史上最強(qiáng)生物課件動物細(xì)胞工程-文庫吧資料
2025-01-19 16:03本頁面
【正文】 5年 Kohler和 Milstein的單克隆抗體技術(shù)在生產(chǎn)和使用抗體方面開創(chuàng)了新紀(jì)元，圖 10示單克隆抗體制備流程階段示意圖。 小鼠的脾臟 PEG、滅活的病毒等 利用 HAT選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，篩選 否 用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，稀釋度要 保證每個孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞。 ⑵用于治療疾病和運載藥物 ①特異性強(qiáng)、靈敏度高 生物導(dǎo)彈 —— 單克隆抗體＋抗癌藥物 ②療效高、毒副作用小 結(jié)合同位素的單抗 生物導(dǎo)彈 結(jié)合同位素的單抗 生物導(dǎo)彈 單抗 放射性同位素 項目 動物細(xì)胞融合 植物體細(xì)胞雜交 原理 細(xì)胞膜的流動性 細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性 融合前提 分散成單個細(xì)胞 去除細(xì)胞壁 誘導(dǎo)方法 聚乙二醇、離心、振動、電激、 滅活病毒 聚乙二醇、離心、振動、電激、 結(jié)果 獲得雜種細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物 獲得雜種植株 用途 制備單克隆抗體 培育作物新品種 意義 使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 克服遠(yuǎn)緣雜交障礙 動物細(xì)胞工程小結(jié) ? 動物細(xì)胞培養(yǎng)： 原理、營養(yǎng)、條件、過程、細(xì)胞生長特點、結(jié)果、應(yīng)用 ? 動物細(xì)胞融合： 原理、誘導(dǎo)方法、過程、應(yīng)用 ? 單克隆抗體的制備： 原理、過程、特點、應(yīng)用 ? 核移植與克隆動物： 供體、受體、核移植方法、克隆動物的方法、克隆動物的遺傳特性、應(yīng)用 ? 動、植物細(xì)胞工程的比較： 植物組培技術(shù)與動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動物細(xì)胞融合技術(shù) ⑶ 圖中 B為 ________過程， 常用 _________作為誘導(dǎo)劑 ，該細(xì)胞繼承 ___________的遺傳特性，既能__________,又能 ___________ 。 ③用于治療疾病和運載藥物 利用同位素標(biāo)記單抗，在特定組織成像 制成 生物導(dǎo)彈 ，將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的位置，在原位殺死癌細(xì)胞，療效高、副作用小。怎么篩 ? 又是一個思路問題。 ⑻ 如何得到大量的單克隆抗體？ 體內(nèi)培養(yǎng) 體外培養(yǎng) 單克隆抗體 —— 化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng) ?抗體 ?抗原 ?應(yīng)答 ?抗體的不純性 動物細(xì)胞受到抗原刺激 ,引起免疫反應(yīng)產(chǎn)生的球蛋白 . 不是自己的而又能引起免疫應(yīng)答反應(yīng)的物質(zhì)就是抗原 . 一種抗原有多種不同的決定簇 ,刺激的是多種 B細(xì)胞 ,作用于不同的 B細(xì)胞后 ,會產(chǎn)生多種抗體 , 這是多克隆的 , 故不純 ! 抗原 B細(xì)胞 漿細(xì)胞 抗體 刺激 ?怎么才能得到純的抗體 ? ?光純還不行 ,還要大量 .怎么辦 ? ?但，有 問題 : ?找，什么細(xì)胞能無限繁殖呢 ? ?思路就出來了 : 要想獲單一的純抗體 ,就必須從一個 B細(xì)胞出發(fā) . 讓 B細(xì)胞大量繁殖 (克隆 )就可以產(chǎn)生大量抗體了. B細(xì)胞是不能無限繁殖的 .怎么辦 ? 癌 ! 只有癌細(xì)胞 . 但它不能產(chǎn)生抗體 . 癌細(xì)胞能無限繁殖 ,但不能產(chǎn)生抗體 .B細(xì)胞能產(chǎn)生抗體 ,但不能大量繁殖 .融合呀 !只要將兩個細(xì)胞融合即可互補 . 雜交瘤細(xì)胞 HAT篩選 ? McAb 大量培養(yǎng) PEG誘導(dǎo)細(xì)胞融合 免 疫 B 脾 礦物油 骨髓瘤 瘤 問題 : 在培養(yǎng)體系中 , 有 4種細(xì)胞 . B細(xì)胞、瘤細(xì)胞 ,和雜交細(xì)胞。最終選出分泌預(yù)定特異抗體的雜交細(xì)胞株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。 你想到篩選雜交瘤細(xì)胞的方案了么？ 小資料： 在培養(yǎng)液中加入氨基蝶呤，收集增殖細(xì)胞！ 加入氨基嘌呤后，使 D 合成途徑阻斷，僅有 D 合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖， 但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞因為可以利用淋巴細(xì)胞中的 S 途徑合成DNA而增殖。 ② 人淋巴細(xì)胞中有這兩種 DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。 ⑵ 如何誘導(dǎo)融合？
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