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飼料中有毒有害物質的測定-文庫吧資料

2025-05-18 02:04本頁面
  

【正文】 0 ng/ml . 調 零孔 陰性 孔 ng/ml ng/ml 1 ng/ml 5 ng/ml 10 ng/ml 5/25/2022 5:43 PM 52 以相對吸光度值為縱坐標三種不同溫度下的標準曲線 Y=A/A陰性孔 1 10 ng/ml 100% 50% 調 零孔 陰性 孔 ng/ml ng/ml 1 ng/ml 5 ng/ml 10 ng/ml 5/25/2022 5:43 PM 53 表 1 公眾對飼料質量重要性的認識的變化 Back 。 B. 加入酶標抗原和待測抗原 , 競爭結合抗體; 對照只加入酶標抗原; C. 加底物 。底物的降解量=抗原量。 C. 加酶標抗體 。 5/25/2022 5:43 PM 24 ( 3) 雙抗體夾心法測定抗原 A. 將抗體吸附于固相表面 。 C. 加酶標抗體; D. 加底物。 底物的降解量=抗原量 。 9 飼料中有毒有害物質的測定 5/25/2022 5:43 PM 21 酶聯免疫吸附法 ELISA最常用的四種方法: ? 直接法測定抗原; ? 間接法測定抗體; ? 雙抗體夾心法測定抗原; ? 競爭法測定抗原。用 2mol/L硫酸終止酶反應。,5,539。在少數商品 ELISA試劑中,應用的酶尚有葡萄糖氧化酶、 βD半乳糖苷酶和脲酶等。 ? 堿性磷酸酶底物:一般采用對硝基苯磷酸酯 (pnitrophenyl phosphate, pNPP)作為底物,用 NaOH終止酶反應。tetramethylbenzidine,TMB)和 ABTS。 ? 辣根過氧化物酶底物:鄰苯二胺 (Ophenylenediamine,OPD)、四甲基聯苯胺 (3,339。 5/25/2022 5:43 PM 19 酶聯免疫吸附法 B、酶與底物: ? 在 ELISA中,常用的酶為辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和堿性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP)。實際上血清中的抗體是多種單克隆抗體的混合物,因此稱之為 多克隆抗體 。在這種測定方法中有 3種必要的試劑: ? 固相的抗原或抗體, ? 酶標記的抗原或抗體, ? 酶作用的底物。 對于黃曲霉毒素 B1, ELISA法最低可檢出 。 特點: ? 很強的特異性: 建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上。 二、飼料中黃曲霉毒素 B1的測定 5/25/2022 5:43 PM 14 9 飼料中 有毒有害物質 的測定 (二 )檢測方法 ? 酶聯免疫吸附法 ( enzymelinked immunosorbent assay, ELISA) ? 薄層層析法( thin layer chromatography, TLC) ? 快速篩選
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