20xx年醫(yī)學(xué)專題—第十四章免疫細(xì)胞的分離與檢測(cè)(參考版)
2024-11-16 00:58本頁面
【正文】 ,。腹腔滲出法分離腹腔巨噬細(xì)胞。（CD2/LFA2/E受體）。)單核細(xì)胞具有黏附作用而去除（培養(yǎng)。0.001的密度分離液。檢測(cè)免疫細(xì)胞的數(shù)量和功能，觀察機(jī)體免疫狀態(tài)。ir243。,Thanks,第九十四頁，共九十五頁。 x236。d236。n)試驗(yàn) EA花環(huán)試驗(yàn) EAC花環(huán)試驗(yàn) 流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù),第九十二頁，共九十五頁。 x236。bāo),外周血,1. 淋巴細(xì)胞的分離,第九十一頁，共九十五頁。l243。,小 結(jié),FicollHypaque,PBMC,T細(xì)胞(x236。,巨噬細(xì)胞產(chǎn)生(chǎnshēng)細(xì)胞因子的檢測(cè),中國生化(shēnɡ hu224。 pi224。omǔ)細(xì)胞,＋,孵育(fū y249。qīng)實(shí)驗(yàn) 吞噬功能檢測(cè) 巨噬細(xì)胞溶酶體酶的測(cè)定 細(xì)胞毒作用測(cè)定 巨噬細(xì)胞促凝血活性測(cè)定 巨噬細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子的檢測(cè),第八十八頁，共九十五頁。,巨噬細(xì)胞功能(gōngn233。,中性粒細(xì)胞吞噬功能(gōngn233。is232。ng)粒細(xì)胞吞噬功能測(cè)定,中性(zhōngx236。ng)粒細(xì)胞趨化功能檢測(cè) －－Boden 小室法,Boyden Chamber,Shi et al. J Immunol Methods, 1993, 164: 149,第八十五頁，共九十五頁。ng)粒細(xì)胞趨化功能檢測(cè) －－瓊脂糖平板法,第八十四頁，共九十五頁。ng)檢測(cè),第八十三頁，共九十五頁。,趨化功能(gōngn233。ng)測(cè)定,中性(zhōngx236。ngtǐ)形成細(xì)胞,第八十一頁，共九十五頁。,Indirect assay for IgGsecreting plasma cells (secondary response),第八十頁，共九十五頁。bāo)功能檢測(cè),第七十八頁，共九十五頁。y224。,Cytotoxicity Assays (51Cr release),第七十七頁，共九十五頁。f224。,CTL介導(dǎo)細(xì)胞毒作用的檢測(cè)(jiǎn c232。bāo)毒試驗(yàn),CTL殺傷(shāshāng)靶細(xì)胞的機(jī)制,通過(tōnggu242。,T細(xì)胞(x236。)染色法,第七十三頁，共九十五頁。當(dāng)細(xì)胞分裂時(shí)，CFSE平均分配到子細(xì)胞中，使熒光量減半，再采用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞增殖活性。,CFSE的前體（CFDSE）可進(jìn)入細(xì)胞，降解(ji224。,Sitmulated by mitogen or antigen,48h,3HTdR,Count CPM,3HTdR摻入法,第七十一頁，共九十五頁。)的淋巴母細(xì)胞,轉(zhuǎn)化率（％）,＝,轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。,未轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。bāo)涂片染色,顯微鏡檢查(jiǎnch225。,形態(tài)學(xué)法,PBMC,PHA/ConA,5％CO2 、 37℃培養(yǎng)(p233。bāo)增殖試驗(yàn),形態(tài)學(xué)法 3HTdR摻入法 MTT比色法 CFSE標(biāo)記(biāoj236。n) CTL介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn) T細(xì)胞分泌功能檢測(cè) 檢測(cè)T細(xì)胞功能的體內(nèi)試驗(yàn),第六十七頁，共九十五頁。bāo)功能檢測(cè)試驗(yàn),T細(xì)胞增殖試驗(yàn)(sh236。bāo)的功能,第六十六頁，共九十五頁。,一、T細(xì)胞功能(gōngn233。ng)檢測(cè),T細(xì)胞功能檢測(cè)(jiǎn c232。ng)類型,第六十四頁，共九十五頁。,小鼠紅細(xì)胞受體： 慢性B細(xì)胞白血病 方法簡(jiǎn)單，鑒定(ji224。,＋,B cell,B cell,EAC花環(huán)(huā hu225。ngch233。bāo)數(shù)量檢測(cè),第六十一頁，共九十五頁。,1. mIg的檢測(cè): 酶免疫法、熒光免疫法 2. CD抗原檢測(cè) 酶免疫組織化學(xué)法 間接(ji224。i)的新技術(shù) 與FCM聯(lián)合, 定量檢測(cè)抗原特異性T淋巴細(xì)胞,第五十九頁，共九十五頁。ngyu225。)—抗體致敏細(xì)胞花環(huán)法,SRBCantiCDT細(xì)胞（CD分子）,第五十八頁，共九十五頁。)—葡萄球菌花環(huán)法,4. 花環(huán)技術(shù)(j236。,SPAIgG（antiCD）CD分子(fēnzǐ)T細(xì)胞亞群,4. 花環(huán)技術(shù)(j236。)，60%－80％ 活性花環(huán)形成率（Ea）： 室溫低速短時(shí)離心，20－40％,E受體: CD2，表達(dá)(biǎod225。n
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