【正文】 Asn Gln His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Gly Glu Arg Phe Phe Tyr Thr Pro Lys Thr NH2 1 5 10 15 20 COOH A鏈 NH2 1 5 10 15 20 25 30 HOOC B鏈 8mol/L尿素 β 巰基乙醇 去除變性劑 和還原劑 核糖核酸酶的變性與復(fù)性 3. 蛋白質(zhì)的沉淀：在某些化學(xué)因素的作用下，使蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象，稱為蛋白質(zhì)的沉淀。 （三）蛋白質(zhì)的變性與復(fù)性、沉淀和凝固 1. 蛋白質(zhì)的變性：在某些理化因素的作用下，導(dǎo)致蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象被破壞，使其理化性質(zhì)發(fā)生改 變，生物學(xué)活性喪失，稱為蛋白質(zhì)的變性。 3. 蛋白質(zhì)分子表面帶有電荷。 正常朊病毒蛋白結(jié)構(gòu) （顯示 ?螺旋 ） 朊病毒結(jié)構(gòu) （顯示 ?片層結(jié)構(gòu) ） 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) 及其分離純化 一、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) （一）蛋白質(zhì)的兩性電離及 等電點(diǎn)（ pI) P NH3+ COOH P NH3+ COO P NH2 COO +OH +OH +H+ +H+ pHpI pH=pI pHpI (二 )蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì) 1. 蛋白質(zhì)分子的直徑為 1～ 100nm，屬于膠體。 此二聚體再攻擊正常的朊病毒蛋白 。 因此 ， 這類疾病又稱蛋白質(zhì)構(gòu)象病 。 正常朊病毒蛋白與朊病毒空間結(jié)構(gòu)的差異 朊病毒 （ PrPsc） 是蛋白質(zhì) ， 不含核酸 。 4. 朊病毒本身不能自我復(fù)制，但可以攻擊大腦的正常朊 病毒蛋白，使之構(gòu)象改變并與其結(jié)合，形成朊病毒二聚體 此二聚體現(xiàn)再攻擊正常朊病毒蛋白，形成朊病毒四聚體。 2. 朊病毒蛋白是正常存在于人體神經(jīng)原、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 等多種細(xì)胞的細(xì)胞膜上的糖蛋白。具有傳染性，通過(guò) PrP組成的傳 染性顆粒傳播。 如人紋狀體脊髓變性病、老年癡呆癥、亨庭頓舞蹈病、瘋牛病等。血紅蛋白的氧飽和曲線 為 S形曲線 ,表明血紅蛋白四個(gè)亞基對(duì)氧的結(jié)合具有正協(xié)同效應(yīng)。在血紅蛋白結(jié)合氧時(shí)， 由于亞基的變構(gòu)和亞基間的協(xié)同效應(yīng)，亞基間的鹽鍵一一斷開(kāi)，使血紅蛋 白由 T態(tài)構(gòu)象轉(zhuǎn)變?yōu)?R態(tài)構(gòu)象。 15176。 緊張態(tài)（ T態(tài)） Hb對(duì)氧的親和力低。血紅素未結(jié)合氧時(shí)， Fe偏離卟啉平面約 ，偏向 ?螺旋 F8組氨酸側(cè)，當(dāng)結(jié)合氧后， Fe被拉入卟啉環(huán)中，這樣帶動(dòng) F8發(fā)生位移，進(jìn)而引發(fā)一系列構(gòu)象改變。 ?1 ?2 ?2 ?1 N C N C 血紅蛋白的四級(jí)結(jié)構(gòu) 成人血紅蛋白由 2條 ?鏈和 2條 ?鏈組成 ,各亞基分別含一個(gè)血紅素 . 血紅素與 O2結(jié)合 F肽段 Fe F肽段 Fe O O 卟啉平面 卟啉平面 +O2 NNNNO HOH OONNF e2 +O2NNF 8 H i sE 7 H i sII II I II V血紅素與氧結(jié)合模示圖 血紅素是 4個(gè)吡咯環(huán)通過(guò) 4個(gè)甲炔橋相連形成的平板狀鐵卟啉化合物， 2價(jià)鐵離子居于卟啉環(huán)的中央。血紅蛋白每 1個(gè)亞基可結(jié)合 1個(gè)氧分子。血紅素位于 E和 F之間， F8[組 93](綠色 )與 Fe形成第 5個(gè)配位鍵。 哺乳類動(dòng)物胰島素氨基酸序列的差異 部分 動(dòng)物種類 胰島素氨基酸殘基序號(hào) A5 A6 A10 B30 人 Thr Ser Ile Thr 豬 Thr Ser Ile Ala 狗 Thr Ser Ile Ala 兔 Thr Gly Ile Ser 牛 Ala Gly Val Ala 羊 Ala Ser Val Ala 馬 Thr Ser Ile Ala 0 1 0 12 11 0 11 10 1 0 10 9 3 2 0 11 10 6 5 3 0 10 9 5 4 2 3 0 9 8 6 5 4 5 2 0 10 11 7 8 6 7 6 6 0 13 12 11 10 9 10 9 8 12 0 13 12 12 11 10 10 9 8 10 2 0 11 10 10 9 8 8 7 6 10 3 3 0 14 15 22 21 20 21 19 18 21 19 20 17 0 15 14 11 10 9 9 8 9 11 8 8 7 22 0 18 17 14 13 11 12 11 11 13 11 12 11 24 10 0 21 21 19 18 17 18 17 17 18 17 18 17 26 18 15 0 27 26 22 22 22 21 22 21 24 23 24 22 29 24 22 24 0 31 30 29 28 27 25 27 26 28 28 27 27 31 28 29 32 14 0 人 ,猩猩 獼猴 馬 驢 豬、牛、羊 狗 小灰鯨 兔 袋鼠 雞、火雞 企鵝 北京鴨 響尾蛇 嚙龜 牛蛙 金槍魚 螺旋蠅 蠶蛾 蠶蛾 螺旋蠅 金槍魚 牛蛙 嚙龜 響尾蛇 北京鴨 企鵝 雞，火雞 袋鼠 兔 小灰鯨 狗 豬牛羊 驢 馬 獼猴 人，猩猩 人與一些動(dòng)物細(xì)胞色素 C 一級(jí)結(jié)構(gòu)氨基酸差異的數(shù)量比較 動(dòng)物體細(xì)胞色素 C一級(jí)結(jié)構(gòu)的進(jìn)化樹(shù) 圖中的數(shù)字表示該類動(dòng)物與其祖先相比細(xì)胞色素 C一級(jí)結(jié)構(gòu)氨基酸殘基的差異數(shù) 真 菌植 物蝗 蟲(chóng)蒼 蠅蜜 蜂蛾 , 天 蛾海 星七 鰓 鰻角 鯊昆 蟲(chóng) 類軟 骨 魚 類響 尾 蛇龜企 鵝雞 、 火 雞鴕 鳥(niǎo)鴯 鹋鳥(niǎo) 類 和 與 爬 行 類鴿鴨蚯 蚓牛 蛙金 槍 魚鯉 魚兩 棲 類硬 骨 魚 類河 馬狗 、 海 豹 、 蝙 蝠馬 、 豬 、 羊 、 牛小 鼠兔人 類 、 猩 猩猴袋 鼠哺 乳 類51 37181 691 682 392289731646 1 8161111112161354231112229二、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 （一）肌紅蛋白血紅蛋白結(jié)構(gòu) （一）肌紅蛋白的空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 肌紅蛋白（ myoglobin, Mb）是由 153個(gè)氨基酸殘基組成的單一多肽鏈的蛋白質(zhì)，含 8個(gè) ?螺旋（ A、 B、 C、 D、 E、 F、 G、 H），其輔基為血紅素。 磷酸丙糖異構(gòu)酶和丙酮酸激酶結(jié)構(gòu)域 1空間構(gòu)象的相似性 磷酸丙糖異構(gòu)酶催化 3磷酸甘油醛和磷酸二羥丙酮的互變，丙 酮酸激酶催化磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)移磷酸基生成 ATP和烯醇式 丙酮酸，但其空間結(jié)構(gòu)具有相似性，其空間結(jié)構(gòu)的中心均是由 8個(gè) ?折疊組成的 ?折疊桶，每個(gè) ?折疊又被 ?螺旋所分隔 磷酸丙糖異構(gòu)酶 丙酮酸激酶結(jié)構(gòu)域 1 Insulin 切除 A鏈的第一個(gè)氨基酸殘基，胰島素活性只剩下 2%～ 10%；切除前４個(gè)氨基酸殘基，則活性喪失。 穩(wěn)定蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵是氫鍵、離子鍵、疏水作用和 Van der Waals力等次級(jí)鍵。每 個(gè)具有獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈程為亞基。蛋白激酶結(jié)構(gòu)域具有蛋白激酶活性 （見(jiàn)第十九章 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)）。其 C端含一個(gè)可被磷酸化的酪氨酸殘基。 肌紅蛋白 結(jié)構(gòu)域 纖連蛋白結(jié)構(gòu) 由兩個(gè)相似的亞基組成二聚體， 以羧基末端的兩個(gè)二硫鍵連成 “ V”形結(jié)構(gòu)，有 7個(gè)球狀的結(jié)構(gòu) 域。 穩(wěn)定三級(jí)結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)鍵是非共價(jià)鍵（次級(jí)鍵），有些蛋白質(zhì) 具有的二硫鍵也是維系其三級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的重要因素 。在許多蛋白質(zhì)的分子中， 常發(fā)現(xiàn)幾個(gè)（多為 2?3個(gè)）具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的肽段相互 靠近，形成具有特定功能的空間構(gòu)象；或者僅是一 個(gè)具有特定功能的很短的肽段。 R R O O C C C C C H N N O