史上最強生物課件動物細胞工程(存儲版)
【正文】 B細胞后 ,會產(chǎn)生多種抗體 , 這是多克隆的 , 故不純 ! 抗原 B細胞 漿細胞 抗體 刺激 ?怎么才能得到純的抗體 ? ?光純還不行 ,還要大量 .怎么辦 ? ?但，有 問題 : ?找，什么細胞能無限繁殖呢 ? ?思路就出來了 : 要想獲單一的純抗體 ,就必須從一個 B細胞出發(fā) . 讓 B細胞大量繁殖 (克隆 )就可以產(chǎn)生大量抗體了. B細胞是不能無限繁殖的 .怎么辦 ? 癌 ! 只有癌細胞 . 但它不能產(chǎn)生抗體 . 癌細胞能無限繁殖 ,但不能產(chǎn)生抗體 .B細胞能產(chǎn)生抗體 ,但不能大量繁殖 .融合呀 !只要將兩個細胞融合即可互補 . 雜交瘤細胞 HAT篩選 ? McAb 大量培養(yǎng) PEG誘導細胞融合 免 疫 B 脾 礦物油 骨髓瘤 瘤 問題 : 在培養(yǎng)體系中 , 有 4種細胞 . B細胞、瘤細胞 ,和雜交細胞。 小鼠的脾臟 PEG、滅活的病毒等 利用 HAT選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，篩選 否 用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，稀釋度要 保證每個孔內(nèi)不多于一個細胞。 （ 5）培養(yǎng) 2周后，即測定培養(yǎng)細胞 的特征，篩選出 細 胞置于不同孔內(nèi)（如圖所示）培養(yǎng)。 “ 多莉 ” 的培育等程序如圖所示。 制備單克隆抗體 常規(guī)抗體獲得的方法及其特點 單克隆抗體制備的原理 ◆ 利用 產(chǎn)生特異性抗體的功能。 將雜交瘤細胞稀釋，用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔細胞不超過一個，通過培養(yǎng)讓其增殖。 實驗過程要解決的問題： 如何使機體產(chǎn)生能分泌抗體的 B淋巴細胞？ 從實驗動物的什么部位提取 B淋巴細胞？ 機體內(nèi)什么細胞能無限增殖？ 用什么方法誘導細胞融合？ 雜交瘤細胞有幾種類型？制備單克隆抗體需要哪種類型？ 如何篩選雜交瘤細胞？ 。 ⑸ 如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？ 融合后的細胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細胞就是雜交瘤細胞。 培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細胞。 ⑷繼植物組織培養(yǎng)之后，克隆綿羊培育成功，證明動物細胞也具有 。 圖 10 （ 1）動物細胞融合（ 2）分泌特異性抗體 、無限增殖（ 3） PEG（滅活的病毒、電刺激） （ 4）細胞融合是隨機的過程，在 HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，要篩選出 細胞。 ⑵用于治療疾病和運載藥物 ①特異性強、靈敏度高 生物導彈 —— 單克隆抗體＋抗癌藥物 ②療效高、毒副作用小 結(jié)合同位素的單抗 生物導彈 結(jié)合同位素的單抗 生物導彈 單抗 放射性同位素 項目 動物細胞融合 植物體細胞雜交 原理 細胞膜的流動性 細胞膜的流動性和植物細胞的全能性 融合前提 分散成單個細胞 去除細胞壁 誘導方法 聚乙二醇、離心、振動、電激、 滅活病毒 聚乙二醇、離心、振動、電激、 結(jié)果 獲得雜種細胞或細胞產(chǎn)物 獲得雜種植株 用途 制備單克隆抗體 培育作物新品種 意義 使遠緣雜交成為可能 克服遠緣雜交障礙 動物細胞工程小結(jié) ? 動物細胞培養(yǎng)： 原理、營養(yǎng)、條件、過程、細胞生長特點、結(jié)果、應用 ? 動物細胞融合： 原理、誘導方法、過程、應用 ? 單克隆抗體的制備： 原理、過程、特點、應用 ? 核移植與克隆動物： 供體、受體、核移植方法、克隆動物的方法、克隆動物的遺傳特性、應用 ? 動、植物細胞工程的比較： 植物組培技術(shù)與動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、植物體細胞雜交技術(shù)與動物細胞融合技術(shù) ⑶ 圖中 B為 ________過程， 常用 _________作為誘導劑 ，該細胞繼承 ___________的遺傳特性，既能__________,又能 ___________ 。最終選出分泌預定特異抗體的雜交細胞株進行擴大培養(yǎng)。 如果利用單個 B淋巴細胞進行無性繁殖（克?。纬杉毎?，這樣的細胞群就有可能產(chǎn)生出 化學性質(zhì)單一 、 特異性強 的抗體 —— 單克隆抗體 。有時自身的組織或細胞也會成為抗原，如癌細胞等。 條件 ？ 液體、營養(yǎng)物質(zhì)（ 血清 ）、 PH、溫度、氣體、無菌等 動物組織塊 細胞懸液 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng)
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