重組dna技術(shù)ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-05-11 06:36本頁(yè)面
【正文】 用于小分子活性多肽基因的合成，較長(zhǎng)的鏈則須分段合成，然后用連接酶加以連接。 噬菌體（ bacteriophage,phage)25噬菌體生活周期2627病毒酵母酵母人工染色體（ YAC） ：用于大片段 DNA的克隆。⑤ 為松弛型復(fù)制子。③ 有 24種限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)。 23pBR322質(zhì)粒載體① 相對(duì)分子質(zhì)量小， 長(zhǎng)度為 。 常用載體 質(zhì)粒 DNA、噬菌體 DNA、病毒 DNA、酵母 DNA22質(zhì)粒（ plasmid） : 質(zhì)粒為細(xì)菌染色體之外一些能 獨(dú)立復(fù)制 并保持 穩(wěn)定遺傳 的復(fù)制子。具有較高的遺傳穩(wěn)定性。具備較多拷貝數(shù)，易從宿主細(xì)胞中分離純化。20具備復(fù)制能力。 一、定義 分類：克隆載體： 用于在宿主細(xì)胞中 克隆 和 擴(kuò)增 外 源 DNA片段。單鏈核酸內(nèi)切酶，降解單鏈 DNA或 RNA。催化多聚核苷酸 5ˊ 羥基末端磷酸化。17催化單脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移到 DNA3`端羥基上。 CIP能在 1% SDS溶液中 68 ℃ 加熱 15 min而 失活，故 CIP較為常用。16 （ 1） 5’ 端標(biāo)記 （ 2）制備載體時(shí)，用堿性磷酸酶處理后，可防止載體自身 連接，提高重組效率。（ 2）逆轉(zhuǎn)錄酶15（ 5） DNA聚合酶 Ⅰ 大片段（ Klenow 片段） 為 DNA聚合酶 I用枯草桿菌蛋白酶裂解后產(chǎn)生的大片段，分子量為 76 kD， 這個(gè)片段也稱為 Klenow片段 （ Klenow fragment） 它除了保留 5ˊ→3ˊ 聚合酶活性及 3ˊ→5ˊ 外切酶活性外，失去了 5ˊ→3ˊ 外切酶活性。（ 1）耐熱 Taq DNA聚合酶 最適反應(yīng)溫度為 75～ 80℃ 具有 5ˊ→3ˊ 外切酶活性，不具有 3ˊ→5ˊ 外切酶活性（ 3） T4 DNA聚合酶：主要用于 DNA的末端的標(biāo)記。ACGOH PAATTCGTTACTTAAP OHGCA ACGAATTCGT TGCTTAAGCA14 DNA聚合酶 Ⅰ 具有 5`→3` 聚合活性、 5`→3` 外切酶活性、 3`→5` 外切酶活性。通常是 4～ 8個(gè)堿
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1