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基礎(chǔ)生物技術(shù)ppt課件-文庫吧資料

2025-05-09 22:03本頁面
  

【正文】 策略是將病人的細胞于實驗室操作后,將改善之細胞殖回病人體內(nèi) ? 基因治療的方法 ? 2. 活體內(nèi) (in vivo) : ? 活體內(nèi)基因治療是利用基因傳遞系統(tǒng) (例如:載體或脂質(zhì)體 liposomes)將矯正基因直接殖入體內(nèi) 基因治療工具 ? 基因治療工具是基于傳輸系統(tǒng)與序列運送 ? 1)病毒傳遞系統(tǒng): ? 此系統(tǒng)包含四種類型,分別為逆轉(zhuǎn)錄病毒(retroviruses) 、腺病毒 (adenoviruses)、腺結(jié)合病毒 (adenoassociated viruses)和慢病毒(lentiviruses)等 ? 2)標的基因修補工具: ? 包括三股型寡核苷酸 (triplexforming oligonucleotides) 、同型組合 (homologous rebination)和目標病毒基因 (viral gene targeting) 基因治療工具 ? 目前用于基因療法的方法為藉由病毒載體送入,其優(yōu)點在于轉(zhuǎn)殖效率佳,表現(xiàn)可能較好,而缺點卻在于其潛在性的危險 ? 非病毒載體方法就恰好相反,雖然其安全性較高,比較沒有副作用,但其轉(zhuǎn)殖效率及表現(xiàn)基因方面可能都有很大的限制 病毒傳遞系統(tǒng) 三股型寡核苷酸 (triplexforming oligonucleotides) TFO ? 三股型寡核苷酸是由單股 DNA分子與其所能辨識的完全或幾乎完全相同的雙股 DNA結(jié)合,并進一步形成三股結(jié)構(gòu) ? 此技術(shù)有兩種方法: ? 1)具有缺陷基因的矯正序列之寡核苷酸結(jié)合雙股 DNA片段,因此取代缺陷基因 ? 2)將寡核苷酸單獨使用,于三股型寡核苷酸形成后會破壞突變基因的活性 三股型寡核苷酸 (triplexforming oligonucleotides) TFO 三股型寡核苷酸 (triplexforming oligonucleotides) TFO 同型組合 (homologous rebination) ? 同型組合也稱為「小片段同型更換」 (small fragment homologous) ,利用染色體間 DNA小片段的交換發(fā)展細胞之能力,以正確核苷酸序列取代具有缺陷基因 ? 此片段與錯誤位置之基因序列互補,完成后會形成合成寡聚合物,因而啟動細胞 DNA的修補機制 目標病毒基因 (viral gene targeting) ? 部分正?;虮徊迦胗趩喂?DNA病毒并轉(zhuǎn)型入宿主基因組中,于插入基因組后,宿主細胞會利用出入基因修補基因組中錯誤的部份 基因治療的狀況 ? 基因治療最早的案例發(fā)生于法國,其為應(yīng)用基因治療于腺苷酸去胺酶 (adenosine deaminase。 ADA)缺乏癥的病人,此種疾病為基因缺陷影響所編碼之酵素,造成自體性退化型嚴重免疫不全(SCID) ,嚴重者會造成死亡 ? 基因治療方式為將病人的 T細胞次族群分離并與攜帶 ADA基因載體混合,經(jīng)病毒感染后,于實驗室中培養(yǎng) T細胞,確定目標基因具活性在注入病人體內(nèi) 基因治療的狀況 ? 目前已應(yīng)用于基因治療的疾病包括囊性纖維化、Duchene肌肉萎縮癥 (遺傳性疾病 )及家族性高膽固醇癥 ? 基因治療在單一基因疾病較適用,但大部分的疾病并非單一基因所造成 ? 基因治療離成功還很遙遠,目前基因治療上無法適用于生命中不能復(fù)制細胞
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