離心分離技術(shù)ppt課件-文庫吧資料
2025-05-07 22:13本頁面
【正文】 品中各種粒子的密度 時間 效應(yīng) 長時間離心，所有待分離粒子都沉降在管底 長時間離心，各粒子停留在等密度位置形成區(qū)帶 等密度離心 差速區(qū)帶離心 （二）分析性超離心 分析性超速離心主要是為了研究生物大分子的沉降特性和結(jié)構(gòu)，而不是專門收集某一特定組份。 （ 2）等密度離心 （ Isopyic centrifugation） 指當(dāng)不同顆粒存在 浮力密度差 時，在離心力作用下，顆?；?向下沉降 或 向上浮起 ，一直沿梯度移動到與其密度恰好相等的位置上（即等密度點），形成區(qū)帶而分離的方法。因此大小相同，密度不同的粒子 (如線粒體、溶酶體和過氧物酶體 )不能用此法分離。 離心過程中區(qū)帶的位置、形狀隨離心時間而改變 用于分離有一定沉降系數(shù)差的顆粒，與密度無關(guān) 把樣品鋪放在一個 連續(xù)的液體密度梯度 上，然后進行離心，并控制離心分離的時間，使得粒子完全 沉降之前 ，在液體梯度中移動而形成不連續(xù)分離區(qū)帶。 缺點 ： ①離心時間較長； ②需要制備梯度； ③操作嚴(yán)格，不宜掌握。 樣品鋪在密度梯度溶液表面，離心后形成若干條界面清楚的不連續(xù)區(qū)帶。 密度梯度區(qū)帶離心法 密度區(qū)帶離心法 是樣品在一定 惰性梯度介質(zhì) 中進行離心沉淀或沉降平衡，在一定離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上， 形成不同區(qū)帶 的分離方法。 （一）制備性超離心 差速離心 (Differential centrifugation) 優(yōu)點 ： 操作簡單，離心后用傾倒法即可將上清夜與沉淀分開，并可使用容量較大的角式轉(zhuǎn)子。 二、超離心技術(shù)的分類 差速離心 （一）制備性超離心 （二）分析性超離心 等密度離心 一般密度梯度離心法 密度梯度離心 采用不同的離心速度和離心時間，使 沉降速度不同 的顆粒在不同的離心速度及不同離心時間下分批分離的方法。 一、 超離心技術(shù)的原理 在某種介質(zhì)中，使一種球形粒子從液體的彎月面沉降到離心管某部 (如底部 )所需的時間： 當(dāng)粒子 直徑和密度 不同 , 移動同樣距離所需的時間不同 , 在同樣的沉降時間 , 其沉降位置也不同 . 式中 t為沉降時間， μ為懸浮介質(zhì)的粘度， d為粒子直徑， ρs為粒子密度， ρ為介質(zhì)密度； r1為旋轉(zhuǎn)軸中心到液體彎月面的距離， r2為從旋轉(zhuǎn)軸中心到離心管底部的距離。 離心機在生物工業(yè)中的應(yīng)用 （ P67） 167。 自動連續(xù)卸料離心過濾機為 (錐形轉(zhuǎn)鼓 ) 基本參數(shù) 選擇 顆粒 d,固液 ?差 ,? 基本型號 固體物濃度 亞型 產(chǎn)物熱穩(wěn)定性 低溫離心 流量 Q, 規(guī)模 規(guī)格 、 臺數(shù) 氣溶膠 ,活 cell 密封滅菌設(shè)計 167。當(dāng)懸浮液的固體粒子沉積時，濾餅表面生成了澄清液，該澄清液透過濾餅層和過濾介質(zhì)向外排出。 濾餅 離心過濾機工作原理圖 濾網(wǎng) 以 間歇離心過濾 為例，料液首先進入裝有過濾介質(zhì) (濾網(wǎng)或有孔套筒 )的轉(zhuǎn)鼓中，然后被加速到轉(zhuǎn)鼓旋轉(zhuǎn)速度，形成附著在鼓壁上的液環(huán)。 42 離心過濾 一、 離心過濾的原理 離心過濾是將料液送入有孔的轉(zhuǎn)鼓并利用離心力場進行過濾的過程，以離心力為推動力完成過濾。輸料螺旋將沉積的固相物連續(xù)不斷定推至轉(zhuǎn)鼓錐端，經(jīng)排渣口排出機外，較輕的液相物則形成內(nèi)層液環(huán)，由轉(zhuǎn)鼓大端溢流口連續(xù)溢出轉(zhuǎn)鼓，經(jīng)排液口排出機外。 顆粒在分離空間內(nèi)的運動路線 ?卸渣方式 臥式螺旋卸料沉降離心機是利用 離心沉降原理 分離懸浮液的設(shè)備，它主要用于完成 固液相有密度差 的懸浮液的固相脫水，液相澄清，粒度分級，濃縮等工藝過程。 碟式分離機轉(zhuǎn)鼓內(nèi)有一組碟片，把轉(zhuǎn)鼓空間分成許多薄層分離空間，從而大大縮短沉降距離，改善和提高分離效果。 沉渣沿碟片表面滑動而脫離碟片并積聚在 轉(zhuǎn)鼓內(nèi)直徑最大的部位 ，分離后的液體從出液口 排出轉(zhuǎn)鼓 。碟片與碟片間的距離用附于碟片背面的具有一定厚度的狹條來控制，碟片的距離為 ０ .5~。 碟式離心機是立式離心機的一種，轉(zhuǎn)鼓裝在立軸上端，通過傳動裝置由 電動機驅(qū)動 而高速旋轉(zhuǎn)。操作時，懸浮液自中心進料管加入轉(zhuǎn)鼓中，由內(nèi)向外順序流經(jīng)各分離室。 轉(zhuǎn)鼓內(nèi)有數(shù)個同心圓筒組成的環(huán)隙狀分離室。 缺點：出渣比較困難。
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