離子交換色譜ppt課件-文庫吧資料
2025-05-08 04:40本頁面
【正文】 5 or 78)。孔度與交聯(lián)度關(guān)系密切。 B 顆粒： 20－ 80目， 200－ 400目。 被分離物質(zhì)所帶的電荷性質(zhì) 離子交換介質(zhì)的選擇原則 1 2 3 4 6 7 8 9 10 5 pH + 蛋 白 質(zhì) 凈 電 荷 等電點 吸附陰離子交換劑 吸附陽離子交換劑 pH pI（ +） pH = pI（ 0） pH pI（ ） 對 pI=5的某酸性蛋白質(zhì) 在 ， 當?shù)鞍踪|(zhì)為陰離子時， 應(yīng)首選 DEAE纖維素 ； 在 ， 當?shù)鞍踪|(zhì)為陽離子時， 應(yīng)首選 CM纖維素 1 種類選定 ? 中性鹽體系： 陰陽離子的脫除用強 酸強堿樹脂 微量雜質(zhì)的脫除也要 強型樹脂 強堿樹脂分有 I 和 II 型： I 型堿型強于 II I型 ： 易與硅酸等弱酸作用，再生差； II型： 不與比乙酸更弱的酸作用； 交換能力強的離子： 用弱堿性或弱酸性離子交換樹脂； 如一般有機堿交換能力都強，多價金屬離子、生物堿、鏈霉素等都用弱酸性離子交換樹脂， 既容易吸附又容易洗脫 。 二、離子交換樹脂的選擇 ? 一般原則： 酸性 物質(zhì)用 陰離子 交換劑分離 堿性 物質(zhì)用 陽離子 交換劑分離 ◆ 反離子 :強酸、堿性用 H+， OH,弱用 Na+ Cl ? 氨基酸、核苷酸、蛋白質(zhì)等 兩性電解質(zhì) ，可根據(jù)其 pI值 及 離子化曲線 來選擇。 陽離子型 離子交換纖維素包括 羥甲基纖維素 （ CM纖維素）等 陰離子型 離子交換纖維素包括 二乙基氨基乙基纖維素 （ DEAE纖維素） 離子交換纖維素 離子交換纖維素離子交換纖維素 常用的離子交換劑 離子交換葡聚糖： 離子交換葡聚糖 是葡聚糖 經(jīng)環(huán)氧氯丙烷交聯(lián)后形成的具有多孔三 維空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和離子交換功能基團的多糖衍生物（Sephadex G） Sephadex的優(yōu)點如下： 親水性強、不會引起生物分子的變性和失活，母鏈對蛋白質(zhì)、核 酸 及其它生物分子的非特異性吸附能力小 電離基團在母體上取代程度高，交換容量大，裝柱方便，流速快 既有離子交換作用，又有分子篩效應(yīng) 因而 Sephadex是一類廣泛應(yīng)用的色譜分離介質(zhì) 在 pH＝ 7時可耐 120℃ 的高熱 2 105的蛋白質(zhì) 適用于 常用的離子交換劑 常用的離子交換葡聚糖包括： 陽離子交換劑 CMSephadex C25， CMSephadex C50 Sephadex C25， Sephadex C50 陰離子交換劑 DEAESephadex A25， DEAE Sephadex A50 QAESephadex A25， QAESephadex A50 常用的離子交換劑 離子交換瓊脂糖： 離子交換瓊脂糖 是攜帶 DEAE或 CM基團的 Sepharose CL6B DEAESepharose（ 陰離子型 ）和 CMSepharose（陽離子型） 的離子交換介質(zhì)具有硬度大、性質(zhì)穩(wěn)定，流速好，分離能力強等優(yōu)點。 樹脂對離子親合力的大小用平衡常數(shù)來代表 ， 它與離子的水合離子半徑大小和帶電荷的多少有關(guān) 。 ? 稱取干樹脂 1克，置于 250mL錐形瓶中、準確加入 ,振蕩后放置過夜，用移濃管吸取上層清液 25mL，加酚酞指示劑1滴，用 ，設(shè)用去標準 HCl溶液 14mL，樹脂的交換容量可以計算為 mmol/g。 但是如果交聯(lián)度過大則對水的膨脹性能差 (一般要求 1克干樹脂在水中能膨脹至 宜 )， 交換反應(yīng)的速度慢 ， 因此要求樹脂的交聯(lián)度一般為 414％ 。 交聯(lián)度 樹脂的交聯(lián)度越大 ， 則網(wǎng)眼越小 ， 交換時體積大的離子進入樹脂便受到限制 。如果二乙烯苯在原料總量中占 10%。 交聯(lián)度 ? 樹脂中所合交聯(lián)劑的百分率稱為重量交聯(lián)度。 水化 : RNH3OH、 RNH2CH3OH、 RNH(CH3)2OH 和 RN(CH3)3OH ,OH可被陰離子交換和洗脫 。 二、陰離子交換樹脂
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