【正文】 uction) 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)特點(diǎn) 并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo) (cotransduction) 2個(gè)或多個(gè)基因同時(shí)轉(zhuǎn)導(dǎo)稱為并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)，也稱共導(dǎo)。 ① 普遍性：供體基因組內(nèi)任一基因均有可能被轉(zhuǎn)導(dǎo)，隨機(jī)性 ②低頻性：多為 3 105 ，該頻率來由： 沙門氏菌染色體約 23千個(gè)基因，噬菌體頭部能裝 2030個(gè)基因，占 1%；沙門氏菌中有轉(zhuǎn)導(dǎo)能力的約 %。 ③ DavisU形管分開雙親后有野生型，添加過濾因子自身血清前有野生型、添加后無野生型為轉(zhuǎn)導(dǎo)重組。 ② DavisU形管分開雙親后有野生型，可能是轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)化重組。它能裂解 LT2菌株，包裝 LT2基因進(jìn)入 LT22。證明通過濾孔的是 P22質(zhì)粒。說明不是轉(zhuǎn)化重組； ⑶ P22抗性品系的 LT2菌株替代 LT2無 wt。 性導(dǎo)的意義 五、轉(zhuǎn)導(dǎo)重組與作圖（ transduction rebinating and mapping） (一 )轉(zhuǎn)導(dǎo)重組的發(fā)現(xiàn)及鑒定 ： Lederberg， 1951，鼠傷寒沙門氏菌 ： ⑴ U形管分開兩菌株仍有 wt。 性導(dǎo)作圖原理 連鎖基因間距離愈近，并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo) (cosex duction)頻率愈高，反之則反。 ③ 互補(bǔ)性測(cè)驗(yàn)： F`因子進(jìn)入受體后，內(nèi)外基因功能不互補(bǔ)是同一順反子，互補(bǔ)是不同的順反子。 F+攜帶甲基因 F’ 浸染乙物種 F’ 甲基因在乙表達(dá) 將甲基因插入乙 部分二倍體 （三）性導(dǎo)（ sex duction） 四、性導(dǎo)重組 （ sex duction rebination ） ① 作基因載體： F`因子 能 自主復(fù)制、穩(wěn)定遺傳。 （二） F’作用特點(diǎn)及與 F+、 Hfr差異比較 四、性導(dǎo)重組 （ sex duction rebination ） （三）性導(dǎo) (sex duction)概念與過程 四、性導(dǎo)重組 （ sex duction rebination ） F`因子將甲物種基因轉(zhuǎn)入乙物種并表達(dá)的過程。則形成的 F`因子也就不同。 thi為起點(diǎn)逆時(shí)針方向 azi為起點(diǎn)順時(shí)針方向 pro為起點(diǎn)順時(shí)針方向 （一）性導(dǎo)因子 （ F`factor） 當(dāng) F因子不規(guī)則環(huán)去，攜帶有細(xì)菌染色體片斷時(shí)產(chǎn)生含有細(xì)菌基因的 F因子，稱 F`factor。 Rf(lacade) =(lacade+)/(lac+ade++lacade+) =(10)/(40+10)=20% =(lacade+)/ade+ 所以 ,1min時(shí)間距離 ≈20cM； lac+ade+ lac ade lac+ade首次轉(zhuǎn)入型 lac ade+重組型 基本培養(yǎng) 40斑 無 ade完全 10斑 大腸桿菌染色體呈環(huán)狀 三、接合重組 (六 )中斷雜交與作圖 Hfr菌株不同轉(zhuǎn)移基因的起點(diǎn)及方向也不同。在基本培養(yǎng)基上有 40個(gè)斑 ,顯然是兩基因沒有交換的親型 lac+ade+；在無 ade的完全培養(yǎng)基上有 10個(gè)斑 ,必然是兩基因間交換產(chǎn)生的重組型 lacade+。所以 ,1min時(shí)間間隔 ≈20cM， 1cM≈2022bp。即 thr+→leu +→azi S→ TiS→lac +→ gal+ ② 重組子菌落百分率隨時(shí)間延長而增加，達(dá)一定頻率后不再改變 ③基因轉(zhuǎn)入愈早 ,菌落百分率愈高 三、接合重組 (六 )中斷雜交與作圖 基因定位（ gene mapping) 細(xì)菌基因從起點(diǎn)整合，滾環(huán)式直線轉(zhuǎn)移，最先表達(dá)者離轉(zhuǎn)移起點(diǎn)最近，基因轉(zhuǎn)入的時(shí)間順序就是基因排列順序，時(shí)間間隔就是基因距離。定時(shí)中斷性管，記錄基因出現(xiàn)時(shí)間和數(shù)目。 三、接合重組 (六 )中斷雜交（ the interrupted mating ）與作圖 中斷雜交實(shí)驗(yàn) 1954， Wollman , Jacob, Hfr:(aziSstrStonS) F－ (azirstrr tonr thr leu gla lac ) 第 2min攪拌中斷 ① 加 str和 thr能活者 ,必定為 strr leu+，對(duì) leu基因記數(shù) ②僅加 str能活者 ,定為 strrleu+thr+，對(duì) leu和 thr記數(shù) ③加 gla+ 或 lac+紅色能消失，對(duì) gal或 lac基因記數(shù) ④加 azi或 ton亡者為 azis tons，對(duì) zai或 ton基因記數(shù) 第 3min攪拌中斷 直到第 60min，每隔 2min中斷取樣測(cè)定， 獲得各基因出現(xiàn)時(shí)間和數(shù)目。 ，一半死亡。 三、接合重組 (三 )大腸桿菌性別與致育因子 (sex and fertility factor) 三、接合重組 (4) F因子轉(zhuǎn)移 步驟 ①供體 F因子引導(dǎo)生出性管 ② 插入 ♀ 孔，形成接合管 ③ F因子滾環(huán)式 DNA復(fù)制，邊延伸邊轉(zhuǎn)移 ④ 接合管斷裂，雌株也有 F (三 )大腸桿菌性別與致育因子 (sex and fertility factor) 三、接合重組 (四 )低頻重組與高頻重組 (Lfr and Hfr) ⑴ F+供體中的 F因子引生性管，插入受體 F ，使 F獲得 F因子變?yōu)椤? ⑵ F+供體中 F因子的轉(zhuǎn)移頻率高，但沒有攜帶細(xì)菌基因，稱低頻重組 (low frequency rebination,Lfr) ⑶ 當(dāng) F因子插入細(xì)菌染色體后，細(xì)菌基因隨 F因子轉(zhuǎn)移而轉(zhuǎn)移，頻率高達(dá) 102，稱高頻重組 (high frequency rebination， Hfr) 低頻重組與高頻重組 三、接合重組 (四 )低頻重組與高頻重組 (Lfr and Hfr) F 、 F+與 Hfr比較 ⑴ F+與 F結(jié)合 ① 使 F變?yōu)?F+；②使 F長鞭毛；③基因轉(zhuǎn)移頻率 低 ,稱 Lfr ⑵ Hfr與 F結(jié)合 ① F仍為 F；② F無鞭毛；③基因轉(zhuǎn)移頻率 高， 稱 Hfr 三、接合重組 (五 )接合重組的特點(diǎn) DNA，因接合管易斷 。 性別的發(fā)現(xiàn)： 1946， Tatum， metstrs A B thrstrr metstrr A B thrstrs Ex1 Ex2 （ fertility factor） ⑴ 大量制片觀察， 2種表型：體表有鞭毛 ,無鞭毛； ⑵鞭毛細(xì)菌內(nèi)有 1小 DNA環(huán)型顆粒， 6 104 bp；有轉(zhuǎn)移起點(diǎn)、致育和性鞭毛基因，稱致育因子 F。說明 B不 能傳給 A、不能作供體，相當(dāng)于♀。 即 A傳給 B易， B傳給