【正文】 DP， EFTu和 GDP與結(jié)合在 A位上的氨基酰 tRNA分離（圖）。氨基酰 tRNA在進(jìn)位前需要有三種延長(zhǎng)因子的作用，即，熱不穩(wěn)定的 EF(EFTu),熱穩(wěn)定的 EF(EFTs)以及依賴 GTP的轉(zhuǎn)位因子。 ? MetRNAfmetGTP＋ mRNA＋ 40S小亞基＋ 60S大亞基 eIF5 eIF4D －－ → 80S復(fù)合物－－ → 有活性的 80SMettRNAfmet mRNA起始復(fù)合物 8 0 S 核糖體 + e I F 3 4 0 S 小亞基 e I F 3 + 6 0 S 大亞基 e I F 4Me t t R NAim e t + GT P + e I F 2Me t t R NAim e t e I F 2 GT P輔 e I F 24 0 S Me t t R NAim e t GT P 4 0 S Me t t R NAim e t m R NA GT Pe I F 1e I F 4 A, 4 Be I F 4 E ( 帽結(jié)合因子 )m R NAAT PAD P + P ie I F 5e I F 5GD P + P i8 0 S Me t t R NAim e t m R NAe I F 4 D活化 8 0 S 起始復(fù)合物Me tAU G8 0 S（三）多肽鏈的延長(zhǎng)： 1）進(jìn)位需３種延長(zhǎng)因子即 EF(EFTu), EF(EFTs)以及 GTP。（除某些病毒 mRNA外） 真核蛋白質(zhì)合成的起始 （ 3）真核起始復(fù)合物的形成 eIF3＋ 40S＋ eIF2＋ MettRNAfmet＋ GTP＋ eIF3＋ eIF4C＋ mRNA→ 起始復(fù)合物 ATP ? eIF3 ＋ eIF1 ＋ eIF4A ＋ eIF4B－－ → mRNA ＋ 40S小亞基 ? 通過帽結(jié)合因子與 mRNA的帽結(jié)合而轉(zhuǎn)移到小亞基上。真核起始因子近 10種。 SD與 30S小亞基中的16s rRNA3’端一部分序列互補(bǔ)．因此 SD序列也叫做 核糖體結(jié)合序列 ， （ 2） 30S前起始復(fù)合物的形成： IF2 ＋ GTP ＋ Mg2+ fMettRNA＋ AUG－－－－－－－ → IF230S亞基 mRNAfMettRNAfmet復(fù)合物 IF3從三元復(fù)合物中脫落 （ 3） 70S起始復(fù)合物的形成： 50S亞基＋ 30S前起始復(fù)合物 → 70S起始復(fù)合物（ 30S亞基 mRNA50S亞基 mRNAfMettRNAfmet 復(fù)合物） IF2脫落。 （二）多肽鏈合成的起始 大腸桿菌翻譯起始復(fù)合物的形成 （ 1） mRNA起始信號(hào)部位： SD序列 ＋ 16s rRNA3’ ＋ IF3＋ IF1 → IF330S亞基 mRNA三元復(fù)合物 。 1988年，候稚明和 Schimmel的實(shí)驗(yàn)證明丙氨酸 tRNA酸分子的氨基酸臂上 G3： U70這兩個(gè)堿基發(fā)生突變時(shí)則影響到丙氨酰 tRNA合成酶的正確識(shí)別，說明 G3： U70是丙氨酸 tRNA分子決定其本質(zhì)的主要因素。一組同功 tRNA由同一種氨?；?tRNA合成酶催化。 ? 原核細(xì)胞起始氨基酸活化后還要甲?；?，形成甲酰蛋氨酸 tRNA，而真核細(xì)胞沒有此過程。 五 . 蛋白質(zhì)的生物合成 ? 蛋白質(zhì)生物合成可分為五個(gè)階段： 氨基酸的活化 、多肽鏈合成的起始、 肽鏈的延長(zhǎng) 、肽鏈的終止和釋放、 蛋白質(zhì)合成后的加工修飾 。 五 . 蛋白質(zhì)的生物合成 ? 核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所， mRNA是蛋白質(zhì)合成的模板， tRNA是模板與氨基酸之間的接合體。 ? 細(xì)胞中大多數(shù)核糖體處于非活性的穩(wěn)定狀態(tài)，單獨(dú)存在，只有少數(shù)與 mRNA一起形成 多聚核糖體 。 ? 核糖體可解離為亞基或結(jié)合成 70S/80S顆粒。 ? 大亞基負(fù)責(zé)氨基酸及 tRNA攜帶的功能，如肽鍵的形成、 AA tRNA、肽基 tRNA的結(jié)合等。 16S rRNA 00C 400C 00C ＋ 21S顆粒 26S顆粒 30S核糖體亞基 21S蛋白質(zhì) 含有 15S蛋白質(zhì) 含有全部 21S蛋白質(zhì) 23S rRNA 00C 440C 00C ＋ 33S顆粒 41S顆粒 48S顆粒 5S rRNA mg2+ 含有 20L 含有全部 mg2+ ＋ 蛋白質(zhì) 34L蛋白質(zhì) 21S蛋白質(zhì) 50S核糖體亞基 核糖體的自我組裝 核糖體至少有 5個(gè)活性中心： ① mRNA結(jié)合位點(diǎn) ② AAtRNA結(jié)合位點(diǎn) （ A位） ③肽基轉(zhuǎn)移位點(diǎn)（ P位） ④肽酰 tRNA結(jié)合位點(diǎn) ⑤轉(zhuǎn)肽酶活性中心 ? 此外還有負(fù)責(zé)肽鏈延伸的各種 延伸因子的結(jié)合位點(diǎn)。 ? 真核生物核蛋白體小亞基含 18S rRNA和30多種 rps，大亞基含 28S、 、 5S三種rRNA，近 50種 rpl。S是大分子物質(zhì)在超速離心沉降中的一個(gè)物理學(xué)單位（沉降系數(shù)），可反映分子量的大小。還含 有與原核生物 5S rRNA中 CGAAC相同的保 守序列，以此與 tRNA作用和識(shí)別。其 803－ 811序列高 度保守， 2030－ 2615區(qū)有與 tRNAMet序列 互補(bǔ)的片段，這是其肽酰轉(zhuǎn)移酶的 2個(gè)位 點(diǎn)區(qū)域。在蛋白質(zhì)合成的起 始、延伸、終止中起活性作用。 rRNA （ 2） 16S rRNA：由 1475－ 1544個(gè) aa殘基組成。真核生物細(xì)胞核糖體大亞基含有 49種蛋白質(zhì)，小亞基有 33種蛋白質(zhì)。真核生物核糖體中 RNA占 3/5，蛋白質(zhì)占 2/5。核糖體和它的輔助因子為蛋白質(zhì)合成提供了必要條件。它是由幾十種蛋白質(zhì)和幾種核糖體 RNA（ rRNA）組成的亞細(xì)胞顆粒。 tRNA和氨基酰 tRNA ? tRNA的反密碼子環(huán)與 mRNA的密碼配對(duì) ? tRNA的 3端 CCAOH是氨基酸的結(jié)合位點(diǎn) ? 氨基酰 tRNA合成酶具有絕對(duì)專一性 校正活性 tRNA和氨基酰 tRNA 氨基酸 + tRNA 氨基酰 tRNA 氨基酰 tRNA合成酶 ATP AMP+PPi tRNA和氨基酰 tRNA ArgtRNAarg fMettRNAfmet MettRNAimet MettRNAemet 書寫方式： 四．核糖體 ? 核蛋白體 RNA(ribosomal RNA)是細(xì)胞內(nèi)含量最多的 RNA，約占 RNA總量的 80%以上，是蛋白質(zhì)合成機(jī)器內(nèi)核蛋白體 (核糖體 )的組成成分。 ? AAtRNA合成酶既要能識(shí)別 tRNA，又要能識(shí)別氨基酸，它對(duì)兩者都具有高度的專一性。 AA+ATP+酶（ E） → EAAAMP+PPi 第二步是氨?；D(zhuǎn)移到 tRNA 3?末端腺苷殘基上，與其 2?或 3?羥基結(jié)合。 tRNA反密碼子結(jié)合域： 與 tRNA反密碼子結(jié)合。 三． AA tRNA合成酶 ? 大腸桿菌分離出的 AA tRNA合成酶可分成兩類，但都具有三個(gè)區(qū)域： 催化域： ATP和氨基酸結(jié)合位點(diǎn)，有 2－ 3個(gè)相同的短 的 AA序列（稱 “ 署名序列 ” ）。 4． tRNA的種類 ? AA tRNA合成酶的作用是將 AA接合于 tRNA上。 4． tRNA的種類 （ 3）校正 tRNA 校正 tRNA分為 無義 突變及 錯(cuò)義 突變校正。 原核生物起始 tRNA攜帶甲酰甲硫氨酸（ fMet） ,真核生物起始 tRNA攜帶甲硫氨酸（ Met）。 ② 解讀 mRNA的遺傳信息。 2． tRNA的 L形三級(jí)結(jié)構(gòu) 3． tRNA的功能 ? tRNA在蛋白質(zhì)合成中處于關(guān)鍵地位。 反密碼子臂 是根據(jù)位于套索中央的三聯(lián)反密碼子命名的。 受體臂 （ acceptor ar