【正文】 基本相同：(1)對(duì)于一些具有酸堿性的化學(xué)成分，在溶液中部分電離，事實(shí)上展開時(shí)存在分子、離子兩種狀態(tài)，以中性的有機(jī)試劑展開必然會(huì)出現(xiàn)兩種層析行為，造成脫尾甚至是一條線；(2)展開劑選擇不當(dāng)；(3)點(diǎn)樣量過大，樣品超載。熒光薄層板檢測(cè)：熒光薄層是在硅膠中摻入少量熒光物質(zhì)制成的板，在254nm紫外燈，整個(gè)薄層板顯黃綠色熒光，被測(cè)物質(zhì)由余吸收了部分照射在此斑點(diǎn)位置的紫外線，而呈現(xiàn)各種顏色。如糖類加熱后會(huì)碳化，便于觀察。 有機(jī)黏結(jié)劑——羧甲基纖維素鈉（CMC）、淀粉、聚乙烯醇、高分子聚合物等。例如在燃料合成中：染料分子量大部分在600到1200之間,屬于大分子,但不屬于高分子。這樣雖然每次取的量可以定量,但在板層上會(huì)留下較大的斑點(diǎn),對(duì)板層展開距離的要求就要提高,否則不能對(duì)兩個(gè)似分未分的斑點(diǎn)做出準(zhǔn)確的判斷。操作熟練以后,還可傾斜接觸液面,對(duì)取樣量進(jìn)行控制。但是這樣做不僅浪費(fèi)板,而且沒有真正去除邊緣效應(yīng)的影響,只是減小了影響?？傊?要充分發(fā)揮薄層色譜靈活多變的特點(diǎn)[1]。 3）CMCNa是一種高分子材料,而高分子材料的溶解必然都會(huì)有一個(gè)溶漲、溶解的過程,所以配制的時(shí)候,應(yīng)該將稱好的CMCNa少量的撒在水的表面,讓其自然沉降,注意要散開平鋪,這樣能夠充分浸潤(rùn),使其溶脹,之后可以置于水浴鍋內(nèi)加熱溶解,當(dāng)然如果不是很急著用的話也完全可以,直接用水泡著放那,估計(jì)十天半月的也可以用了.在CMCNa的溶解過程中，也可以使用可進(jìn)行加熱操作的磁力攪拌器，大概攪拌5小時(shí)，應(yīng)該可得到滿意的效果。其實(shí)真正洗干凈的玻璃，很快就可以晾干的。鋪板時(shí)，可以順著板中間倒，也可以順著某個(gè)邊緣倒，也可以用玻璃棒引著溶液平鋪在玻璃板上，倒時(shí)也要注意不要引入小氣泡。關(guān)于活化出現(xiàn)裂板、爆板的問題，我從沒有遇上過。另外還有一個(gè)問題，這個(gè)展開劑中，甲醇用量較小，而甲醇又易揮發(fā)，容易產(chǎn)生邊緣效應(yīng)，要特別注意展開劑的平衡和層析缸的密封。要磨平微量進(jìn)樣器的針尖，簡(jiǎn)單的方法就是，在展開缸的蓋子上輕磨（當(dāng)然是靠近中間部分），就很快能解決問題，且很平滑。感覺輔水板關(guān)鍵是硅膠G與水的比例要達(dá)1：，而且研磨后要盡快涂布，不然易于凝固而難于涂布。4. 點(diǎn)樣的要求是什么，為什么要這樣做？點(diǎn)樣時(shí)用玻璃毛細(xì)管吸取試液適量，垂直地輕微接觸薄層板表面（注意防止損壞硅膠層）。5. 層析缸為何要先用展開劑飽和？若層析缸未先為展開劑飽和，則由于展開劑中各種溶劑的揮發(fā)度不同，在層析過程中，隨著展開劑的不斷揮發(fā)，會(huì)使缸內(nèi)展開劑組成不斷改變，而使展開劑的極性發(fā)生改變，從而使各種組分的Rf值發(fā)生改變，分離受到影響。然后在硅膠G中加入適量的蒸餾水研磨成均勻無氣泡的薄漿狀溶液，迅速倒在玻璃板上，隨即輕輕搖動(dòng)玻板，把硅膠涂布均勻，使它無氣泡，并保持在水平位置上陰干，若涂布不均勻或有氣泡，待干燥后，就會(huì)產(chǎn)生高低不平，或在活化時(shí)氣泡破裂，形成小空洞，這樣都影響展開和分離。關(guān)于顯色：在工作中研究過用硫酸乙醇顯色作定量分析的品種，但凡加了CMCNa的板都易糊，尤其是溫度高于100度時(shí)，要嚴(yán)格控制加熱顯色的時(shí)間。 當(dāng)然，點(diǎn)樣的時(shí)候手不能抖動(dòng)。3）展開劑比如氯仿：甲醇：氨水 （10:1:），有機(jī)溶劑的極性，甲醇氯仿，因此在這個(gè)展開劑中，如果極性略大，可適當(dāng)降低甲醇比例；如極性太小，可適當(dāng)增大甲醇比例。關(guān)于裂板：板子會(huì)裂口，一則可能是因?yàn)楣枘z的比例太大，二則可能是板子要在常溫下晾干后，才能在烘箱中活化。2．依據(jù)薄層板使用需要，將適量研好的吸附劑倒到薄層板上，先用小錘將吸附劑蕩勻，傾斜薄層板，使吸附劑流至薄層板一側(cè)，待吸附劑蓄積一定量后，再反向傾斜薄層板，使吸附劑回流然后是另外兩個(gè)方向，重復(fù)操作，后輕顛幾下薄層板即可。關(guān)于薄層板的要求：，沒有劃痕，在使用前可用洗滌液或肥皂水洗滌，再用水沖洗干凈。2）如果有抽濾裝置可以直接把CMCNa溶液濾過，就可以不必等它沉淀再取上清液了（還有兩個(gè)好處一是節(jié)省CMCNa溶液，二是抽濾過的CMCNa溶液的時(shí)候不必?fù)?dān)心會(huì)把下層的不溶物倒出來了！）。此外,在展開劑選擇方面,有文獻(xiàn)介紹了不同種類的樣品使用不同的展開劑 ,建議在工作、研究中根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行選擇,有時(shí)候可以把一些常用的展開劑比例稍微變化以后再應(yīng)用。在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn),傾斜的角度和原點(diǎn)離邊緣的遠(yuǎn)近有關(guān),離邊緣越近傾斜角度越大,點(diǎn)在中間的斑點(diǎn)幾乎不傾斜?，F(xiàn)簡(jiǎn)述如下:普通的玻璃加工操作即可獲得所需的細(xì)玻璃棒。這是因?yàn)?為了在板層上點(diǎn)出大小均勻的斑點(diǎn),每次吸取的量應(yīng)當(dāng)保持大致相同,這要求用毛細(xì)管吸收的溶液在管中保持相同的高度,前提是毛細(xì)管粗細(xì)必須相同,如果不同,更難達(dá)到要求。另外如果原料和產(chǎn)物均為無色且在紫外光照射下也無吸收的物質(zhì),如十二烷基磺酸鈉、丙三醇等非芳香族物質(zhì)也不適合用此法分析。 4 值得進(jìn)一步探討的問題 粘合劑分為無機(jī)粘合劑和有機(jī)粘合劑： 無機(jī)黏結(jié)劑——石膏（硫酸鈣），無機(jī)黏結(jié)劑的優(yōu)點(diǎn)是：耐高溫，耐酸堿，但涂鋪薄板動(dòng)作要快，否則勻漿易凝固。一般實(shí)驗(yàn)室常用帶有石棉網(wǎng)的電爐加熱。通用的顯色方法有顯色劑顯色（碘蒸氣顯色）、紫外線顯色和熒光薄層板顯色:(1)碘蒸氣顯色：將展開的薄層板揮發(fā)干展開劑后，放在盛有碘晶體的封閉容器中，升華產(chǎn)生的碘蒸氣能與有機(jī)物分子形成有色的締合物，完成顯色。另外還有一個(gè)問題，這個(gè)展開劑中，甲醇用量較小，而甲醇又易揮發(fā)，容易產(chǎn)生邊緣效應(yīng)，要特別注意展開劑的平衡和層析缸的密封。顛好的板，表面看上去要光滑平整，沒有氣孔。如果還解決不了那就只好放棄這塊玻璃板了。倒出上清液，上清液非常清，也同時(shí)消除了過濾過程中可能發(fā)生的污染。(2)%%比較合適，％～％最為實(shí)用，濃度高了，將來顯色時(shí),如果有加熱過程稍不小心板子容易發(fā)黑。其間保持薄板潔凈。1 薄層色譜的制作 使用的化學(xué)藥品和儀器有:(1)化學(xué)藥品: 使用的主要化學(xué)藥品列于表1。3)可采用多種固定相及顯色手段,方法多樣而高效。但是和傳統(tǒng)分析比較,儀器分析主要的弱點(diǎn)就是不靈活,必須按照固定的程序操作,更改條件比傳統(tǒng)方法繁瑣得多。但直到1956 年德國學(xué)者E1Stahl較完整地發(fā)展了這個(gè)方法,TLC才得到廣泛重視和研究,成為色譜法的一個(gè)重要分支,處于活躍和發(fā)展?fàn)顟B(tài)。 平衡與飽和： 114. 藥典：展開前如需要溶劑蒸氣預(yù)預(yù)平衡，可在展開缸中加入適量的展開劑，密閉，一般保持15～30分鐘，溶劑蒸氣預(yù)平衡后，應(yīng)迅速放入載有供試品的薄層板，立即密閉，展開。都可以很好的控制點(diǎn)樣量，且斑點(diǎn)也可以滿足要求。一般不少于8 mm，高效板供試品間隔不少于5 mm。 101. 再在105~110℃活化，~1小時(shí)，冷卻后即可使用。 94. 要等陰干且透后才能放入烘箱干燥活化時(shí)。 86. 載玻片的涂布：將干燥后的載玻片兩片夾在一起，沉浸入糊狀物中，使在載玻片上形成固體層．為了浸蕉一對(duì)載玻片，用你的指間夾住載玻片的一端，并盡可能地向下進(jìn)入所提供的糊狀物中．當(dāng)載波片一浸入糊狀物中后，立即以快而平穩(wěn)的速度將其拉出，并讓過量的糊狀物滴回．小心的分開載玻片，放到水平臺(tái)上，干燥．（注意：糊狀物一定要均勻；要迅速拉出載玻片，大多數(shù)人拉得太慢） 87. 研磨硅膠時(shí)，我一般取30 g硅膠H，加入５％的CMCNa 100 ml，研磨，當(dāng)將研棒提起時(shí)，硅膠象成溜似的滴下為正好。重復(fù)幾次即可。尤其是4個(gè)角，容易高出玻璃板其他部位，所以要格外注意。 72. 研磨的時(shí)候確實(shí)需要沿一個(gè)方向研，不要敷衍 73. 硅膠研磨要充分，防止氣泡。 62. 建議硅膠應(yīng)配制成偏稀的狀態(tài)，這樣鋪制更容易，不必辛苦地顛好久，而且可多可少，可薄可厚。 59. 先在研缽中加CMC溶液，再加硅膠，按同一方向研磨，這樣更容易調(diào)勻不易包埋硅膠顆粒；稠度以用研棒粘取，成連珠狀不成線狀下滴為好；配制時(shí)遵循現(xiàn)配現(xiàn)用、少量多次的原則，因其易干影響鋪制效果。 52. 清洗玻璃板相當(dāng)重要，切記要清洗得相當(dāng)干凈，不然會(huì)在鋪板中產(chǎn)生小氣孔。 42. CMCNa要用蒸餾水為溶劑，加熱溶解后，放冷，最好濾過使用；消泡劑可直接與CMCNa溶液混合使用； 43. 如是鋪CMCNa的薄層板，先將CMCNa溶解完全，可將溶解成所需濃度加熱后超聲處理，再抽濾，可很快得到上清液。 36. 有個(gè)辦法過濾CMCNa溶液，在布氏漏斗上平鋪薄薄一層脫脂棉，千萬保證每個(gè)小孔都沒漏掉哦！用蒸餾水潤(rùn)濕脫脂棉，啟動(dòng)真空泵，抽緊后就可以放心大膽的倒CMCNa溶液了，保證濾過的溶液澄清透明，而且長(zhǎng)時(shí)間放置不沉淀。 34. 在CMCNa的溶解過程中，可以使用可進(jìn)行加熱操作的磁力攪拌器，大概攪拌5小時(shí)，應(yīng)該可得到滿意的效果。 27. 但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是溫度高于100度時(shí)，若改用不加CMC輔的水板來作，就不會(huì)有烘糊現(xiàn)象，但不加CMC輔的板又太軟，點(diǎn)樣時(shí)容易點(diǎn)出洞，%，這樣就不易烘黑的。此溶液可保存一周。一般來說為得到較好的分離效果，應(yīng)先飽和一下，第二次使用如果還要飽和就會(huì)造成另一側(cè)殘留的展開劑附著在板子上，造成影響。這樣的好處有三：（1）只要操作小心，各個(gè)同心圓真的就非常圓，即不會(huì)出現(xiàn)線性層析中的邊緣效應(yīng)等。當(dāng)然，也可以參考文獻(xiàn)中采用的流動(dòng)相。然后將前沿、原點(diǎn)以及前沿及原點(diǎn)間的硅膠分別刮下，提取。 8. 如果你鋪板目的是做分析用的話，肯定得很仔細(xì)用心；如果僅是天然藥化那種粗略檢查過柱子得到的餾分純度，那就沒有必要這么復(fù)雜了，也就是說速度可以快點(diǎn)，板的要求也沒有必要這么高； 9. 單純的手鋪板，技巧要求很高的，如果有鋪板器（也是完全手動(dòng)的那種），鋪出的板子基本上可以保證均一的。后者的操作各位大蝦已有論述。浪費(fèi)了整整一瓶GF254?。ㄗ龅氖侵苽浒逵昧枯^大）。2. 40%硅膠：按CMC溶液的量、按40%的比例稱取薄板層析硅膠，倒入大研缽中，與CMC溶液混合，充分研磨成均勻糊狀。3．鋪板，我覺得是各人各喜歡，可以順著板中間倒，也可以順著某個(gè)邊緣倒，倒時(shí)也要注意不能引入小氣泡。鋪薄層板的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),不能太稀了,不然硅膠的黏附性不好,不容易和硅膠混勻,%,這樣也不容易有氣泡,鋪好后將玻璃板放在桌邊小心上下顛動(dòng),保證薄層板所以地方都一樣均勻.,這種情況CMCNa不能太稀,容易擴(kuò)散點(diǎn)樣量宜少,早上的時(shí)候正好薄層板已干,，如果未完全干會(huì)導(dǎo)致活化的時(shí)候薄層板硅膠開裂. 一、手工鋪板是非?？简?yàn)?zāi)愕哪土Φ氖虑?，最好是找?shí)驗(yàn)室的GGJJMMDD們一起，一來速度快，二來大家儀器交流心得。研磨好的因改是均勻的，沒有氣泡，沒有固體的粉末類異物，溶液有一定的粘性。（2）如果有抽濾裝置你可以直接把CMCNa溶液濾過，就可以不必等它沉淀再取上清液了（嘿嘿，我是急性子），還有兩個(gè)好處一是節(jié)省CMCNa溶液，二是倒濾過的CMCNa溶液的時(shí)候不必?fù)?dān)心會(huì)把下層的不溶物倒出來了?。?三、本人的工作經(jīng)驗(yàn)：薄層層析制板1. 配制4%～5%的羧甲基纖維素（CMC）：稱取CMC，溶于冷水中，邊加熱邊攪拌，直至成為清澈、透明的溶液。此乃本人的慘痛經(jīng)歷，當(dāng)時(shí)不知道是硅膠過稀的原因，還以為冬天太冷板子給凍裂了，又作了一批放在暖氣房，還是照裂不務(wù)。每份硅膠G加水2—3份調(diào)成糊狀，即可使用。后者