【正文】 。,單核細(xì)胞的去除(q249。,將PBMC加在分離液上低速(dī s249。ng)棉裝入5ml注射器中,加入(jiār249。nlǐ)： 將抗體交聯(lián)于磁珠表面形成免疫磁珠 （Immunomagnetic bead，IMB）,加入細(xì)胞懸液，IMB上的Ab與細(xì)胞表面的Ag反應(yīng)(fǎny236。bāo)分選儀,第三十四頁，共九十五頁。yǒu)高速、 高純度、高精度優(yōu)勢。,斑蟊敷貼(fū tiē)法分離人巨噬細(xì)胞,20世紀(jì)70年代(ni225。bāo)活力檢測,細(xì)胞活力：指細(xì)胞存活的數(shù)量，一般用百分表示。,1. 間接熒光(y237?！▂232。,EA花環(huán)形成(x237。y224。nɡ jiě)后形成CFSE，在一定波長的光激發(fā)下可發(fā)出熒光。n) 溶血空斑試驗(yàn) ELISPOT檢測抗體分泌細(xì)胞 抗體的檢測,B細(xì)胞(x236。,中性(zhōngx236。)藥物雜志，2002，23（2）：67 69,第九十頁，共九十五頁。,內(nèi)容(n232。4. 花環(huán)技術(shù)—E花環(huán),第九十五頁，共九十五頁。ng) T淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn) CTL介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用 溶血空斑試驗(yàn) ELISPOT檢測抗體分泌細(xì)胞,5. 吞噬細(xì)胞(tūn sh236。),涂片(t,中性(zhōngx236。ng)法 細(xì)胞凋亡檢測法 （1）形態(tài)學(xué)檢測法 （2）DNA Ladder （3）ELISA （4）Flow cytomery,第七十六頁，共九十五頁。)的淋巴細(xì)胞數(shù),計(jì)數(shù)的淋巴細(xì)胞總數(shù),X100％,第七十頁，共九十五頁。ng)檢測,Produce cytokines Cytotoxic action Mediate DTH,T細(xì)胞(x236。,第六十頁，共九十五頁。n),淋巴細(xì)胞,抗CD分子(fēnzǐ)單抗 補(bǔ)體,＋,伊紅染色(rǎns232。li224。)中性粒細(xì)胞,第四十六頁，共九十五頁。 x236。),經(jīng)典方法： 離心 粘附(zhān f249。,免 疫 磁 珠 細(xì) 胞 分 選 裝 置,特點(diǎn): 簡便, 快速(ku224。,第二十六頁，共九十五頁。,尼龍(n237。,Percoll分層液法,Percoll分層液：經(jīng)聚乙烯吡咯烷酮處理過的硅膠顆?；鞈乙?，對(duì)細(xì)胞(x236。 chj236。),細(xì)胞密度不同，沉降速度不一樣(yīy224。z224。ng) 淋巴結(jié) 胸腺 骨髓,第三頁，共九十五頁。ng)。)：Ficoll－Hypaque,Ficoll：聚蔗糖(zh232。)：低滲0.83％NH4Cl處理,（二）血小板的去除(q249。bāo)無毒、無刺激。l243。,親和板分離法,第二十七頁，共九十五頁。i s249。)法 補(bǔ)體細(xì)胞毒法 淘洗法 免疫磁珠法,經(jīng)典分離(fēnl237。 bāo)種類,大吞噬細(xì)胞(tūn sh236。,外周血中性(zhōngx236。ng)檢測,（二）根據(jù)T細(xì)胞受體檢測 可溶性抗原(k224。),細(xì)胞著色,第五十六頁，共九十五頁。,1. mIg的檢測: 酶免疫法、熒光免疫法 2. CD抗原檢測 酶免疫組織化學(xué)法 間接(ji224。bāo)的功能,第六十六頁，共九十五頁。,Sitmulated by mitogen or antigen,48h,3HTdR,Count CPM,3HTdR摻入法,第七十一頁，共九十五頁。,Cytotoxicity Assays (51Cr release),第七十七頁，共九十五頁。ng)粒細(xì)胞趨化功能檢測 －－瓊脂糖平板法,第八十四頁，共九十五頁。 pi224。 x236。,。,Thanks,第九十四頁，共九十五頁。,巨噬細(xì)胞產(chǎn)生(chǎnshēng)細(xì)胞因子的檢測,中國生化(shēnɡ hu224。ng)粒細(xì)胞趨化功能檢測 －－Boden 小室法,Boyden Chamber,Shi et al. J Immunol Methods, 1993, 164: 149,第八十五頁，共九十五頁。y224。,CFSE的前體（CFDSE）可進(jìn)入細(xì)胞，降解(ji224。bāo)功能檢測試驗(yàn),T細(xì)胞增殖試驗(yàn)(sh236。bāo)數(shù)量檢測,第六十一頁，共九十五頁。n)技術(shù)—E花環(huán),總花環(huán)形成率（Et）： 4℃過夜(gu242。n)肽M