【正文】 OW，如果大于等于第一個臨界值則表示為“HIG”，其他依次類推，可以設定不同級別的分類標準。Cutoffs 輸入臨界值，臨界值可以是數字，也可以是公式或者孔符號。每次設置結束點擊OK保存設置3 Cutoff：雙擊圖標，進入臨界值設定界面Data In 選擇要進行分類的數據。2 Curve Analysis：雙擊按鈕，進入曲線分析界面Curve Name：輸入曲線的名稱Data In：選擇曲線中X、Y軸相對應的數值Curve Fit：Curve Fit Method 選擇曲線類型；X Axis Data 、Y Axis Data：選擇軸的線性關系lin 或者log；Extrapolation Factor：外推因子，對超出標準濃度的樣本進行推算Data Out：Concentrations 定義計算值的名稱；Interpolations在該對話框內。 Gene5同時提供了多重公式計算的功能，如果你還需要對全部的樣品或部分樣品進行公式計算，則可以再次雙擊按鈕，進行再一次的賦值計算，直到完成全部計算任務。如果公式適用于所有孔，則勾選 Use single formula for all wells， 則所有的孔都進行相應的公式計算；如果只對單獨的孔進行計算，則不需勾選Use single formula for all wells，輸入公式后雙擊下方的96孔板示意圖中相應的孔，公式自動對相應孔進行計算。第三步：數據分析設置雙擊Data Reduction下方的彩色圖標進入數據分析設置界面，該界面為您提供Transformation、Well Analysis、Curve Analysis、Cutoff、Validation、Polarization 幾個功能模塊可供選擇。Incr：表示每點之間＋多少濃度Fact：表示每點之間多少倍濃度布好的平板圖如下：實驗不同酶標板的排布也不盡相同，實驗人員應按照實驗的需求對酶標板進行排布。Filling：Horz or Vert 選擇不同樣本間的排列方式，橫排還是豎排。Horz or Vert 選擇重復樣本的排列方式，橫排還是豎排。在下拉框中選擇想要定義的孔的類型，然后在下方空白的模式96孔板中進行點擊排布。8 ：溫度設定，單擊Set temperature按鈕 Incubator off 溫度孵育關閉 Incubator on 溫度孵育打開，并設定時間，（并可選擇是否預熱）9 ：酶標板的進出控制，單擊Plate out/in按鈕，根據需要選擇酶標板彈出，顯示對話框（ment中填寫對話），酶標板彈入酶標板彈出無對話框酶標板彈入無對話框10 ：讀數結束選擇，是否選擇結束前彈出酶標板并添加提示語11 ：對所編寫的程序是否符合邏輯進行有效性的驗證，如果不符合顯示錯誤的問題在第幾步注意：1以上11個步驟選擇并不是每一個程序都要用到而是根據實驗的具體需要來進行任意的組合舉例：雙熒光報告基因檢測步驟設置第二步：布板在第一步檢測步驟設置成功后，點擊OK，精靈向導會提示，點擊Next，進入第二步，開始對酶標板進行拍布。Full plate：選擇要檢測的孔（出現在不同步驟中，可以定義該步驟所對應的孔）Pathlength correction：光程校正（表示對樣本孔的值進行光程校正，因為酶標板各樣本孔內樣本液的高度不一定為1cm，使用該選項，可自動把吸收值校正為光程1cm時的吸收值）3 ：分液裝置（根據實驗需要進行設置），單擊Dispenser按鈕 Dispenser： 選擇進樣器（一般為兩個），可以按照實驗需要對進樣器進行設置Tip primer：選擇是否需要將分液器的尖端充盈，防止空氣的殘留，并選擇充盈的液體體積Dispense： 選擇進樣的體積和進樣的速度 4 ：振蕩，單擊Shake按鈕Intensity：選擇振蕩的強度（低速、中速、高速、變速）Duration：選擇振蕩的時間5 ：延時，單擊Delay按鈕Delay time：選擇在何步驟進行停頓以及停頓的時程。2 ：讀板，單擊Read按鈕，設置讀板參數Step label：對你所進行的讀取步驟進行命名Detection method：對你進行的檢測類型進行選擇 （吸光 發(fā)光 熒光）Read type：對選擇的檢測類型定義方法 （終點法 面積掃描法 光譜法）Sanning 功能，點擊右側則彈出下面的對話框，選擇掃描的矩陣選擇該功能可以對每個孔進行多次讀數，讀數的次數通過設置矩陣的大小來控制，讀數次數越多準確度越高，但是讀板的速度會降低。2 儀器自檢：當酶標儀與計算連接好之后，打開Gene5軟件，出現歡迎界面向導精靈讀板系統測試軟件培訓系統菜單選擇System Menu System Read ConfigurationAdd選擇當前使用的酶標儀的型號和正確的Com PortTest Comm（檢測連接） OK OK Close第二章 如何編寫一個檢測程序任何一次檢測實驗都要以相應的檢測程序為基礎，因此實驗的第一步就是要打開一個程序（protocol），如果是第一次編寫程序，建議您在Gene5軟件的歡迎界面中選擇 向導精靈來幫助您完成程序的編寫。兩個注射器都在底部探頭的正上方，可將試劑同時加進一個孔中。帶有注射器模塊的機型支持雙注射器分液到1，6，12，24，48和96孔板中。Synergy4可支持標準面積的12886毫米的1，6，12，24，48，96，384，和1536孔板，以及96孔半域板。Synergy4具獨特的4ZONETM溫度控制功能，控溫范圍可從環(huán)境以上4度到50度。Synergy4可與自動機械裝置連用，也可與BioTek的BioStack儲板器配套使用。此外還有區(qū)域掃描，光譜掃描，和光路徑校正等多種讀板方式。氙閃燈可以進行紫外和可見光的檢測?；诠鈻畔到y的型號可進行發(fā)光光譜掃描（但是它不支持終點法和動力學法）?；瘜W發(fā)光實驗則是通過發(fā)射濾光輪上空的位置來檢測?；诠鈻诺臒晒夤饴废到y的機型則提供激發(fā)光在250700nm，發(fā)射光在300800nm區(qū)間內并可以以1nm遞增的光譜范圍選擇?；跒V光片系統的機型可以配備用戶可以自行更換的鏡架以及二向色鏡。快速波長切換