【正文】
signals in osteoblastic cells[J]. Biol Chem,2002,277:23937—23941.[23] 王衛(wèi)平。腺病毒介導(dǎo)的人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因修復(fù)兔橈骨缺損。277:297311[18] 易誠青,鄭啟新,杜靖遠(yuǎn),等. 轉(zhuǎn)化生長因子β1基因轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外成骨研究 中華創(chuàng)傷雜志 2002。64:295[16] Locklin RM, Willianison MC, Beresford JN, et al, In vitro effects of growth factors and dexamethasone on rat marrow stromal orthop,1995。79:320326[14] SuLi Cheng, Joseph W,Leonard R, et al, Differentiation of human bone marrow osteogenic stromal cells in vitro:Induction of the osteoblast phenotype by dexamthasore. [J].Emdocrinology,1994。51(4):305311[12] Maniatopoulos C, Sodek J, Melcher AH, et al, Bone formation in vitro by stromal cells obtain from bone marrow of young adult kes,1988。226(6):507—520[10] Reddi AH. Bone morphogenetic marrow stroml cell,and mesenchymal stem cells,Maureen owen 。21:495500[8] Pittenger MF, Mackay Am, Beck SC, Multilineage potenial of adult human mesenchymal stem cell. Science, 1999。14:661—666.[6] Kazuhito I, Yakayuki M, Hiroshi N, Repair of bone defect with cultured chondrocytes bound to hydroxyapatite. Clin Orthop. 1993。參考文獻(xiàn)[1].Comell CN,Lane JM. Newest factors in fracture healing. Clin Orthop, 1992: 277:297.[2]. Frost HM. The biology of fracture healling. An overview for clinicians Part 1.Clin Orthop,1989;248 :283—293[3] Mundy of bone formation by bone morphogenetic proteins and other growth Orthop,1996,324:25. [4] Vacanti CA, Kim W, Upton J, et al. Tissueengineered growth of bone and cartilage. [J] Transplant 。目前從分子生物學(xué)水平對中藥療效及作用機(jī)理的研究還比較少,特別是中藥對組織工程的影響還有大量工作要做,中藥對BMSCs生物學(xué)行為影響的研究僅偶見報(bào)道[31]。它既具有體外實(shí)驗(yàn)條件可控性強(qiáng)、藥物效應(yīng)易于檢測,便于從細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)來角度入手則可深入揭示藥物作用機(jī)理,又能夠防止中藥組制劑本身的理化性質(zhì)對實(shí)驗(yàn)的干擾,還能反映中藥在胃腸道消化吸收,再經(jīng)生物轉(zhuǎn)化,最后產(chǎn)生藥理效應(yīng)的真實(shí)過程,其原有成分或在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性成分,或代謝后失活,或沒有被吸收入體內(nèi),或通過第二信使而間接起作用都可以通過血清藥理學(xué)反映出來,理論上更具備科學(xué)性、真實(shí)性[29]。中藥血清藥理學(xué)最初由日本學(xué)者田代真一在1984年提出[28],它是指將中藥或中藥復(fù)方經(jīng)口灌服動(dòng)物一定時(shí)間后采取血液、分離血清,用此含有藥物成分的血清進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的一種方法學(xué)。其具有補(bǔ)腎陽,強(qiáng)筋骨,祛風(fēng)濕,益中氣之功效,中醫(yī)用于治療虛勞內(nèi)傷,腰膝酸痛,夢遺滑精,陽痿不起,寒濕痹痛,骨折遲緩愈合、不愈合等癥。巴戟天(學(xué)名Morinda officinalis)始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,以后歷代本草均有記載,系茜草科巴戟天屬,南亞熱帶雨林下的多年生常綠藤本植物,是我國四大南藥之一,為名貴中藥材,主產(chǎn)于福建、廣東、廣西等地,其中福建省南靖縣和溪鄉(xiāng)和永安縣湖山鄉(xiāng)等雨林中野生巴戟天資源豐富,品種繁多?!?、“腎生骨髓”、“腎之合骨也”。中藥的多位點(diǎn)、多環(huán)節(jié)的綜合作用方式正好適合這種需求,對于中藥促進(jìn)成骨及骨愈合機(jī)制的研究來說,這有可能是突破口之一。轉(zhuǎn)基因研究發(fā)現(xiàn),在I型膠原蛋白,骨橋素、BSP和骨鈣素基因的啟動(dòng)子區(qū)域Cbfal能與之結(jié)合的位點(diǎn),直接調(diào)節(jié)這些基因的表達(dá)。首先,cbfal在出生后及整個(gè)成骨細(xì)胞分化階段都保持著表達(dá);其次,Cbfal是骨鈣素的主要調(diào)節(jié)因子,骨鈣素基因在胚胎發(fā)育處于靜止?fàn)顟B(tài),而在成熟的成骨細(xì)胞是非常特異的表型。細(xì)胞分化并不是最后目的,成骨細(xì)胞進(jìn)行分化之后,必須完成它們的功能,細(xì)胞外基質(zhì)沉積和逐漸礦化。Cbfal除對成骨細(xì)胞的發(fā)育和分化有作用之外,還對骨基質(zhì)的沉積率有調(diào)節(jié)作用[21]。成骨細(xì)胞又稱為骨形成細(xì)胞,由具備多向分化潛能的間充質(zhì)細(xì)胞、前成骨細(xì)胞分化而來,一旦完成終末分化,分泌產(chǎn)生各種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白,并控制骨基質(zhì)的礦化過程。(2)Cbfa1能穩(wěn)定地調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞所有主要基因的表達(dá)。目前的研究表明Cbfal具有如下特點(diǎn):(1)Cbfal是骨形成的關(guān)鍵基因,又是成骨細(xì)胞(0B)分化和功能的中心調(diào)控因子,是0B分化最早且最具特異性的標(biāo)志,決定著成骨細(xì)胞的發(fā)生與分化, Cbfal在成骨部位的高表達(dá)以及在骨形成過程中的重要作用,提示它是成骨分化不可缺少的轉(zhuǎn)錄因