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天津工業(yè)大學(xué)考研微生物-文庫吧資料

2025-01-19 20:02本頁面
  

【正文】 菌的功能。此外還有枯草桿菌素、乳酸菌素、根瘤菌素等。(3)Col 質(zhì)粒:產(chǎn)細(xì)菌素的質(zhì)粒 ( Bacteriocin production plasmid)細(xì)菌素結(jié)構(gòu)基因、 涉及細(xì)菌素運(yùn)輸及發(fā)揮作用( processing) 的蛋白質(zhì)的基因、 賦予宿主對該細(xì)菌素具有 “免疫力 ”的相關(guān)產(chǎn)物的基因一般都位于質(zhì)?;蜣D(zhuǎn)座子上,因此,細(xì)菌素可以殺死同種但不攜帶該質(zhì)粒的菌株。R100質(zhì)粒 (89kb)可使宿主對下列藥物及重金屬具有抗性:汞( mercuric ion , mer)四環(huán)素( tetracycline, tet )鏈霉素 (Streptomycin, str)、磺胺 (Sulfonamide, sul)、氯霉素 (Chlorampenicol, cml)夫西地酸( fusidic acid, fus)負(fù)責(zé)這些抗性的基因是成簇地存在于抗性質(zhì)粒上 。在放線菌中,天藍(lán)色鏈霉菌含有 SCP1和 SCP2兩種致育質(zhì)粒,這兩種質(zhì)粒在天藍(lán)色鏈霉菌的接合過程中起重要作用,帶動染色體從供體細(xì)胞向受體細(xì)胞轉(zhuǎn)移。F因子能以游離狀態(tài) (F+)和以與染色體相結(jié)合的狀態(tài)(Hfr)存在于細(xì)胞中,所以又稱之為 附加體 (episome)。m質(zhì)粒(參見 P197)(1) 致育因子 (Fertility factor, F因子 ) 又稱 F質(zhì)粒,其大小約 100kb, 這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象(接合作用)有關(guān)的質(zhì)粒。對于由于三種構(gòu)型同時存在時造成的多帶現(xiàn)象(提取質(zhì)粒時造成或自然存在),可以進(jìn)行特異性單酶切,使其成為一條帶。⑤ 離心分離: 經(jīng)高速離心可以使細(xì)胞碎片和已變性的菌體蛋白及染色體 DNA一起沉淀,上清液中主要是質(zhì)粒 DNA, 經(jīng)乙醇沉淀后,可獲得質(zhì)粒 DNA。③ 堿變性處理: 在 SDS等表面活性劑存在下加 NaOH液使 pH升至,可使菌體蛋白質(zhì)、染色體 DNA以及質(zhì)粒 DNA變性。 質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)(1) 結(jié)構(gòu)通常以共價閉合環(huán)狀 (covalently closed circle, 簡稱 CCC)的超螺旋雙鏈 DNA分子存在于細(xì)胞中;也發(fā)現(xiàn)有線型雙鏈 DNA質(zhì)粒和 RNA質(zhì)粒;質(zhì)粒分子的大小范圍從 1kb左右到 1000kb;(細(xì)菌質(zhì)粒多在 10kb以內(nèi))堿提取法:① 菌體的培養(yǎng)和收集: 一般采用豐富培養(yǎng)基對菌體進(jìn)行培養(yǎng),當(dāng)細(xì)胞生長到 指數(shù)期后期 時,離心收集細(xì)胞。第二節(jié) 質(zhì)粒 P196質(zhì)粒( plasmid) 一種獨立于染色體外,能進(jìn)行自主復(fù)制的細(xì)胞質(zhì)遺傳因子,主要存在于各種微生物細(xì)胞中。Avery在四十年代以更精密的實驗設(shè)計重復(fù)了以上實驗分別用 S型菌中提取的 DNA、 RNA和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化 R型菌且 DNA被酶降解破壞
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