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電鏡樣品的制備ppt課件-文庫(kù)吧資料

2025-05-11 03:05本頁(yè)面
  

【正文】 /10~15分鐘; 第三步:干燥劑進(jìn)入臨界狀態(tài)并 維持臨界狀態(tài) 排盡干燥劑。 干燥劑:在臨界點(diǎn)干燥器內(nèi)起臨界干燥作用的液體 . 液態(tài) CO2: ,臨界溫度為 ℃ ,臨界壓強(qiáng) 。 加熱器 CO2 CO2↑ 取材 清洗 固定 脫水 干燥 粘樣 鍍膜 鏡檢 臨界點(diǎn)干燥法 ( 2)常用干燥劑與中間劑 : 常用干燥劑 : 中間劑 : 既可以與干燥劑,又能與脫水劑相混溶的液體, 先置換脫水劑而后又被干燥劑所置換。 使干燥劑氣相與液相相等的溫度稱為該干燥劑的 臨界溫度 。 在臨界狀態(tài)下繼續(xù)對(duì)容器加熱,同 時(shí)以一定速度排出氣體(保持臨界狀態(tài)), 直到排凈為止。 : 超低溫快速冷凍 取材 固定 脫水 制冷劑 真空升華 粘樣 液氮、丙烷 取材 清洗 固定 脫水 干燥 粘樣 鍍膜 鏡檢 樣品干燥法 ( critical piont drying method CPD) (1)干燥原理 : 在密閉容器中加熱,使液態(tài)干燥劑 變?yōu)闅鈶B(tài),當(dāng)氣態(tài)與液態(tài)物質(zhì)的密 度相等時(shí),相界消失。 : 含水分或脫水劑樣品置于真空干燥器內(nèi), 抽低真空使液態(tài)物質(zhì)揮發(fā),使樣品干燥。 適宜樣品 :花粉、孢子、種子、果殼、木質(zhì)纖維、骨骼; 游離細(xì)胞類在脫水劑中自然干燥較好 。 原因 : 液態(tài)物質(zhì)脫離樣品表面時(shí)必須克服表面張力, 其反作用力會(huì)使樣品表面結(jié)構(gòu)產(chǎn)生形變 。 注意:根據(jù)材料性質(zhì)和大小而調(diào)節(jié)脫水時(shí)間。 :干種子、花粉、孢子類、毛發(fā)類樣品。 :固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)的菌絲類樣品, 用鋨酸(或甲醛) 蒸汽 熏蒸固定 ~1小時(shí) 。 通過(guò)動(dòng)脈注入清洗液,直到排出液變清為止。 ( 5)超聲波清洗:用于表面結(jié)構(gòu)復(fù)雜、凹陷、皺折多的樣品 。 ( 3)表面附著大量黏液的樣品:振蕩法或噴射瓶壁加壓沖洗 。 觀察 氣孔狀態(tài) 時(shí)應(yīng)注意清洗后 取材時(shí)機(jī) 。 ?植物材料:蒸餾水洗凈塵埃; ?動(dòng)物材料: 等滲 生理鹽水、 5%碳酸鈉或緩沖液洗去黏液等; ?游離細(xì)胞:用 等滲 的緩沖液清洗 (精子、血細(xì)胞、微生物 ); ?覆蓋大量黏液的樣品 (胃黏膜 )用低濃度的蛋白水解酶溶液洗; ?組織培養(yǎng)細(xì)胞:用相應(yīng)的培養(yǎng)液清洗; ?特殊樣品:如乳腺組織富含蛋白質(zhì)和脂類,分別用 16%的 甘油和 20%乙醇浸泡清洗; ?表面附著蠟質(zhì)、角質(zhì)層的樣品:用有機(jī)溶劑脫蠟。 ? 脫水前的清洗:洗
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