【正文】 處理，并及時報告實驗室污染預防及應急處置專業(yè)小組。 實驗室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏、污染時，實驗室工作人員應及時向實驗室污染預防及應急處置專業(yè)小組報告，在 2 小時內向感染控制科報告，并立即采取以下控制措施，防止高致病性病原微生物擴散。 （ 4）如果潛在感染性物質溢出，立即用布或紙巾覆蓋，由外圍向中心傾 倒消毒劑，一定時間（約 30 分）后，清除污染物品，再用消毒劑擦拭。 （ 2）如果病原微生物潑濺在實驗室工作人員眼內，立即用生理鹽水或洗眼液沖洗，然后用清水沖洗。 四、應急處理程序 （一）、病原微生物污染應急處置措施 實驗室如果發(fā)生一般病原微生物潑濺或泄漏事故，按 生物安全的有關要求，根據(jù)病原微生物的抵抗力選擇敏感的消毒液進行消毒處理。 加強預防工作，每個人都要認真負責執(zhí)行實驗室的各項制度，特別是實驗室安 全管理制度、各種有毒有害易污染實驗室和其周圍環(huán)境的物品及廢物的管理制度等的執(zhí)行；對安全隱患及時排除，對不能排除的應及時報告有關部門及時排除，對可能突發(fā)的實驗室污染事件而存在的安全隱患應采取快速有效的控制措施，并及時向實驗室污染預防及應急處置專業(yè)小組報告；同時期采取有效的防范措施。 (二 )實驗室污染預防及應急處置專業(yè)小組職責 負責組織本小組的全體成員開展日常督促檢查實驗室污染預防與應急處理的組織建立、人員培訓、技術和物資等的落實，指揮實驗室污染突發(fā)事件的現(xiàn)場和調查處理工作。 二、適用范圍 本預案適用于本科室各檢驗實驗室及實驗室周 圍環(huán)境。 可疑高致病菌的 消毒和感染物的處理 對可疑培養(yǎng)物、標本用高壓蒸汽滅菌法消毒，消毒完后按生物污染物處置程序進行處理。二類主要包括：土拉弗郎西絲菌、布氏菌、炭疽芽孢菌、肉毒梭菌、鼻祖假單胞菌、類鼻祖假單胞菌、麻風分枝桿菌、結核分枝桿菌；狂犬病毒、森林腦炎病毒、流行性出血熱病毒；各種立克次體等。 我國的菌種分為四類，一類和二類均為高致病性菌。 可疑高致病菌上報、消毒和感染物處理程序 1 目的 規(guī)范實驗室培養(yǎng)出可疑高致病菌的上報、消毒和感染物的處理。 3．利器盒不許混入垃圾里。 （六）銳器 1．使用后的注射針頭不應再次使用。 （四）同位素 1．需要廢棄的同位素不應被隨意攜帶出專門的實驗室； 2．在保證密封的情況下，穿戴全套防護服將其送至指定地點，途中務必防止泄漏； 3．在當日實驗記錄中記錄處理方法和結果。 （二）非感染性生物材料 1．單克隆抗體、質粒、細胞等非感染性生物材料集中放置在所里指定的位置，以備高壓蒸汽滅菌后廢棄； 2．用來盛放的容器應用消毒液浸泡； 3．嚴格與感染性生物材料區(qū)分，防止二者混放； 4．過期的生物性試劑材料應廢棄，禁止使用?？芍貜褪褂玫倪\輸容器應防滲漏，并且 有密閉的蓋子，這些運輸容器在送回實驗室重新使用前要消毒并清洗干凈。 所有感染性材料都應該在防滲漏的容器里高壓滅菌，在處理以前，感染性材料裝入可高壓的黃色塑料袋。廢棄物應保持和消毒液直接接觸并根據(jù)所使用的消毒劑選擇浸泡時間，然后把消毒液及廢棄物倒入一個容器里以備高壓或焚燒。 WHO 提供微生物安全培訓的各種教具。通常的結果為，培訓對象與其他人相比，對課程內容的某些部分會有更好的理解、掌握和應用。 培訓調整。 對培訓效果最完整的評估應包括全部上述四個方面。 評估培訓對象在工作中的行為變化 檢查培訓對象對所進行培訓的反應 培訓評估有助于判斷培訓是否達到了預定效果。此外，提供與實際工作條件相似的實踐機會有助于將技能應用到實際工作中。教學內容（例如培訓課程、錄像帶、文字材料等）不應該同所教授的技術或主題相 沖突、相抵制或沒有關聯(lián)。除了考慮這些因素外，建議制定安全培訓規(guī)劃的人員要熟悉了解成人教育的基本原則。對某些人應采用更直觀的或“手把手” 的方式更好； 而其他人則以學習文字材料更有效果。不同人員在資質、讀寫、文化、口語以及培訓前所掌握的技術水平等方面都可能不一致。 考慮不同培訓對象的差異。其他的內容可能集中在練習如何解決工作中發(fā)生的問題，以及學習糾正那些人們在使用某一技術過程中所犯的錯誤。培訓內容是受培訓者為了實現(xiàn)實驗操作目標所必須掌握的知識或技術。培訓的目的是要 了解開展實驗的條件以及所需的熟練水平。 確立培訓目的。下列各項是保證生物安全培訓規(guī)劃行之有效的必備要素： 需求評估。在生物安全官員和其他部門人員的協(xié)助下，實驗室主管在人員的培訓工作中發(fā)揮著重要的作用。 有關特殊微生物因子處理的詳細資料見參考文獻 1 26 和 27。 1用具應當用含 20g/L（ 2%） 有效氯的次氯酸鈉浸泡 1 h，然后用水徹底清洗再進行高壓滅菌。 1 HEPA過濾器摘除后需要在至少 1000℃ 的溫度下焚燒。但是，安全柜仍必須用標準方法來清除污染（如甲醛蒸氣），以滅活可能存在的其他微生物因子。 1污染有朊蛋白的感染性廢液應當用含 20g/L（ 2%）有效氯的次氯酸鈉（終濃度）處理 1 h。 實驗臺垃圾，包括一次性手套、隔離衣和圍裙，均應當采用多孔負荷蒸汽滅菌器在 134～137 ℃高壓滅菌 18 min 一個循環(huán)，或高壓滅菌 3 min 六個循環(huán)，然后再焚燒。 福爾馬林固定的組織，即使在長時間福爾馬林的浸泡后，仍應視作具有感染性。 所有操作必須在生物安全柜中進行。 強烈建議使用一次性塑料制品，它們可按干廢棄物處理并丟棄。由于朊蛋白不能被普通的實驗室消毒和滅菌方法所滅活，故應當遵循以下防護措施： 強烈建議使用專用儀器設備，亦即不與其他實驗室共用儀器。 由于很難徹底滅活朊蛋白，因此盡可能地使用一次性器具，在 生物安全柜的工作臺面使用一次性防護罩，這些措施都非常重要。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織中發(fā)現(xiàn)有最高濃度的朊蛋白，動物研究還表明在脾臟、胸腺、淋巴結和肺內可能也有高濃度的朊蛋白。不過，在操作已感染或潛在感染的人或動物材料時，還是應當謹慎注意防護。usslerScheinker syndrome）、人類致死性家族性失眠癥和庫魯病、綿羊和山羊的瘙癢病、家畜的牛海綿狀腦?。?bovine spongiform encephalopathy， BSE）， 以及鹿、糜鹿及貂的傳染性腦病。戊二醛可以用于清除表面污染（見第 14 章）。 清除污染 建議使用次氯酸鹽和高級別的消毒劑來清除污染。如果必須進行冰凍切片，應當罩住冰凍機，操作者要戴安全防護面罩。 組織 組織標本應用福爾馬林固定。 排出物應當收集在封閉的容 器內進一步高壓滅菌和／或廢棄。應當用鑷子拿取這些東西，妥善儲存，并經(jīng)清除污染和／或高壓滅菌后再丟棄。 不能將皮下注射針作為移液管使用（參見本章“避免感染性物質的接種”部分）。 玻璃器 皿和“銳器” 盡可能用塑料制品代替玻璃制品。 在防護衣外面要再穿上塑料圍裙。 打開標本管和取樣 應當在生物安全柜內打開標本管。檢驗申請單應當分開放置在防水袋或信封內。用完后自動廢棄針頭。 應當由受過培訓的人員來采集病人或動物的血樣。 對血液和其他體液、組織及排泄物的標準防護方法 設計標準防護方法（其中包括“常規(guī)預防措施 [19]”）以降低從已知或未知感染源的微生物傳播危險 [2]。當從冷藏處取出安瓿時，實驗室工作人員應當進行眼睛和手的防護。如果需要低溫保存，安瓿應當儲存在液氮上面的氣相中。 緩慢向安瓿中加入液體來重懸凍干物，避免出現(xiàn)泡沫。將頂部小心移去并按污染材料處理。 如果管內有棉花或纖維塞，可以在管上 *近棉花或纖維塞的中部銼一痕跡。 裝有凍干感染性物質安瓿的開啟 應該小心打開裝有凍干物的安瓿，因為其內部可能處于負壓，突然沖入的空氣可能使一些物質擴散進入空氣。 除非有防爆措施，否則冰箱內不能放置易燃溶液。未標明的或廢舊物品應當高壓滅菌并丟棄。清理時應戴厚橡膠手套并進行面部防護，清理后要對內表面進行消毒。 操作和打開組織研磨器時應當在生物安全柜內進行。 組織研磨器的使用 拿玻璃研磨器時應戴上手套并用吸收性材料包住。 操作結束后，應在生物安全柜內打開容器。 使用勻漿器、搖床和超聲處理器時，應該用一個結實透明的塑料箱覆蓋設備，并在用完后消毒。 在使用勻漿器、搖床和超聲處理器時，容器內會產生壓力，含有感染性物質的氣溶膠就可能從蓋子和容器間隙逸出。 蓋子、杯子或瓶子應當保持正常狀態(tài)，沒有裂縫或變形。 勻漿器、搖床、攪拌器和超聲處理器的使用 實驗室不能使用家用（廚房）勻漿器，因為它們可能泄漏或釋放氣溶膠。而在Ⅲ級生物安全柜內封閉離心時，可以防止生成的氣溶膠廣泛擴散。 1當使用離心機時，可能噴射出可在空氣中傳播的感染性顆粒。 1每次使用后，要清除離心桶、轉子和離心機腔的污染。如污染明顯，應重新評估離心操作規(guī)范。 1當使用固定角離心轉子時，必須小心不能將離心管裝得過滿，否則會導致漏液。鹽溶液或次氯酸鹽溶液對金屬具有腐蝕作用，因此不能使用。 操作指南中應給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。 離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內進行。 離心管和盛放離心標本的容器應當由厚壁玻璃制成，或最好為塑料制品，并且在使用前應檢查是否破損。 應按照操作手冊來操作離心機。 應備有適當?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出標本（見第 14 章）。移液管應在消毒液中浸泡適當?shù)臅r間，然后再丟棄或滅菌清洗后重復使用。嚴禁用口吸液。 規(guī)范的實驗操作技術可以避免或盡量減少噴濺和氣溶膠的產生。 血清的分離 只有經(jīng)過嚴格培訓的人員才能進行這項工作。一次性物品應丟棄在防∕耐穿透的帶蓋容器中。 以下兩點可以減少針刺損傷：（ a） 減少使用注射器和針頭（可用一些簡單的工具來打開瓶塞，然后使用吸管取樣而不用注射器和針頭）；（ b）在必須使用注射器和針頭時， 采用銳器安全裝置。應盡可能用塑料制品代替玻璃制品。 在所有可能產生潛在感染性物質噴濺的操作過程中，操作人員應將面部、口和眼遮住或采取其他防護措施。 在實驗室里時，嘴里不應有東西 —— 鋼筆、鉛筆、口香糖。實驗室人員在操作時應戴一次性手套，并避免觸摸口、眼及面部。 生物安全柜的詳細介紹見第 10 章。 1在安全柜內的工作開始前和結束后，安全柜的風機應至少運行 5min 。 不要使實驗記錄本﹑移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，因為這將干擾氣體流動，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。 盡量減少操作者身后的人員活動。允許使用微型電加熱器，但最好使用一次性無菌接種環(huán)。 安全柜內應盡量少放置器材或標本，不能影響后部壓力排風系統(tǒng)的氣流循環(huán)。 生物安全柜運行正常時才能使用。應當發(fā)給工作人員書面的規(guī)章、安全手冊或操作手冊。 詳細資料見參考文獻 12。在丟棄到廢棄物盛器中以前，頂部要固定好（如采用高壓滅菌膠帶）。 干燥痰液標本時要注意避免生成氣溶膠。 使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán)，能夠避免在本生燈的明火上加熱所引起的感染性物質爆濺。 1為了避免感染性物質從移液管中滴出而擴散，在工作臺面應當放置一塊浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙，使用后將其按感染性廢棄物處理。 有固定皮下注射針頭的注射器不能夠用于移液。移液管應當在消毒劑中浸泡適當時間后再進行處理。 刻度對應（ Marktomark ）移液管不需要排出最后一滴液體，因此最好使用這種移液管。 感染性物質不能使用移液管反復吹吸混合。 所有移液管應帶有棉塞以減少移液器具的污染。標本的內層容器要在生物安全柜內打開，并準備好消毒劑。 標本接收 需要接收大量標本的實驗室應當安排專門的房間或空間。二級容器可以是金屬或塑料制品，應該可以耐高壓滅菌或耐受化學消毒劑的作用。標本的要求或說明書不能夠卷在容器外面，而是要分開放置，最好放置在防水的袋子里。在容器外部不能有殘留物。 標本容器 標本容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品。本章概要介紹了避免或盡量減少這類常見問題的技術和方法。 詳細資料見參考文獻 12 和 28。 由生物安全人 員依據(jù)當?shù)氐囊?guī)定決定繼續(xù)利用或是最終丟棄。只有在受過訓練的實驗室工作人員的陪同下，他們才能進入這些地區(qū)。要安排這些人員參觀實驗室，讓他們熟悉實驗室的布局和設備，這都是十分有益的。 火災和自然災害 在制定的應急預案中應包括消防人員和其他服務人員。如果懷疑在安全杯內發(fā)生破損，應該松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌。清理時所使用的全部材料都應按感染性廢棄物處理。未破損的帶蓋離心管應放在另一個有消毒劑的容器中，然后回收。當清理玻璃碎片時應當使用鑷子，或用鑷子夾著的棉花來進行。發(fā)生這兩種情況時都應通知生物安全官員。 未裝可封閉離心桶的離心機內盛有潛在感染性物質的離心管發(fā)生破裂 如果機器正在運行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應關閉機器電源，讓機器密閉（例如 30min） 使氣溶膠沉積。在所有這些操作過程中都應戴手套。如果用簸箕清理破碎物，應當對他們進 行高壓滅菌或放在有效的消毒液內浸泡。然后將布、紙巾以及破