[理學]第九章核酸代謝-文庫吧資料
2025-03-28 06:40本頁面
【正文】 是自發(fā)的，也可以是誘發(fā)的 (紫外線、 γ－射線、疊氮物、亞硝酸等物化因素 )。 紫外光 TT二聚體 可見光激活該 酶 只有高等哺乳動物該功能退化掉了。 依賴 RNA的DNA聚合酶 核糖核酸酶 H 依賴 DNA的DNA聚合酶 逆轉錄過程中 cDNA的合成 ? 前病毒學說（ Temin） ——逆轉錄過程 ? 生物學意義： 擴充了中心法則； 有助于致癌機制、艾滋病起因的研究；與真核細胞分裂和胚胎發(fā)育有關；逆轉錄酶是分子生物學重要工具酶。3 39。5 39。3 39。5 39。3 39。5 39。3 39。5 39。 ? 真核生物復制的終止 :染色體 DNA呈線性，復制在末端停止。3 39。5 39。3 39。5 39。3 39。5 39。3 39。5 39。D N A p o l I I IdCTPdATPdATPdTTPdTTPdGTP dGTPdCTP? 隨后鏈的模板繞 DNA聚合酶向后回折成環(huán)，復制叉 上的 DNA聚合酶 III全酶同時合成前導鏈和隨后鏈。3 39。方向延長子鏈。－ OH形成磷酸二酯鍵，由 5180。5 39。3 39。 解鏈酶 ? 引物合成：引發(fā)體引導引物酶到達適當?shù)奈恢煤铣梢铩? (大腸桿菌 )P307 分為三個階段： (1)起始 (initiation) ——RNA引物的合成 (2)延長 (elongation) ——向 RNA引物 3’端添加 dNTP，合成 DNA短的片段 (3)終止 (termination)——RNA引物脫落，代替相應的 DNA序列，通過共價鍵連接短片段，形成 DNA片段。 ? Ⅰ 型拓撲異構酶：使 DNA一條鏈斷裂和再連接 ? Ⅱ 型拓撲異構酶：使 DNA兩條鏈斷裂和再連接 ← 旋轉酶 (3)規(guī)律 ① DNA復制是半保留的； ② DNA復制必須在特定的位點開始，這樣的位點稱為復制起始點 (origin, ori)，原核生物只有一個復制起始點；真核生物染色體 DNA有多個復制起始點，同時形成多個復制單位，兩個起始點之間的 DNA片段稱為 復制子 (replicon)P317。 (5)單鏈結合蛋白（ SSB） ? 穩(wěn)定已被解開的 DNA單鏈，阻止復性和保護單鏈不被核酸酶降解。 (4)解螺旋酶（解鏈酶） ? 利用水解 ATP釋放的能量，催化雙鏈DNA解開形成單鏈。 ? 不催化兩條游離 DNA單鏈的結合。 ? DNA聚合酶 Ⅲ ：真正起復制作用的酶 ?由 10種亞基組成的不對稱二聚體 ?α、 ε和 θ構成核心酶 ?α亞基有聚合活性 ?ε亞基有 3’→ 5’外切酶活性 (3)連接酶 ? 催化雙鏈 DNA切口上 5’P與 3’OH的共價連接。新合成的鏈按 5’→ 3’方向進行延伸。 ? 引物酶以單鏈 DNA為模板， NTP為底物合成 RNA。 (1)引物酶 ? 已知的任何一種 DNA聚合酶都不能從頭合成一條新 DNA鏈， DNA的合成需要一段引物。 (2)條件 P303306 ? 底物： dNTP(dATP、 dGTP 、 dCTP 、 dTTP) ? 聚合酶 (polymerase)：依賴 DNA的 DNA聚合酶(Ⅰ 、 Ⅱ 、 Ⅲ )，簡寫為 DNApol； ? 模板 (template)：解開成單鏈的 DNA母鏈； ? 引物 (primer)：提供 3180。5 39。 3 39。解 鏈 方 向3 39。5 39。3 39。← 復制方向 復制叉 ② 另外一條鏈 (隨后鏈 ,lagging strand)的合成是不連續(xù)的，復制叉打開后，也是按5’→3 ’方向即母鏈的 3’→5 ’方向 (與復制叉方向相反 )合成若干個短片段，然后通過連接酶連接起來，所以整個過程是半不連續(xù)的。5 39。3 39。 5 39。 Stahl 同位素標記 （ 15N） 結合密度梯度離心法 P318 (Semidiscontinuous replication) ? DNA的兩條鏈方向是相反的 (5’→3 ’，3’→5
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