【正文】 天以后就會(huì)變綠，起霉。以下是配置CMCNa過(guò)程中需要注意的方面：先將稱好的CMCNa加入所需水量的8/10,讓其充分溶漲后,再加熱煮沸,然后將剩余水慢慢加入。(5)將薄板轉(zhuǎn)入干燥器,令其自然冷卻至室溫,備用。其間保持薄板潔凈。(3)將硅膠糊均勻涂于()cm2載玻片上,～(干重)。置玻片于80℃烘箱干燥,轉(zhuǎn)入干燥器冷卻至室溫,備用。 mTLC薄層板的制備(1)將()cm2載玻片依次用水和乙醇洗凈，晾干。1 薄層色譜的制作 使用的化學(xué)藥品和儀器有:(1)化學(xué)藥品: 使用的主要化學(xué)藥品列于表1。小型薄層色譜(mTLC)技術(shù)作為合成實(shí)驗(yàn)中的常規(guī)監(jiān)測(cè)手段以及TLC和其它色譜技術(shù)的前導(dǎo)技術(shù)發(fā)揮著重要作用。以上是TLC的長(zhǎng)處,但應(yīng)當(dāng)指出,TLC在自動(dòng)化程度及分離效果上比氣相色譜和高效液相色譜稍差,分析特別復(fù)雜的樣品有時(shí)有困難,也不適于揮發(fā)性樣品的分析。5)檢出靈敏度高,一般可達(dá)1010g以下。3)可采用多種固定相及顯色手段,方法多樣而高效。 總之，與經(jīng)典的柱上色譜,常用的氣相色譜、紙上色譜,以及較近發(fā)展起來(lái)的高效液相色譜比較,TLC有以下特點(diǎn):1) 設(shè)備簡(jiǎn)單,操作方便。TLC法有著悠久的歷史,隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展,對(duì)外交流增多,很多實(shí)驗(yàn)室已采用商品化的薄層板,如滌綸片基硅膠板。相反,這些正是傳統(tǒng)分析的優(yōu)點(diǎn)。但是和傳統(tǒng)分析比較,儀器分析主要的弱點(diǎn)就是不靈活,必須按照固定的程序操作,更改條件比傳統(tǒng)方法繁瑣得多。儀器分析在精密性、準(zhǔn)確性、連續(xù)性、重現(xiàn)性等方面,有著傳統(tǒng)分析達(dá)不到的優(yōu)點(diǎn)。高效液相色譜、質(zhì)譜、氣譜等屬于儀器分析。薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)具有相同的分離原理,是依據(jù)不同物質(zhì)在流動(dòng)相與固定相之間的吸附和解吸速率不同來(lái)進(jìn)行物質(zhì)的分離。但直到1956 年德國(guó)學(xué)者E1Stahl較完整地發(fā)展了這個(gè)方法,TLC才得到廣泛重視和研究,成為色譜法的一個(gè)重要分支,處于活躍和發(fā)展?fàn)顟B(tài)。 118. 以展開(kāi)劑邊緣效應(yīng)的大小，確定展開(kāi)劑平衡時(shí)間的長(zhǎng)短，一般平衡時(shí)間在30分鐘即可。 117. 層析缸在展開(kāi)前最好平衡一個(gè)小時(shí)左右，讓里面的展開(kāi)劑平衡。 115. 飽和也非常重要，邊緣效應(yīng)很嚴(yán)重的不妨用下端浸在展開(kāi)劑中的濾紙貼在展開(kāi)缸的內(nèi)壁，這樣飽和效果會(huì)好一些。 平衡與飽和： 114. 藥典：展開(kāi)前如需要溶劑蒸氣預(yù)預(yù)平衡，可在展開(kāi)缸中加入適量的展開(kāi)劑，密閉，一般保持15～30分鐘，溶劑蒸氣預(yù)平衡后，應(yīng)迅速放入載有供試品的薄層板，立即密閉，展開(kāi)。自從發(fā)現(xiàn)可以用微量進(jìn)樣器后，不僅可以控制的得心應(yīng)手，不會(huì)因?yàn)橐话床环€(wěn)把藥液給全點(diǎn)上去導(dǎo)致斑點(diǎn)過(guò)大，還可以重復(fù)利用節(jié)省開(kāi)支，重要的是還環(huán)保。 113. 對(duì)于點(diǎn)樣我也有些心得。可以避免毛細(xì)管先快后慢的毛病。都可以很好的控制點(diǎn)樣量，且斑點(diǎn)也可以滿足要求。當(dāng)然，點(diǎn)樣的時(shí)候手不能抖動(dòng)，動(dòng)作要輕 110. 要磨平微量進(jìn)樣器的針尖，簡(jiǎn)單的方法就是，在展缸的蓋子上輕磨（當(dāng)然是靠近中間部分），就很快能解決問(wèn)題 ，且很平滑。你可以到藥店買1～2ml的注射器作為點(diǎn)樣器，可以滿足TLC鑒別的要求，而且很便宜哦！ 109. 點(diǎn)樣，我上學(xué)的時(shí)候，老師用比較便宜的進(jìn)樣器（大約10幾塊錢吧，10μl即可），將針尖打磨圓滑，老師好像是用銼一點(diǎn)一點(diǎn)銼的，這樣點(diǎn)樣的時(shí)候樣品溶液不容易沿針尖上行（甲醇溶液都這樣），并且針尖不會(huì)刺破已經(jīng)鋪好的薄層板。 107. 點(diǎn)樣，可以用進(jìn)樣器，也可以用定量毛細(xì)管（有點(diǎn)貴啊，5ul的2塊多一根），點(diǎn)樣時(shí)盡量使點(diǎn)小且圓整，盡量不要破壞板子。一般不少于8 mm，高效板供試品間隔不少于5 mm。高效板條帶寬度一般為4～8 mm，可用專用半自動(dòng)或自動(dòng)點(diǎn)樣器械噴霧法點(diǎn)樣。 點(diǎn)樣： 105. 藥典：點(diǎn)樣器 一般采用微升毛細(xì)管或手動(dòng)、半自動(dòng)、全自動(dòng)點(diǎn)樣器材。 103. 用于分離中藥的薄板需要活化，活化后要立即使用，可以稱熱點(diǎn)樣飽和，不然空氣中的水分會(huì)導(dǎo)致你作無(wú)用功，使得吸附色譜轉(zhuǎn)為分配色譜。 101. 再在105~110℃活化，~1小時(shí)，冷卻后即可使用。 活化：99. 活化的目的是除去水分。 97. 鋪制好的薄層板先讓其稍干后，即看不出有明顯的水印，放入烘箱內(nèi)用50度以下的溫度并開(kāi)鼓風(fēng)干燥30分鐘，再升溫干燥至干，注意升溫過(guò)快在使用的過(guò)程中有可能發(fā)生起層的現(xiàn)象，不利于分離，以上方法經(jīng)本人兩年多的實(shí)踐，效果較好且耗時(shí)又不太長(zhǎng)。 95. 自然干燥后，放入烘干箱烘12小時(shí)以上。 94. 要等陰干且透后才能放入烘箱干燥活化時(shí)。 92. 板鋪好后，自然涼干最好，一定是要從玻板后看也是干的，注意一定要放平，最好控制空氣流動(dòng)。干燥后再活化，否則板會(huì)開(kāi)裂。 89. 邊緣壞一點(diǎn)可以用刀子刮去整齊的一條。 86. 載玻片的涂布：將干燥后的載玻片兩片夾在一起，沉浸入糊狀物中，使在載玻片上形成固體層．為了浸蕉一對(duì)載玻片，用你的指間夾住載玻片的一端，并盡可能地向下進(jìn)入所提供的糊狀物中．當(dāng)載波片一浸入糊狀物中后，立即以快而平穩(wěn)的速度將其拉出，并讓過(guò)量的糊狀物滴回．小心的分開(kāi)載玻片，放到水平臺(tái)上，干燥．（注意：糊狀物一定要均勻；要迅速拉出載玻片，大多數(shù)人拉得太慢） 87. 研磨硅膠時(shí)，我一般取30 g硅膠H，加入５％的CMCNa 100 ml，研磨，當(dāng)將研棒提起時(shí)，硅膠象成溜似的滴下為正好。 84. 鋪板時(shí)，用的硅膠量要掌握好。此過(guò)程要與前面步驟連續(xù)進(jìn)行，且不宜久顛，以保證顛好后硅膠還有一定的流動(dòng)性，放置到平臺(tái)時(shí)仍可以靠自身流動(dòng)修正顛板及移動(dòng)所產(chǎn)生的不均。涂抹結(jié)束后，就顛板啦，我的經(jīng)驗(yàn)是顛的幅度不易大，但頻率可以快些。重復(fù)幾次即可。 79. 依據(jù)薄層板使用需要，將適量研好的吸附劑倒到薄層板上，先用小錘將吸附劑蕩勻，傾斜層析板，使吸附劑流至層析板一側(cè)，待吸附劑蓄積一定量后，再反向傾斜層析板，使吸附劑回流；然后是另外兩個(gè)方向，重復(fù)上述操作，后輕顛幾下薄層板即可。顛板（上下左右或傾斜根據(jù)板的涂布情況而定）。 78. 將薄層用硅膠粉稱定加入3倍量的CMCNa溶液，研磨均勻（勻速一個(gè)方向）成糊狀（我用1分鐘左右），不要靜置迅速將涂料倒于備好的玻璃板（事先清洗干凈，不可有污漬、水滴。尤其是4個(gè)角，容易高出玻璃板其他部位，所以要格外注意。 77. 鋪板，我覺(jué)得是各人各喜歡，可以順著板中間倒，也可以順著某個(gè)邊緣倒，倒時(shí)也要注意不能引入小氣泡。表面應(yīng)均勻，平整，無(wú)麻點(diǎn)、無(wú)氣泡、無(wú)破損及污染。 鋪板： 75. 藥典：薄層板制備 除另有規(guī)定外，將1份固定相和3份水（或加有黏合劑的水溶液）在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（～ mm），取下涂好薄層的玻板，置水平臺(tái)上于室溫下晾干，后在110℃ 烘30分鐘，即置有干燥劑的干燥箱中備用。 72. 研磨的時(shí)候確實(shí)需要沿一個(gè)方向研，不要敷衍 73. 硅膠研磨要充分，防止氣泡。 68. 超聲的排氣效果很好。 66. 研磨時(shí)防止氣泡可以加少量的乙醇或者丙酮；加入幾滴乙醇或丁醇，可起到消泡的作用。 64. CMCNa：：1較好，樓上師兄說(shuō)的3：1應(yīng)該也可以，但是硅膠配的過(guò)稀時(shí)后果很嚴(yán)重，板子在晾干時(shí)會(huì)出現(xiàn)許多裂縫，象萬(wàn)壽菊樣的開(kāi)花狀，完全不能用。 62. 建議硅膠應(yīng)配制成偏稀的狀態(tài)，這樣鋪制更容易，不必辛苦地顛好久，而且可多可少，可薄可厚。 61. 硅膠的濃度要適中。研磨時(shí)要順著一個(gè)方向，速度不宜快，要順著研缽的邊緣，觀察仔細(xì)，一定要把氣泡趕盡殺絕?？梢砸粋€(gè)人研磨，一個(gè)人緩慢的倒CMCNa溶液。 59. 先在研缽中加CMC溶液，再加硅膠，按同一方向研磨，這樣更容易調(diào)勻不易包埋硅膠顆粒；稠度以用研棒粘取，成連珠狀不成線狀下滴為好；配制時(shí)遵循現(xiàn)配現(xiàn)用、少量多次的原則，因其易干影響鋪制效果。手工鋪硅膠的用量一般1020 cm的約3～4克，硅膠和CMCNa的用量一般是1：～3，具體根據(jù)要鋪板子的厚度和CMCNa的濃度決定。 總結(jié)：完整、平滑、清潔！ 研磨： 56. 硅膠和粘合劑的比例不用固定，稀點(diǎn)鋪薄板，稠點(diǎn)鋪厚板，以目的決定比例。 54. 板子一定要洗干凈，用適中濃度的鹽酸浸泡是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。 52. 清洗玻璃板相當(dāng)重要，切記要清洗得相當(dāng)干凈，不然會(huì)在鋪板中產(chǎn)生小氣孔。 51. 載板要求平滑清潔。 玻板： 49. 選擇合適的薄層板（如：2010 cm），清潔干凈（先用洗手液或洗衣粉清洗，再用自來(lái)水沖洗干凈，接著用蘸有乙醇的棉花擦拭干凈，最后把板吹干或烘干），放置于清潔處，備用。 45. CMCNa的溶解需要煮？？？？藥檢所的老師用一個(gè)大缸子裝水，按比例加入CMCNa，讓他自然溶漲、溶解，臨用前用漏斗，加脫脂棉，濾過(guò)即可； 46. 根據(jù)我的經(jīng)驗(yàn)，薄層版變黑與CMC－Na的濃度過(guò)大有關(guān)，如果你留意的話，你會(huì)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)顯色劑中有濃硫酸時(shí)，加熱時(shí)間稍長(zhǎng)就會(huì)變黑（其他顯色劑是沒(méi)事的），我老師說(shuō)這是因?yàn)闈饬蛩岚袰MC－Na炭化了，其實(shí)[color=blue=這種情況你只要適當(dāng)降低CMCNa的濃度就可以了，當(dāng)然如果不加CMCNa的話容易把板弄破； 47. CMCNa溶液煮了以后不能再用冷水兌，否則，幾天以后就會(huì)變綠，起霉。 42. CMCNa要用蒸餾水為溶劑，加熱溶解后，放冷，最好濾過(guò)使用；消泡劑可直接與CMCNa溶液混合使用； 43. 如是鋪CMCNa的薄層板，先將CMCNa溶解完全，可將溶解成所需濃度加熱后超聲處理，再抽濾，可很快得到上清液。 41. 對(duì)于CMCNa溶液的配置，我認(rèn)為最好提前幾日配好，放置再用。要放冷。千分之3。 36. 有個(gè)辦法過(guò)濾CMCNa溶液，在布氏漏斗上平鋪薄薄一層脫脂棉，千萬(wàn)保證每個(gè)小孔都沒(méi)漏掉哦！用蒸餾水潤(rùn)濕脫脂棉，啟動(dòng)真空泵，抽緊后就可以放心大膽的倒CMCNa溶液了，保證濾過(guò)的溶液澄清透明，而且長(zhǎng)時(shí)間放置不沉淀。繼續(xù)加到水中，還可以配制。倒出上清液，（非常清，也同時(shí)消除了過(guò)濾過(guò)程中可能發(fā)生的污染）。 CMCNa后處理，很多人說(shuō)是過(guò)濾，或者抽濾，我覺(jué)得可能速度很慢，而且又容易浪費(fèi)。 34. 在CMCNa的溶解過(guò)程中，可以使用可進(jìn)行加熱操作的磁力攪拌器，大概攪拌5小時(shí)，應(yīng)該可得到滿意的效果。 31. 配制CMCNa溶液時(shí)，可以先量取好蒸餾水，再將稱量好的CMCNa均勻撒在水中，用玻璃棒攪拌，如果操作的好的話可以不用加熱都能溶解的很好；當(dāng)溶解完全后，應(yīng)該抽濾一下，這樣鋪的板子很均勻，不過(guò)濾會(huì)因?yàn)橐恍┤庋劭床坏降牟蝗芪锘烊?，這樣鋪的板子會(huì)出現(xiàn)許多小顆粒； 32. 第一個(gè)關(guān)鍵的地方，你的CMCNa溶液必須配制的好，放置的也要很好，完全分層之后只能取上清液。 30. 配制CMCNa溶液，%，%左右，%即可。 如果你是做含量測(cè)定，比如說(shuō)用薄層掃瞄法，應(yīng)該做線性范圍，同板精密度，異板精密度，回收率。 27. 但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是溫度高于100度時(shí)，若改用不加CMC輔的水板來(lái)作