【正文】 處理，并及時報告實驗室污染預(yù)防及應(yīng)急處置專業(yè)小組。 實驗室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏、污染時，實驗室工作人員應(yīng)及時向?qū)嶒炇椅廴绢A(yù)防及應(yīng)急處置專業(yè)小組報告，在 2 小時內(nèi)向感染控制科報告，并立即采取以下控制措施，防止高致病性病原微生物擴散。 （ 4）如果潛在感染性物質(zhì)溢出，立即用布或紙巾覆蓋，由外圍向中心傾 倒消毒劑，一定時間（約 30 分）后，清除污染物品，再用消毒劑擦拭。 （ 2）如果病原微生物潑濺在實驗室工作人員眼內(nèi)，立即用生理鹽水或洗眼液沖洗，然后用清水沖洗。 四、應(yīng)急處理程序 （一）、病原微生物污染應(yīng)急處置措施 實驗室如果發(fā)生一般病原微生物潑濺或泄漏事故，按 生物安全的有關(guān)要求，根據(jù)病原微生物的抵抗力選擇敏感的消毒液進行消毒處理。 加強預(yù)防工作，每個人都要認真負責(zé)執(zhí)行實驗室的各項制度，特別是實驗室安 全管理制度、各種有毒有害易污染實驗室和其周圍環(huán)境的物品及廢物的管理制度等的執(zhí)行；對安全隱患及時排除，對不能排除的應(yīng)及時報告有關(guān)部門及時排除，對可能突發(fā)的實驗室污染事件而存在的安全隱患應(yīng)采取快速有效的控制措施，并及時向?qū)嶒炇椅廴绢A(yù)防及應(yīng)急處置專業(yè)小組報告；同時期采取有效的防范措施。 (二 )實驗室污染預(yù)防及應(yīng)急處置專業(yè)小組職責(zé) 負責(zé)組織本小組的全體成員開展日常督促檢查實驗室污染預(yù)防與應(yīng)急處理的組織建立、人員培訓(xùn)、技術(shù)和物資等的落實，指揮實驗室污染突發(fā)事件的現(xiàn)場和調(diào)查處理工作。 二、適用范圍 本預(yù)案適用于本科室各檢驗實驗室及實驗室周 圍環(huán)境。 可疑高致病菌的 消毒和感染物的處理 對可疑培養(yǎng)物、標(biāo)本用高壓蒸汽滅菌法消毒，消毒完后按生物污染物處置程序進行處理。二類主要包括：土拉弗郎西絲菌、布氏菌、炭疽芽孢菌、肉毒梭菌、鼻祖假單胞菌、類鼻祖假單胞菌、麻風(fēng)分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌；狂犬病毒、森林腦炎病毒、流行性出血熱病毒；各種立克次體等。 我國的菌種分為四類，一類和二類均為高致病性菌。 可疑高致病菌上報、消毒和感染物處理程序 1 目的 規(guī)范實驗室培養(yǎng)出可疑高致病菌的上報、消毒和感染物的處理。 3．利器盒不許混入垃圾里。 （六）銳器 1．使用后的注射針頭不應(yīng)再次使用。 （四）同位素 1．需要廢棄的同位素不應(yīng)被隨意攜帶出專門的實驗室； 2．在保證密封的情況下，穿戴全套防護服將其送至指定地點，途中務(wù)必防止泄漏； 3．在當(dāng)日實驗記錄中記錄處理方法和結(jié)果。 （二）非感染性生物材料 1．單克隆抗體、質(zhì)粒、細胞等非感染性生物材料集中放置在所里指定的位置，以備高壓蒸汽滅菌后廢棄； 2．用來盛放的容器應(yīng)用消毒液浸泡； 3．嚴格與感染性生物材料區(qū)分，防止二者混放； 4．過期的生物性試劑材料應(yīng)廢棄，禁止使用。可重復(fù)使用的運輸容器應(yīng)防滲漏，并且 有密閉的蓋子，這些運輸容器在送回實驗室重新使用前要消毒并清洗干凈。 所有感染性材料都應(yīng)該在防滲漏的容器里高壓滅菌，在處理以前，感染性材料裝入可高壓的黃色塑料袋。廢棄物應(yīng)保持和消毒液直接接觸并根據(jù)所使用的消毒劑選擇浸泡時間，然后把消毒液及廢棄物倒入一個容器里以備高壓或焚燒。 WHO 提供微生物安全培訓(xùn)的各種教具。通常的結(jié)果為，培訓(xùn)對象與其他人相比，對課程內(nèi)容的某些部分會有更好的理解、掌握和應(yīng)用。 培訓(xùn)調(diào)整。 對培訓(xùn)效果最完整的評估應(yīng)包括全部上述四個方面。 評估培訓(xùn)對象在工作中的行為變化 檢查培訓(xùn)對象對所進行培訓(xùn)的反應(yīng) 培訓(xùn)評估有助于判斷培訓(xùn)是否達到了預(yù)定效果。此外，提供與實際工作條件相似的實踐機會有助于將技能應(yīng)用到實際工作中。教學(xué)內(nèi)容（例如培訓(xùn)課程、錄像帶、文字材料等）不應(yīng)該同所教授的技術(shù)或主題相 沖突、相抵制或沒有關(guān)聯(lián)。除了考慮這些因素外，建議制定安全培訓(xùn)規(guī)劃的人員要熟悉了解成人教育的基本原則。對某些人應(yīng)采用更直觀的或“手把手” 的方式更好； 而其他人則以學(xué)習(xí)文字材料更有效果。不同人員在資質(zhì)、讀寫、文化、口語以及培訓(xùn)前所掌握的技術(shù)水平等方面都可能不一致。 考慮不同培訓(xùn)對象的差異。其他的內(nèi)容可能集中在練習(xí)如何解決工作中發(fā)生的問題，以及學(xué)習(xí)糾正那些人們在使用某一技術(shù)過程中所犯的錯誤。培訓(xùn)內(nèi)容是受培訓(xùn)者為了實現(xiàn)實驗操作目標(biāo)所必須掌握的知識或技術(shù)。培訓(xùn)的目的是要 了解開展實驗的條件以及所需的熟練水平。 確立培訓(xùn)目的。下列各項是保證生物安全培訓(xùn)規(guī)劃行之有效的必備要素： 需求評估。在生物安全官員和其他部門人員的協(xié)助下，實驗室主管在人員的培訓(xùn)工作中發(fā)揮著重要的作用。 有關(guān)特殊微生物因子處理的詳細資料見參考文獻 1 26 和 27。 1用具應(yīng)當(dāng)用含 20g/L（ 2%） 有效氯的次氯酸鈉浸泡 1 h，然后用水徹底清洗再進行高壓滅菌。 1 HEPA過濾器摘除后需要在至少 1000℃ 的溫度下焚燒。但是，安全柜仍必須用標(biāo)準(zhǔn)方法來清除污染（如甲醛蒸氣），以滅活可能存在的其他微生物因子。 1污染有朊蛋白的感染性廢液應(yīng)當(dāng)用含 20g/L（ 2%）有效氯的次氯酸鈉（終濃度）處理 1 h。 實驗臺垃圾，包括一次性手套、隔離衣和圍裙，均應(yīng)當(dāng)采用多孔負荷蒸汽滅菌器在 134～137 ℃高壓滅菌 18 min 一個循環(huán)，或高壓滅菌 3 min 六個循環(huán)，然后再焚燒。 福爾馬林固定的組織，即使在長時間福爾馬林的浸泡后，仍應(yīng)視作具有感染性。 所有操作必須在生物安全柜中進行。 強烈建議使用一次性塑料制品，它們可按干廢棄物處理并丟棄。由于朊蛋白不能被普通的實驗室消毒和滅菌方法所滅活，故應(yīng)當(dāng)遵循以下防護措施： 強烈建議使用專用儀器設(shè)備，亦即不與其他實驗室共用儀器。 由于很難徹底滅活朊蛋白，因此盡可能地使用一次性器具，在 生物安全柜的工作臺面使用一次性防護罩，這些措施都非常重要。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織中發(fā)現(xiàn)有最高濃度的朊蛋白，動物研究還表明在脾臟、胸腺、淋巴結(jié)和肺內(nèi)可能也有高濃度的朊蛋白。不過，在操作已感染或潛在感染的人或動物材料時，還是應(yīng)當(dāng)謹慎注意防護。usslerScheinker syndrome）、人類致死性家族性失眠癥和庫魯病、綿羊和山羊的瘙癢病、家畜的牛海綿狀腦病（ bovine spongiform encephalopathy， BSE）， 以及鹿、糜鹿及貂的傳染性腦病。戊二醛可以用于清除表面污染（見第 14 章）。 清除污染 建議使用次氯酸鹽和高級別的消毒劑來清除污染。如果必須進行冰凍切片，應(yīng)當(dāng)罩住冰凍機，操作者要戴安全防護面罩。 組織 組織標(biāo)本應(yīng)用福爾馬林固定。 排出物應(yīng)當(dāng)收集在封閉的容 器內(nèi)進一步高壓滅菌和／或廢棄。應(yīng)當(dāng)用鑷子拿取這些東西，妥善儲存，并經(jīng)清除污染和／或高壓滅菌后再丟棄。 不能將皮下注射針作為移液管使用（參見本章“避免感染性物質(zhì)的接種”部分）。 玻璃器 皿和“銳器” 盡可能用塑料制品代替玻璃制品。 在防護衣外面要再穿上塑料圍裙。 打開標(biāo)本管和取樣 應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)打開標(biāo)本管。檢驗申請單應(yīng)當(dāng)分開放置在防水袋或信封內(nèi)。用完后自動廢棄針頭。 應(yīng)當(dāng)由受過培訓(xùn)的人員來采集病人或動物的血樣。 對血液和其他體液、組織及排泄物的標(biāo)準(zhǔn)防護方法 設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)防護方法（其中包括“常規(guī)預(yù)防措施 [19]”）以降低從已知或未知感染源的微生物傳播危險 [2]。當(dāng)從冷藏處取出安瓿時，實驗室工作人員應(yīng)當(dāng)進行眼睛和手的防護。如果需要低溫保存，安瓿應(yīng)當(dāng)儲存在液氮上面的氣相中。 緩慢向安瓿中加入液體來重懸凍干物，避免出現(xiàn)泡沫。將頂部小心移去并按污染材料處理。 如果管內(nèi)有棉花或纖維塞，可以在管上 *近棉花或纖維塞的中部銼一痕跡。 裝有凍干感染性物質(zhì)安瓿的開啟 應(yīng)該小心打開裝有凍干物的安瓿，因為其內(nèi)部可能處于負壓，突然沖入的空氣可能使一些物質(zhì)擴散進入空氣。 除非有防爆措施，否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。未標(biāo)明的或廢舊物品應(yīng)當(dāng)高壓滅菌并丟棄。清理時應(yīng)戴厚橡膠手套并進行面部防護，清理后要對內(nèi)表面進行消毒。 操作和打開組織研磨器時應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)進行。 組織研磨器的使用 拿玻璃研磨器時應(yīng)戴上手套并用吸收性材料包住。 操作結(jié)束后，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)打開容器。 使用勻漿器、搖床和超聲處理器時，應(yīng)該用一個結(jié)實透明的塑料箱覆蓋設(shè)備，并在用完后消毒。 在使用勻漿器、搖床和超聲處理器時，容器內(nèi)會產(chǎn)生壓力，含有感染性物質(zhì)的氣溶膠就可能從蓋子和容器間隙逸出。 蓋子、杯子或瓶子應(yīng)當(dāng)保持正常狀態(tài)，沒有裂縫或變形。 勻漿器、搖床、攪拌器和超聲處理器的使用 實驗室不能使用家用（廚房）勻漿器，因為它們可能泄漏或釋放氣溶膠。而在Ⅲ級生物安全柜內(nèi)封閉離心時，可以防止生成的氣溶膠廣泛擴散。 1當(dāng)使用離心機時，可能噴射出可在空氣中傳播的感染性顆粒。 1每次使用后，要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機腔的污染。如污染明顯，應(yīng)重新評估離心操作規(guī)范。 1當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時，必須小心不能將離心管裝得過滿，否則會導(dǎo)致漏液。鹽溶液或次氯酸鹽溶液對金屬具有腐蝕作用，因此不能使用。 操作指南中應(yīng)給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。 離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進行。 離心管和盛放離心標(biāo)本的容器應(yīng)當(dāng)由厚壁玻璃制成，或最好為塑料制品，并且在使用前應(yīng)檢查是否破損。 應(yīng)按照操作手冊來操作離心機。 應(yīng)備有適當(dāng)?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出標(biāo)本（見第 14 章）。移液管應(yīng)在消毒液中浸泡適當(dāng)?shù)臅r間，然后再丟棄或滅菌清洗后重復(fù)使用。嚴禁用口吸液。 規(guī)范的實驗操作技術(shù)可以避免或盡量減少噴濺和氣溶膠的產(chǎn)生。 血清的分離 只有經(jīng)過嚴格培訓(xùn)的人員才能進行這項工作。一次性物品應(yīng)丟棄在防∕耐穿透的帶蓋容器中。 以下兩點可以減少針刺損傷：（ a） 減少使用注射器和針頭（可用一些簡單的工具來打開瓶塞，然后使用吸管取樣而不用注射器和針頭）；（ b）在必須使用注射器和針頭時， 采用銳器安全裝置。應(yīng)盡可能用塑料制品代替玻璃制品。 在所有可能產(chǎn)生潛在感染性物質(zhì)噴濺的操作過程中，操作人員應(yīng)將面部、口和眼遮住或采取其他防護措施。 在實驗室里時，嘴里不應(yīng)有東西 —— 鋼筆、鉛筆、口香糖。實驗室人員在操作時應(yīng)戴一次性手套，并避免觸摸口、眼及面部。 生物安全柜的詳細介紹見第 10 章。 1在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，安全柜的風(fēng)機應(yīng)至少運行 5min 。 不要使實驗記錄本﹑移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，因為這將干擾氣體流動，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。 盡量減少操作者身后的人員活動。允許使用微型電加熱器，但最好使用一次性無菌接種環(huán)。 安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放置器材或標(biāo)本，不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)。 生物安全柜運行正常時才能使用。應(yīng)當(dāng)發(fā)給工作人員書面的規(guī)章、安全手冊或操作手冊。 詳細資料見參考文獻 12。在丟棄到廢棄物盛器中以前，頂部要固定好（如采用高壓滅菌膠帶）。 干燥痰液標(biāo)本時要注意避免生成氣溶膠。 使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán)，能夠避免在本生燈的明火上加熱所引起的感染性物質(zhì)爆濺。 1為了避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴散，在工作臺面應(yīng)當(dāng)放置一塊浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙，使用后將其按感染性廢棄物處理。 有固定皮下注射針頭的注射器不能夠用于移液。移液管應(yīng)當(dāng)在消毒劑中浸泡適當(dāng)時間后再進行處理。 刻度對應(yīng)（ Marktomark ）移液管不需要排出最后一滴液體，因此最好使用這種移液管。 感染性物質(zhì)不能使用移液管反復(fù)吹吸混合。 所有移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染。標(biāo)本的內(nèi)層容器要在生物安全柜內(nèi)打開，并準(zhǔn)備好消毒劑。 標(biāo)本接收 需要接收大量標(biāo)本的實驗室應(yīng)當(dāng)安排專門的房間或空間。二級容器可以是金屬或塑料制品，應(yīng)該可以耐高壓滅菌或耐受化學(xué)消毒劑的作用。標(biāo)本的要求或說明書不能夠卷在容器外面，而是要分開放置，最好放置在防水的袋子里。在容器外部不能有殘留物。 標(biāo)本容器 標(biāo)本容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品。本章概要介紹了避免或盡量減少這類常見問題的技術(shù)和方法。 詳細資料見參考文獻 12 和 28。 由生物安全人 員依據(jù)當(dāng)?shù)氐囊?guī)定決定繼續(xù)利用或是最終丟棄。只有在受過訓(xùn)練的實驗室工作人員的陪同下，他們才能進入這些地區(qū)。要安排這些人員參觀實驗室，讓他們熟悉實驗室的布局和設(shè)備，這都是十分有益的。 火災(zāi)和自然災(zāi)害 在制定的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他服務(wù)人員。如果懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)該松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌。清理時所使用的全部材料都應(yīng)按感染性廢棄物處理。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中，然后回收。當(dāng)清理玻璃碎片時應(yīng)當(dāng)使用鑷子，或用鑷子夾著的棉花來進行。發(fā)生這兩種情況時都應(yīng)通知生物安全官員。 未裝可封閉離心桶的離心機內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂 如果機器正在運行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機器電源，讓機器密閉（例如 30min） 使氣溶膠沉積。在所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)當(dāng)對他們進 行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。然后將布、紙巾以及破