【正文】 視度調(diào)整；此外，在這些目鏡上可以加裝測(cè)量分劃板，測(cè)量分劃板的像總能清晰地調(diào)焦在標(biāo)本的焦面上；并且，為了防止目鏡被取走以及減少運(yùn)輸中被損壞的可能性，這些目鏡可以被鎖定。 （二） 光學(xué)系統(tǒng) 北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話： 01082895262 傳真： 01082895263 10 1． 目鏡 它是插在目鏡筒頂部的鏡頭，由一 組透鏡組成，可以使物鏡成倍地分辨、放大物像，例如 10X、 15X 等。 5． 調(diào)焦機(jī)構(gòu) 利用調(diào)焦手輪可以驅(qū)動(dòng)調(diào)焦機(jī)構(gòu)，使載物臺(tái)作粗調(diào)和微調(diào)的升降運(yùn)動(dòng)，從而使被觀察物體對(duì)焦清晰成像。臺(tái)上有一個(gè)彈性的標(biāo)本夾，用來(lái)夾住載玻片。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器就可讓不同倍率的物鏡進(jìn)入工作光路。根據(jù)有否攝像功能，可分為雙目鏡筒和三目鏡筒；根據(jù)瞳距的調(diào)節(jié)方式不同，可分為鉸鏈?zhǔn)胶推揭剖健? 四、 光學(xué)顯微鏡的組成結(jié)構(gòu) 光學(xué)顯微鏡包括光學(xué)系統(tǒng)和機(jī)械裝置兩大部分，而數(shù)碼顯微鏡還包括數(shù)碼攝像系統(tǒng)，現(xiàn)分述如下： （一） 機(jī)械裝置 1． 機(jī)架 顯微鏡的主體部分，包括底座和彎臂。于是，經(jīng)過(guò)聚光鏡的環(huán)形光束，在蓋玻璃片內(nèi)全反射而不能進(jìn)入物鏡，形成如圖中的回路。在普通的三透鏡聚光鏡前面，安置一個(gè)環(huán)形光闌，如圖 9 即可實(shí)現(xiàn)雙向暗視場(chǎng)照明。顯然，這種單向的暗視場(chǎng)照明，對(duì)觀察微粒的存在和運(yùn)動(dòng)是有效的，但對(duì)物體細(xì)節(jié)的再現(xiàn)不是有效的，即存在 ”失真 ”的現(xiàn)像。 暗視場(chǎng)照明又有單向和雙向之分 （ 1） 單向暗視場(chǎng)照明 圖 8 是單向暗視場(chǎng)照明示意圖。暗視場(chǎng)照明的原理是：不使主要的照明光線進(jìn)入物鏡，能夠進(jìn)入物鏡成像的只是由微粒所散射的光線。 3． 用暗視場(chǎng)來(lái)觀察微粒的照明方法 用暗視場(chǎng)方法可以觀察超顯微質(zhì)點(diǎn)。此時(shí)，被觀察物體的表面上沒有蓋玻璃片，標(biāo)本像的產(chǎn)生是靠進(jìn)入物鏡的反射或散射光線?？梢?，由于不是直接把光源，而是把被光源均勻照明了的輔助聚光鏡 2（也稱為柯拉鏡）成像在標(biāo)本 6 上，所以物鏡的視場(chǎng)（標(biāo)本）得到均勻的照明。 （ 2） 柯拉照明 臨界照明中物面光照度不均勻的缺點(diǎn)，在柯拉照明中可以消除。其補(bǔ)救的方法是在光源的前方放置乳白 和吸熱濾色片，使照明變得較為均勻和避免光源的長(zhǎng)時(shí)間的照射而損傷被檢物體。若忽略光能的損失，則光源像的亮度與光源本身相同，因此，這種方法相當(dāng)于在物平面上放置光源。 1． 透射式照明 生物顯微鏡多用來(lái)觀察透明標(biāo)本，需要以透射光來(lái)照明。前者適用于透明或半透明的被檢物體，絕大數(shù)生物顯微鏡屬于此類照明法；后者則適用于非透明的被檢物體，光源來(lái)自上方 ，又稱 ””反射式照明 ”。如暗視場(chǎng)聚光鏡，相襯聚光鏡，偏光聚光鏡，微分干涉聚光鏡等，以上聚光鏡分別適用于相應(yīng)的觀察方式。要使視場(chǎng)充滿照明，就需將聚光鏡的上透鏡從光路中搖出。它不適用于 4 X以下的低倍物鏡，否則照明光源不能充滿整個(gè)視場(chǎng)。 2． 消色差聚光鏡 (Achromatic aplanatic condenser ) 這種聚光鏡又名 ”消球差聚光鏡 ”和 ”齊明聚光鏡 ”，它由一系列透鏡組成，它對(duì)色差球差的校正程度很高，能得到理想的圖像，是明場(chǎng)鏡檢中質(zhì)量最高的一種聚光鏡，其 NA值達(dá) 。阿貝聚光鏡由兩片透鏡組成，有較好的聚光能力，但是在物鏡數(shù)值孔徑高于 時(shí)，則色差，球 差就顯示出來(lái)。 聚光鏡的的結(jié)構(gòu)有多種，同時(shí)根據(jù)物鏡數(shù)值孔徑的大小，相應(yīng)地對(duì)聚光鏡的要求也不同 。小型的顯微鏡往往無(wú)聚光鏡，在使用數(shù)值孔徑 以上的物鏡時(shí)，則必須具有聚光鏡。因此，對(duì)于物鏡不能分辨出的結(jié)構(gòu)，目鏡放的再大，也仍然不能分辨出。 （五） 目鏡 目鏡的作用是把物鏡放大的實(shí)像（中間像）再放大一級(jí)，并把物像映入觀察者的眼中，實(shí)質(zhì)上目鏡就是一個(gè)放大鏡。這種物鏡的外殼上常標(biāo)刻 NC，同時(shí)在蓋玻片厚度的位置上沒有 的字樣，而標(biāo)刻著 ”0”。 (c) 相襯物鏡（ Phase contrast objective） 這種物鏡是由于相襯鏡檢術(shù)的專用物鏡，其特點(diǎn)是在物鏡的后焦平面處裝有相板。 (b) 帶虹彩光闌的物鏡（ Iris diaphragm objective） 在物鏡鏡筒內(nèi)的上部裝有虹彩光闌，外方也可以旋轉(zhuǎn)的調(diào)節(jié)環(huán)，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)可調(diào)節(jié) 光闌孔徑的大小，這種結(jié)構(gòu)的物鏡是高級(jí)的油浸物鏡，它的作用是在暗視場(chǎng)鏡檢時(shí)，往往由于某些原因而使照明光線進(jìn)入物鏡，使視場(chǎng)背景不夠黑暗，造成鏡檢質(zhì)量的下降。主要有以下幾種： (a) 帶校正環(huán)物鏡（ Correction collar objective） 在物鏡的中部裝有環(huán)裝的調(diào)節(jié)環(huán)，當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)環(huán)時(shí)，可調(diào)節(jié)物鏡內(nèi)透鏡組之間的距離，從而校正由蓋玻片厚度不標(biāo)準(zhǔn)引起的覆蓋差。若系統(tǒng)的校正滿意，孔徑達(dá)到 NA=時(shí)，中心遮蔽可不超過(guò)入瞳面積的 4%。在新型折反射系統(tǒng)中，由于采用半透明反射鏡以及物鏡的膠合結(jié)構(gòu)，使這一缺點(diǎn)大為減輕，從而可以取消反射鏡框的遮光。這類物鏡均制成反射式與折反射式系統(tǒng)。 e. 單色物鏡 這類物鏡由石英、熒石或氟化鋰制的一組單片透鏡構(gòu) 成。對(duì)于平視場(chǎng)消色差物鏡，其倍率色差不大，不必用特殊目鏡補(bǔ)償。 d. 平視場(chǎng)物鏡（ Plan objective ） 平場(chǎng)物鏡是在物鏡的透鏡系統(tǒng)中增加一快半月形的厚透鏡，以達(dá)到校正場(chǎng)曲的缺陷，提高視場(chǎng)邊緣成像質(zhì)量的目的。 c. 半復(fù)消色差物鏡（ Semi apochromatic objective） 半復(fù)消色差物鏡又稱氟石物鏡 ，物鏡的外殼上標(biāo)有 ”FL”字樣。 由于對(duì)各種像差的校正極為完善，比響應(yīng)倍率的消色差物鏡有更大的數(shù)值孔徑，這樣不僅分辨率高，像質(zhì)量?jī)?yōu)而且也有更高的有效放大率。它對(duì)兩個(gè)色光實(shí)現(xiàn)了正弦條件，要求嚴(yán)格地校正軸上點(diǎn)的位置色差（紅，藍(lán)二色）、球差（紅，藍(lán)二色）和正弦差，同時(shí)要求校正二級(jí)光譜（再校正綠光的位置色差）。高倍消色差物鏡一般均為浸式，由四部分構(gòu)成：前片透鏡、新月形透鏡及兩個(gè)雙膠透鏡組。當(dāng)數(shù)值孔徑增大到 時(shí)，再加入一平凸透鏡，該平凸透鏡決定著物鏡的焦距，而其它透鏡則補(bǔ)償由其平面與球面產(chǎn)生的像差。數(shù)值孔徑為 ~ 的低倍消色差物鏡一般由兩片透鏡膠合在一起的雙膠物鏡構(gòu)成。它校正了軸上點(diǎn)的位置色差（紅，藍(lán)二色）、球差（黃綠光）和正弦差，保持了齊明條件。 （ 5） 按校正像差的情況不同，通常分為消色差物鏡，半復(fù)消色差物鏡，復(fù)消色差物鏡，平視場(chǎng)消色差物鏡，平視場(chǎng)復(fù)消色差物鏡和單色物鏡。 （ 3） 按光學(xué)裝置：透射式、反射式以及 折反射式。 2． 物鏡的基本類型 （ 1） 按顯微鏡鏡筒長(zhǎng)度（以 mm計(jì)）：透射光用 160鏡筒，帶 厚或更厚的蓋玻片；反射光用 190 鏡筒，不帶蓋玻片；透射光與反射光用鏡筒，筒長(zhǎng)無(wú)限大。 有一種所謂筒長(zhǎng)無(wú)限的顯微物鏡，這種物鏡的后方一般帶有輔助物鏡 （也叫補(bǔ)償物鏡或鏡筒物鏡），被觀察物體位于物鏡前焦點(diǎn)上，經(jīng)過(guò)物鏡以后，成像在無(wú)限遠(yuǎn)，再經(jīng)過(guò)輔助物鏡成像在輔助物鏡的焦平面上，如圖 4所示。我國(guó)規(guī)定機(jī)械筒長(zhǎng)是 160 毫米。 1． 物鏡的主要參數(shù) （ 1） 放大率β （ 2） 數(shù)值孔徑 NA （ 3） 機(jī)械筒長(zhǎng) L：在顯微鏡中，物鏡支承面到目鏡支承面之間的距離稱為機(jī)械筒長(zhǎng)。這意味著：就軸上的一對(duì)共軛點(diǎn)而言，消除了球差并且實(shí)現(xiàn)了正弦條件時(shí)，每一物鏡僅有兩個(gè)這種消球差點(diǎn)。 與寬光束有關(guān)的像差是球差、慧差以及位置色差；與視場(chǎng)有關(guān)的像差是像散、場(chǎng)曲、畸變以及倍率包差。物鏡是顯微鏡最復(fù)雜和最重要的部分，在寬光束中工作 (孔徑大 )，但這些光束與光軸的傾角較小 (視場(chǎng)小 )；目鏡在窄光束中工作，但其傾角大（視場(chǎng)大）。但繼續(xù)增大顯微物鏡視場(chǎng)與提高視場(chǎng)邊緣成像質(zhì)量的可能性仍然存在，這種研究工作，至今仍在進(jìn)行。齊焦性能的優(yōu)劣和合軸程度的高低是顯微鏡質(zhì)量的一個(gè)重要標(biāo)志，它是與物鏡的本身質(zhì)量和物鏡轉(zhuǎn)換器的精度有關(guān)。物鏡有許多具體的要求，如合軸 ,齊焦。 （四） 物鏡 物鏡是顯微鏡最重要的光學(xué)部件， 利用光線使被檢物體第一次成像，因而直接關(guān)系和影響成像的質(zhì)量和各項(xiàng)光學(xué)技術(shù)參數(shù)，是衡量一臺(tái)顯微鏡質(zhì)量的首要標(biāo)準(zhǔn)。 在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下，工作距離短孔徑角則大。鏡檢時(shí)，被檢物體應(yīng)處在物鏡的一倍至二倍焦距之間。物鏡外殼上標(biāo)的 ，即表明該物鏡所要求的蓋玻片的厚度。覆蓋差的產(chǎn)生影響了顯微鏡的成響質(zhì)量。目前顯微鏡最大視場(chǎng)數(shù)是 OLYMPUS的 6． 覆蓋差 顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)也包括蓋玻片在內(nèi)。 北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話： 01082895262 傳真： 01082895263 5 （ 2） 增大物鏡的倍數(shù)，則視場(chǎng)直徑減小。 有公式 F=FN/β 式中 F: 視場(chǎng)直徑， FN：視場(chǎng)數(shù)（ Field Number, 簡(jiǎn)寫為 FN，標(biāo)刻在目鏡的鏡筒外側(cè)），β :物鏡放大率。 視場(chǎng)直徑也稱視