讀板的速度會(huì)降低。2 儀器自檢：當(dāng)酶標(biāo)儀與計(jì)算連接好之后，打開Gene5軟件，出現(xiàn)歡迎界面向?qū)Ь`讀板系統(tǒng)測(cè)試軟件培訓(xùn)系統(tǒng)菜單選擇System Menu System Read ConfigurationAdd選擇當(dāng)前使用的酶標(biāo)儀的型號(hào)和正確的Com PortTest Comm（檢測(cè)連接） OK OK Close第二章 如何編寫一個(gè)檢測(cè)程序任何一次檢測(cè)實(shí)驗(yàn)都要以相應(yīng)的檢測(cè)程序?yàn)榛A(chǔ)，因此實(shí)驗(yàn)的第一步就是要打開一個(gè)程序（protocol），如果是第一次編寫程序，建議您在Gene5軟件的歡迎界面中選擇 向?qū)Ь`來(lái)幫助您完成程序的編寫。兩個(gè)注射器都在底部探頭的正上方，可將試劑同時(shí)加進(jìn)一個(gè)孔中。帶有注射器模塊的機(jī)型支持雙注射器分液到1，6，12，24，48和96孔板中。內(nèi)置的孔板振蕩功能保證了在孔板中加入不同試劑后能很好的混勻從而更準(zhǔn)確的讀板。Synergy2可與自動(dòng)機(jī)械裝置連用，也可與BioTek的Bio