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蛋白互作研究方法ppt課件-文庫(kù)吧資料

2025-05-08 12:03本頁(yè)面

　　

【正文】 tors GATEWAY cloning method 4 pull down 1) 原理 2)試劑盒 The MagneGST. PullDown System Figure 1. Overview of the MagneGST. PullDown System protocol. P = Prey Protein, M = MagneGST. Particle. 5 免疫共沉淀 CoIP 6 Farwestern analysis 雙分子熒光互補(bǔ) (bimolecular fluorescence plementation， BiFC) 分析技術(shù)，利用綠色熒光蛋白 (green fluorescent protein， GFP) 及其突變體 (YFP,CFP,BFP)的特性作為報(bào)告基因，將熒光蛋白分割成兩個(gè)不具有熒光活性的分子片段，再分別與目標(biāo)蛋白連接 . 如果兩個(gè)目標(biāo)蛋白因?yàn)橛邢嗷プ饔枚拷?，就使得熒光蛋白的兩個(gè)分子片段在空間上相互靠近，重新形成活性的熒光基團(tuán)而發(fā)出熒光 . 在熒光顯微鏡下，就能直接觀察到兩目標(biāo)蛋白是否具有相互作用，并且在最接近活細(xì)胞生理狀態(tài)的條件下觀察到其相互作用發(fā)生的時(shí)間、位置、強(qiáng)弱、所形成蛋白質(zhì)復(fù)合體的穩(wěn)定性，以及細(xì)胞信號(hào)分子對(duì)其相互作用的影響等，這些信息對(duì)研究蛋白質(zhì)相互作用有一定意義。因此 ,對(duì)于蛋白質(zhì)相互作用 interactome的研究就成

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