【正文】 H G A G外顯子 1 外顯子 2 O H 外顯子 1 U G O A G外顯子 1 外顯子 2圖 1 3 3 2 核 RN A 的剪接反應 ( 仿 B. L e w i n :《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 0 . 5 )mRNA前體的 剪接過程 第一步： 轉(zhuǎn)酯反應。 2. 分枝點順序：為 Py80NPy87Pu75APy95其中 A為百分之百的保守 ， 且具有 2′OH。 真核 tRNA的加工和原核的區(qū)別 (1)真核 tRNA前體中無二聚體和多聚體； (2)增加了剪接內(nèi)含子的過程； (3)都要加 CCA。 2 ’ 0 H5 ’ 外顯子 1 G U Py N CU Pu A P y A G 外顯子 2 3 ’5 ’ 外顯子 1 G 外顯子 2 O H 3 ’ U A G 3 ’ T A Py 套索結(jié)構(gòu) 5 ’ 外顯子 1 外顯子 2 3 ’ 圖 1 3 Ⅱ 類內(nèi)含子 剪接的模式 功能區(qū) 5 5 ’ R A GC N N N R U R C R R N Y U U GN N N Y A Y G Y Y N G G N G R R R R R R3 ’ 外顯子 2 YA Y Y Y Y A Y Y 功能區(qū) 6 OH 外顯子 1 … GU 圖 13 Ⅱ 類內(nèi)含子的剪接 I類與 Ⅱ 類內(nèi)含子的剪接比較 蛋白質(zhì)（酶）剪接的內(nèi)含子 tRNA前體的剪切反應 真核 tRNA的基因的特點： (1)真核的前體分子 tRNA是單順反子，但成 簇排列，基因間有間隔區(qū)； (2)真核 tRNA基因一般都比原核 tRNA基因多 得多，如酵母約有 400個 tRNA基因； (3) 5′端單磷酸核苷酸，表明已被加工過； (4) tRNA的前體分子中含有內(nèi)含子。 d 3d 2 d4 d1 d5 d6 A G O H 活性中心 外顯子 1 外顯子 2 圖 1 3 2 9 Ⅱ 類內(nèi)含子的二級結(jié)構(gòu)( 仿 B . L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 0 . 1 5 )(二 )剪接機制 ? 無需 鳥苷 的輔助 ， 但需鎂離子的存在 。 ? （ 3）為生命的起源和分子進化提供了新的依據(jù)。 核酶和傳統(tǒng)酶的區(qū)別： ? (1)一般的酶是純的蛋白質(zhì)；而核酶是 RNA或帶有蛋白的 RNA； ? (2)核酶既是催化劑又是底物 ；而酶僅催化反應 。 R 圖 1 3 2 6 1 類內(nèi)含子中含有的共同的二級結(jié)構(gòu) ( 仿 B. L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 1 . 4 ) (二 ) I型 內(nèi)含子的剪切機制 ? 轉(zhuǎn)酯反應 (transesterification) 酯鍵從一個位置轉(zhuǎn)移到另一個位置。 3 39。 P1 P2 P 4 Q P3 P6 外顯子 1 P8 G 外顯子 2 P7 2 b p S P9 5 39。 339。G G G A G G P G O H I G S P5 539。 外顯子 1 內(nèi)含子 外顯子 2 轉(zhuǎn)錄 剪接 + 凝膠電泳 凝膠電泳 凝膠電泳 3 5 SRN A 環(huán)狀內(nèi)含子 線型內(nèi)含子圖 1 3 2 2 四膜蟲 3 5 S RN A 保溫前后的電泳結(jié)果 ( 仿 B. L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 1 . 1 ) 內(nèi)含子插入 β 半乳糖苷酶基因的第 10 個密碼子中 轉(zhuǎn)錄 剪接 翻譯 β 半乳糖苷酶 β 半乳糖苷酶 使菌落呈藍色 圖 1 3 2 7 內(nèi)含子活性的檢測 ( 仿 B. L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 1 . 5 ) （一） I型內(nèi)含子的結(jié)構(gòu)特點 1. 其邊界序列為 5′UG 3′； 2. 具有中部核心結(jié)構(gòu) （ Central core strucature） （ internal guide seguence IGS） 外顯子 1 G O H 5 C U C U C U A 339。 此 35S rRNA要加入一價或二價陽離子及