巴戟天對大鼠骨髓基質(zhì)細胞增殖、成骨分化及cbfal基因表達影響的研究開題報告-文庫吧
2025-01-06 15:56 本頁面
【正文】 成骨細胞轉(zhuǎn)化，但同時也抑制了BMSCs的增殖[13]。DEX是BMSCs體外成骨的必須成分，究其原因，這可能是由于骨細胞是糖皮質(zhì)激素的靶細胞[14]。Jaisawl[15]等研究發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中含有成骨添加劑（DEX、抗壞血酸和(β磷酸甘油)時，BMSCs的成骨能力明顯增強。Lecklin[16]等更是認為培養(yǎng)條件中必須有DEX、轉(zhuǎn)化生長因子β等因素存在,才能促使其大量向骨形成方向轉(zhuǎn)化。TGFβ1能誘導(dǎo)BMSCs向成骨方向分化及促進成骨細胞的增殖[17]。國內(nèi)學者易誠青等[18]的研究表明：TGFβ1基因轉(zhuǎn)染對BMSCs有明確的促成骨作用。BMP具有較強的骨誘導(dǎo)活性，能夠啟動BMSCs的成骨過程，能使誘導(dǎo)性骨細胞向確定性骨細胞轉(zhuǎn)化。BMPs現(xiàn)有15種以上，以BMP2的作用最強。徐小良等[19]用腺病毒介導(dǎo)的人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(Adv—hBMP—2)基因轉(zhuǎn)染的BMSCs能誘導(dǎo)本身和周圍的間充質(zhì)干細胞向成骨細胞分化并成骨，且符合骨愈合的需要?？傊?，BMSCs在骨組織工程領(lǐng)域的研究已取得很大進展，為骨組織的修復(fù)和重建拓展了全新的研究和治療思路，具有廣闊的應(yīng)用前景。核心結(jié)合子a（core binding factor a,Cbfa）,又稱多瘤病毒增強子結(jié)合蛋白（polymavirus enhancer binding protein,，PEBP）或急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)因子，屬于RUNT結(jié)構(gòu)域基因家族。它包括Cbfal、2和3，其中Cbfal僅表達于骨、胸腺和睪丸。目前的研究表明Cbfal具有如下特點：（1）Cbfal是骨形成的關(guān)鍵基因,又是成骨細胞(0B)分化和功能的中心調(diào)控因子，是0B分化最早且最具特異性的標志，決定著成骨細胞的發(fā)生與分化， Cbfal在成骨部位的高表達以及在骨形成過程中的重要作用，提示它是成骨分化不可缺少的轉(zhuǎn)錄因子?；蚱瞥龑嶒炞C實cbfal缺陷的純合鼠無骨的形成，雜合鼠則出現(xiàn)成骨細胞功能的下降。（2）Cbfa1能穩(wěn)定地調(diào)節(jié)成骨細胞所有主要基因的表達。Cbfal作為成骨分化關(guān)鍵性的轉(zhuǎn)錄因子，能在非成骨細胞或成骨前體細胞上調(diào)成骨分化相關(guān)基因的表達，使其向成骨細胞分化[20]。成骨細胞又稱為骨形成細胞，由具備多向分化潛能的間充質(zhì)細胞、前成骨細胞分化而來，一旦完成終末分化，分泌產(chǎn)生各種細胞外基質(zhì)蛋白，并控制骨基質(zhì)的礦化過程。Cbfal可與骨鈣素基因(Bgp)的啟動于區(qū)0B特異性的順式作用元件0SE(osteoblast—specificcisacting element)2結(jié)合，是0B分化所必需的。Cbfal除對成骨細胞的發(fā)育和分化有作用之外，還對骨基質(zhì)的沉積率有調(diào)節(jié)作用[21]。（3）Cbfa1表達的調(diào)節(jié)過程可成為骨形成新藥的目的靶。細胞分化并不是最后目的，成骨細胞進行分化之后，必須完成它們的功能，細胞外基質(zhì)沉積和逐漸礦化。cbfal的生物學特征提示它的功能不僅限于發(fā)育和分化。首先，cbfal在出生后及整個成骨細胞分化階段都保持著表達；其次，Cbfal是骨鈣素的主要調(diào)節(jié)因子，骨鈣素基因在胚胎發(fā)育處于靜止狀態(tài)，而在成熟的成骨細胞是非常特異的表型。這兩個特點使cbfal能在決定這些細胞的命運及保持它們的功能方面起作用。轉(zhuǎn)基因研究發(fā)現(xiàn)，在I型膠原蛋白，骨橋素、BSP和骨鈣素基因的啟動子區(qū)域Cbfal能與之結(jié)合的位點，直接調(diào)節(jié)這些基因的表達?？傊?，這些涉及到cbfal表達和調(diào)節(jié)的多個環(huán)節(jié)，可能成為骨形成新藥研究的作用靶點[22]。中藥的多位點、多環(huán)節(jié)的綜合作用方式正好適合這種需求，對于中藥促進成骨及骨愈合機制的研究來說，這有可能是突破口之一。祖國醫(yī)學理論認為:腎主骨，藏精，骨的愈合、生長有賴精血的充養(yǎng)，正如《黃帝內(nèi)經(jīng)》曰：“腎者，主蟄，封藏之本，精之處也，……，其充在骨。”、“腎生骨髓”、“腎之合骨也”。中醫(yī)臨床已充分證實使用中藥補腎益精能使骨愈合加快，治療骨折遲緩愈合、不愈合效果明顯。巴戟天（學名Morinda officinalis）始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，以后歷代本草均有記載，系茜草科巴戟天屬，南亞熱帶雨林下的多年生常綠藤本植物，是我國四大南藥之一，為名貴中藥材，主產(chǎn)于福建、廣東、廣西等地，其中福建省南靖縣和溪鄉(xiāng)和永安縣湖山鄉(xiāng)等雨林中野生巴戟天資源豐富，品種繁多。巴戟天以根部入藥，其氣味辛、甘，性微溫，《本經(jīng)》記載：“主……陽痿不起，強筋骨，安五臟，補中益氣增志”；《本草備要》載之“補腎益精……散風濕，治風氣腳氣水腫”。其具有補腎陽，強筋骨，祛風濕，益中氣之功效，中醫(yī)用于治療虛勞內(nèi)傷，腰膝酸痛，夢遺滑精，陽痿不起，寒濕痹痛，骨折遲緩愈合、不愈合等癥。據(jù)現(xiàn)代藥理研究[23]，巴戟天的化學成分復(fù)雜，現(xiàn)已分離得到11類化學物及24種無機元素，包括有糖類（多糖、單糖等）、蒽醌類化合物（大黃素甲醚、甲基異茜草1－甲醚3－醋酸脂等）、脂類（β－谷甾醇等）、氨基酸（11種游離氨基酸、17種水解氨基酸）、黃酮類化合物、有機酸類（棕櫚酸等）、多種甙類（水晶蘭甙、四乙酰車葉草甙等）、維生素C、無機元素（24種微量元素等）等成分，其中巴戟天水提物中含有糖類、維生素C、氨基酸等[24]，巴戟天醇提物中含有β－谷甾醇、蒽醌類化合物、黃酮、水晶蘭甙等[2227]。中藥血清藥理學最初由日本學者田代真一在1984年提出[28]，它是指將中藥或中藥復(fù)方經(jīng)口灌服動物一定時間后采取血液、分離血清，用此含有藥物成分的血清進行體外實驗的一種方法學。中藥血清藥理學提供了利用現(xiàn)代化手段來研究中醫(yī)藥，從細胞、分子、基因水平研究中藥的作用與其機理的方法，并有助于中藥化學成分研究及中藥藥動學研究的深入，為中藥與西藥的研究在實驗方法上找到了結(jié)合點。它既具有體外實驗條件可控性強、藥物效應(yīng)易于檢測，便于從細胞生物學和分子生物學來角度入手則可深入揭示藥物作用機理，又能夠防止中藥組制劑本身的理化性質(zhì)對實驗的干擾，還能反映中藥在胃腸道消化吸收，再經(jīng)生物轉(zhuǎn)化，最后產(chǎn)生藥理效應(yīng)的真實過程，其原有成分或在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性成分，或代謝后失活，或沒有被吸收入體內(nèi)，或通過第二信使而間接起作用都可以通過血清藥理學反映出來，理論上更具備科學性、真實性[29]。本課題主要通過血清藥理學的方法來研究巴戟天對體外培養(yǎng)的SD大鼠骨髓基質(zhì)細胞的生物學性狀的影響，探討巴戟天促進成骨及骨愈合的機制以及
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1