牛胚胎移植簡介ppt課件-文庫吧資料
2025-05-07 12:05本頁面
【正文】 檢到的胚胎應(yīng)及時移入含有 20％犢牛血清的 PBS培養(yǎng)液中進(jìn)行鑒定。 （五）胚胎的檢查 ? 胚胎的檢查包括兩個過程，一是檢胚，二是胚胎鑒定。 ? 收集胚胎的沖洗液可不含牛血清白蛋白，培養(yǎng)和保存時則需加入，或以胎犢血清代替。 ? 收集胚胎的沖洗液有多種，主要有杜氏磷酸鹽緩沖液（ DPBS），布林斯特氏液，合成輸卵管液（ SOF），惠屯氏液， Ham’s F－ 110以及 TCM－ 199，尤以 DPBS最常用。 ? 應(yīng)用非手術(shù)法收集胚胎時，只有當(dāng)胚胎都進(jìn)入子宮角后方可進(jìn)行。為此，沖卵時最好用手在直腸內(nèi)將子宮角提高并略加按壓，以利于沖卵液流出。每側(cè)子宮角需沖卵液 100～ 500ml。無論是雙通式還是三通式，其外管前端均連接一氣囊。沖洗之后，應(yīng)立即縫合傷口，母畜應(yīng)單獨飼養(yǎng)，并隨時觀察其傷口的愈合情況。沖卵操作，要求迅速準(zhǔn)確，以防止對傷口、生殖器官和沖卵液的污染，力求避免給動物帶來刺激和對生殖器管造成損傷。這種方式適合于各種家畜。上述兩種方式是當(dāng)胚胎還處于輸卵管時采用。另一種方式?jīng)_洗的方向與此相反，即由傘部注入沖洗液，在子宮角上端接取。 ? 手術(shù)法沖洗胚胎有以下幾種方式（圖 10－ 2）。 ? 1．手術(shù)法收集胚胎 根據(jù)畜種的不同及外科手術(shù)的要求，在腹中線或腹側(cè)作一切口，先將一側(cè)輸卵管及子宮角移出腹腔，用注射器吸取沖卵液注入輸卵管或子宮角內(nèi)進(jìn)行沖洗，并觀察卵巢上的排卵情況。 ? 胚胎收集的時間不應(yīng)該早于排卵后的第一天，最早應(yīng)在受精卵完成第一次卵裂之后，否則不易辨別卵子是否受精。只有這樣才能順利地完成胚胎的收集過程，并得到較高的胚胎回收率。收集胚胎有兩種方法，即手術(shù)法和非手術(shù)法，前者可用于各種家畜胚胎的收集，后者僅適用于牛、馬等大家畜，且只能在胚胎進(jìn)入子宮角后收集。為了得到較多得發(fā)育正常的胚胎，應(yīng)使用活率高、密度大的精液，而且可適當(dāng)?shù)脑黾尤斯な芫拇螖?shù)，兩次受精間隔 8～ 10個小時。這方面迄今仍是胚胎移植中有待改進(jìn)的問題之一。 ? 超排效果受動物的遺傳特性、體況、年齡，發(fā)情周期的階段、產(chǎn)后時間的長短、卵巢功能、季節(jié)、激素的品質(zhì)和用量等多種因素影響。因此，用PMSG進(jìn)行超排受到局限，結(jié)合注射 PMSG抗血清可以消除半衰期過長的副作用。如采用 FSH，用量為 10～ 20mg（或200～ 300大鼠單位），分 3天 6次注射，第 5次同時注射 PGF2a。 ? （ 2）母羊 在發(fā)情周期的第 16～ 18天，一次肌注（或皮下） PMSG750～ 1500IU，或每天注射兩次 FSH，連 3～ 4天，出現(xiàn)發(fā)情后或配種當(dāng)日再肌注 hCG500～ 700IU。具體做法是在注射 PMSG后，隔日肌肉注射 PGF2a或 5～ 10mg，或子宮灌注PGF2a2～ 3mg。另一種方法是在發(fā)情周期的中期，在注射促性腺激素的同時，注射或子宮灌注PGF2a 或其類似物以溶解黃體。該方法是按照發(fā)情周期的規(guī)律，在黃體期即將結(jié)束，卵泡期即將來臨前，順勢促進(jìn)較多的卵泡生長和成熟。 ? 2．超排處理方法 在母畜發(fā)情周期的適當(dāng)時期，利用外源性促性腺激素處理，增進(jìn)卵巢的生理活性，誘發(fā)許
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