遺傳的制作和基因定位下(1)-文庫吧資料
2025-05-06 12:06本頁面
【正文】 +ade++lacade+ = *100%=22%=22cM 220 1000 大腸桿菌的遺傳圖譜 圖距單位： 分鐘 總長度： 100分鐘 起點（ 0分鐘） ： thr座位 大腸桿菌的環(huán)形遺傳學圖 細菌的轉導和作畫 ? 1. 定義：以噬菌體為媒介所進行的細菌遺傳物質(zhì)重組的過程，稱 轉導。 ?推斷大腸桿菌的染色體為環(huán)形，而 F因子在細菌染色體上有許多插入位點，且插入方向不同。 azi：疊氮化鈉抗性， ton：噬菌體 T1抗性 ?中斷雜交實驗過程 表 8 5 H f r F－中斷雜交中不同時間非選擇標記標記的重組率 各非選擇標記標記的重組頻率（％） th r＋ 取樣時間（分） l e u＋ a z is to ns l a c＋ g a l＋ 5 0 0 0 0 0 10 100 12 3 0 0 15 100 70 31 0 0 20 100 88 71 12 20 40 100 90 75 38 20 ?中斷雜交實驗結果 ? （ 1）不同的非選擇標記進入受體且重組的時間不同，但都是穩(wěn)定的； ? （ 2）各基因的重組頻率隨著時間的增加而增加，直至極值； ? （ 3）按時間順序，先重組和后重組的基因，重組率的極值在逐步減少； 該方法主要根據(jù)基因轉移的先后次序，以時間為單位，求基因間的遺傳距離。 中斷雜交作圖 中斷雜交： 就是將兩個菌株（例如 Hfr a+ strs F a strr）在培養(yǎng)液中進行通風培養(yǎng)，每隔一定時間取樣，把菌液放入組織搗碎器里攪拌以中斷雜交，經(jīng)過稀釋接種到鑒別培養(yǎng)基上，待形成菌落后鑒定它們的基因型。 偶數(shù)交換 ：產(chǎn)生可遺傳的重組體和片段。一般情況下僅小部分細菌染色體能夠轉入，接合中斷 ? 受體細胞仍為 F－ ， F因子仍留在供體內(nèi)。 此時，細菌基因的 重組頻率增加 4倍 以上，因此染色體上整合有 F因子的菌株，稱為 Hfr菌株 。 F＋ F－ ： 先形成接合管， F因子的 DNA邊轉移邊復制， F－ 細胞? F＋ 細胞。 F 因子的三種狀態(tài)： 以大腸桿菌為例： ② ．一個自主狀態(tài) F因子，即 F＋ ； ③ ． 帶有一個整合的 F因子的細胞叫高頻重組細胞， Hfr細胞。 未攜帶 F因子的菌株為受體菌或雌性，用 F－ 表示。 ⑴ ． F 因子： 致育因子 (性因子 )，是一種附加體。 ∴ 直接接觸 (接合 )是原養(yǎng)型細胞出現(xiàn)的必要條件。 A+B菌株混合培養(yǎng) ，在完全培養(yǎng)基上，幾小時后離心，涂布基本培養(yǎng) ,長出原養(yǎng)型 (Met+bio+ thr+ leu+)菌落。 不同營養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌： A菌株： Met bio thr+ leu+， 需加 甲硫氨酸 和 生物素 。 特點： 需通過 細胞的直接接觸 。 Trp2 his2 tyr1 34 13 40 三者并發(fā)轉化的頻率最高，故這 3個基因是連鎖的， 其中 his2和 tyr1連鎖緊密： 單交換時，染色體開環(huán)易降解，故不存在單交換類型； 只有雙交換和偶數(shù)的多交換才有效的。 ③ ．整合 (重組 )： (三 )轉化和基因重組作圖 例如：黎德伯格等用枯草桿菌進行轉化和重組試驗 DNA 片段進入受體細胞之后，可與受體染色體發(fā)生重組。 ① .結合與穿入： 供體單鏈 DNA片段一旦進入細胞，按各個不同的位點與其相應的受體 DNA片段聯(lián)會。 當細菌處于 感
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