hiv梅毒檢測(cè)ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-05-11 12:48本頁面
【正文】 – 不適用于來至口腔的標(biāo)本 – 暗視野顯微鏡檢查法是能夠立即在獲得性或先天性梅毒的早期進(jìn)行直接診斷的唯一標(biāo)準(zhǔn) 非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) ? 非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)： 是以心磷脂、卵磷脂及膽固醇作為抗原檢查病人血清中反應(yīng)素的試驗(yàn)方法。 梅毒－實(shí)驗(yàn)室檢查方法 一、暗視野檢查 /鍍銀染色法 二、非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) 三、梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) 暗視野檢查 /鍍銀染色法 當(dāng)標(biāo)本陽性時(shí)，可確診梅毒。 似疑陽性標(biāo)本的送檢要求（二） ? 送檢標(biāo)本的包裝： ? *標(biāo)本管上必須有明確的標(biāo)識(shí) (包括姓名、編號(hào)、采血日期等 )； ? *標(biāo)本管一定要旋緊螺旋蓋，先裝入放滲漏的小塑料袋中，然后放入配發(fā)的專用送樣瓶中，周圍用泡沫等軟物固定，放入冰袋，蓋緊送樣瓶蓋子。特別注意標(biāo)本人 身份證號(hào)的準(zhǔn)確填寫 。避免溶血標(biāo)本送檢。 似疑陽性標(biāo)本的送檢要求（一） ? 全血標(biāo)本必須分離出血清或血漿，裝入帶螺旋口的樣品凍存管中送檢。 實(shí)驗(yàn)過程請(qǐng)認(rèn)真及時(shí)、完整填寫原始記錄，注意原始記錄的保存與保密。低溫下保存的測(cè)試卡應(yīng)平衡至室溫方可使用。 ? 實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持一定溫濕度，避免在過高溫度下進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 注意事項(xiàng)（二） 測(cè)試卡從包裝中取出后，應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，避免放置于空氣中過長(zhǎng)時(shí)間，導(dǎo)致受潮。所以必須使用符合要求的檢測(cè)標(biāo)本。 初篩結(jié)果不得出具陽性報(bào)告。如果問題仍然存在，應(yīng)立即停止使用此批號(hào)試劑。 失效： 對(duì)照區(qū) (C)未出現(xiàn)紫紅色條帶，表明不正確的操作過程或試劑盒已變質(zhì)損壞或者是樣本中抗體的含量過高。陽性標(biāo)本必須使用其他方法確認(rèn)。在規(guī)定的觀察時(shí)間內(nèi)，不論該色帶顏色深淺，即使只有非常弱的色帶也應(yīng)判定為陽性結(jié)果。 膠體金快速試驗(yàn) 結(jié)果判斷 陽性： 測(cè)試卡在檢測(cè)區(qū)（ T）和對(duì)照區(qū) (C)位置各出現(xiàn)一條紫紅色條帶（共 2條紅色帶），判為陽性。 【 也可以用試劑包裝中自帶的一次性滴管滴加測(cè)試標(biāo)本 2滴 】 。 ? 用微量加樣器取 50181。 膠體金快速試驗(yàn) 操作步驟 ? 將待測(cè)標(biāo)本從儲(chǔ)存條件下取出，平衡至室溫并編號(hào)。 ? ，需使用 EDTAK2或EDTAK3抗凝，使用其他抗凝劑的血漿樣本可能會(huì)得到不正確的結(jié)果。 樣本要求 ? 血清 或 血漿 ，并避免樣品溶血。 該方法試劑穩(wěn)定，可室溫長(zhǎng)期保存。 當(dāng)待檢標(biāo)本中含有 HIV抗體時(shí)，先和金標(biāo)記抗原結(jié)合，由于層析作用反應(yīng)復(fù)合物沿硝酸纖維膜向前移動(dòng)，當(dāng)遇到包被抗原時(shí)，形成 AgAbAgAu復(fù)合物而富集在包被線上，形成紅色沉淀線。反應(yīng)時(shí)間在 10 min以內(nèi)，使用抗原量少。加血清樣品作用，以后步驟同 ELISA。當(dāng)待檢樣品含有 HIV抗體時(shí)，經(jīng)抗原致敏的明膠顆粒與抗體發(fā)生抗原 抗體反應(yīng)，根據(jù)明膠顆粒在孔中的凝集情況判讀結(jié)果。 ? 目前常用的篩查試劑有酶聯(lián)免疫 、 顆粒凝集和其它快速診斷試劑 。檢出時(shí)間提前了 ，用于 血源篩查 等。 第三代 試劑使用雙抗原夾心法檢測(cè)抗體 ,進(jìn)一步提高了敏感性。由于包被的抗原不很純 ,假陽性率較高。 ? 初篩用的 HIV ELISA試劑目前已經(jīng)發(fā)展到第四代檢測(cè)試劑。 樣品 樣品 初篩試驗(yàn) 篩查試劑 陽性反應(yīng) 陰性反應(yīng) 復(fù)檢試驗(yàn) 一陰一陽 均陰性反應(yīng) 均陽性反應(yīng) 陰性報(bào)告 送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室 確認(rèn)試驗(yàn) 篩查試驗(yàn)的流程圖 原有試劑 +另一不同原理 （或廠家）試劑或另外兩種 不同原理（或廠家）試劑 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA) ? 基本原理 :是免疫反應(yīng)物通過化學(xué)或免疫學(xué)的方法形成酶結(jié)合物，酶結(jié)合物能與待檢樣品中相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合成為免疫復(fù)合物 ,然后加入酶底物 ,經(jīng)酶的催化或水解作用 ,無色底物產(chǎn)生顏色
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