【正文】 2012年醫(yī)學檢驗血液檢驗復習指導：紅細胞膜的結構與功能：紅細胞膜含脂類40%，蛋白質50。當紅細胞膜蛋白及膜脂質有缺陷時，導致紅細胞懸液的吸光度降至50%的時間（AGLT50）明顯縮短。2012年醫(yī)學檢驗血液檢驗復習指導：酸化甘油溶血試驗（1）原理：當甘油存在于低滲溶液氯化鈉磷酸緩沖液時，可阻止其中的水快速進入紅細胞內，使溶血過程緩慢。③抗原性質的分析，受檢的抗原性質可能完全相同、部分相同、完全不同，沉淀弧可分別出現(xiàn)完全融合、部分融合、不融合三種情況；④抗體效價的滴定。由于慢者擴散圈小，局部濃度較大，形成沉淀線彎向分子量大的一方。②抗原、抗體相對分子量的分析；抗原或抗體在瓊脂內自由擴散，其速度受分子量影響。根據沉淀線的位置可作如下分析：①抗原、抗體是否存在及其相對含量。平板法：是在瓊脂板上相距3～5mm打一對孔，或者梅花孔、雙排孔、三角孔等。雙向擴散試驗也分為試管法和平板法。（4）注意雙環(huán)現(xiàn)象（出現(xiàn)了兩種抗原性相同成分）。（2）每次測定都必須作標準曲線。平板法：%瓊脂糖內，未凝固前傾注成平板，然后在上打孔，將抗原加入孔中，放37℃讓其自由擴散，24～48h后可見孔周圍出現(xiàn)沉淀環(huán)，測定環(huán)的直徑或面積計算標本中待測抗原的濃度。2012年醫(yī)學檢驗免疫檢驗考試輔導：單向擴散試驗單向擴散試驗：瓊脂內混入抗體，待測抗原從局部向瓊脂內自由擴散，如抗原和相應抗體結合，則形成沉淀環(huán)。白細胞計數(shù)及分類一般正常。輕度貧血時紅細胞形態(tài)無明顯異常，中度以上貧血時紅細胞體積減小，中心淡染區(qū)擴大，嚴重時紅細胞可呈環(huán)狀，并有嗜多色性紅細胞及點彩紅細胞增多。（3）一種細胞可產生多種細胞因子，不同類型的細胞可產生一種或幾種相同的細胞因子。2012年醫(yī)學檢驗免疫檢驗考試輔導：細胞因子共同特性（1）化學性質大都為糖蛋白。2012年醫(yī)學檢驗免疫檢驗考試輔導：細胞因子的類型細胞因子分類按其作用大致可分為免疫調節(jié)因子和免疫調控因子兩大類。將選擇培養(yǎng)基或鑒別培養(yǎng)基上的可疑菌落分別接種克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）和尿素靛基質動力（MIU）復合培養(yǎng)基管中，并根據其六項反應結果，將細菌初步定屬。大腸埃希菌俗稱大腸桿菌，大多數(shù)菌株是人類和動物腸道正常菌群。2012年醫(yī)學檢驗臨床檢驗技師考試綜合輔導資料：埃希菌屬的概念埃希菌屬包括5個種，即大腸埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫爾曼埃希菌和傷口埃希菌。嚴重者可發(fā)展為急性腎衰竭。（4）腸出血型大腸埃希菌（EHEC）：又稱產志賀樣毒素（VT）大腸埃希菌（SLTEC或UTEC），其中O157：H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征（HUS）。（2）腸致病型大腸埃希菌（EPEC）：主要引起嬰兒腹瀉。2012年醫(yī)學檢驗知識輔導：埃希菌屬的腸道感染埃希菌屬的腸道感染：致病性大腸埃希菌有下列五個病原群。2012年醫(yī)學檢驗知識輔導：埃希菌屬的常規(guī)檢驗項目CDC將大腸埃希氏菌O157：H7列為常規(guī)檢測項目EHEC的血清型》50種，最具代表性的是O157：，O157：H7占腸道分離病原菌的第二或第三位，是從血便中分離到的最常見的病原菌，分離率占血便的40%，8三個月O157：H7感染的發(fā)生率最高。結果：陰性，無鐮變細胞。動物實驗和臨床經驗表明，TNF對某些腫瘤具有明顯的抑制作用，但副作用大，建立合理的用藥方案及治療措施，可望降低用量，減輕副作用，達到最佳治療效果。2012年醫(yī)學檢驗免疫檢驗考試輔導：腫瘤壞死因子的生物效應腫瘤壞死因子的生物效應：TNF對多種腫瘤細胞均有殺傷或抑制作用，敏感性因腫瘤細胞類型而異；TNF呈劑量依賴性地抑制病毒介導的細胞病變的發(fā)展，對RNA病毒和DNA病毒均有抑制作用；TNF能夠增強T細胞產生以IL2為主的淋巴因子，提高IL2R的表達水平，促進T細胞增殖；還能促進B細胞增殖、分化和產生抗體；TNF有中性粒細胞和單核細胞趨化作用，并使之活化和脫顆粒，釋放炎癥介質；TNF可刺激成骨細胞內的堿性磷酸酶活性，誘導成骨細胞吸收骨質、使軟骨細胞進行軟骨更新，抑制軟骨形成。（4）鹽類結晶及酸堿度：生理性尿混濁的主要原因是含有較多的鹽類，常見有：①尿酸鹽結晶：在濃縮的酸性尿遇冷時，可有淡紅色結晶析出。（2）飲水及尿量：大量飲水、尿量多則尿色淡；尿色深見于尿量少、飲水少或運動、出汗、水分丟失。臨床應用僅作參考2012年醫(yī)學檢驗基礎知識輔導：尿的質量控制，鹽類結晶析出、尿膽原轉變?yōu)槟蚰懰亍⒓毦鲋澈透瘮?、尿素分解，均可使尿顏色加深、混濁度增高?012年醫(yī)學檢驗基礎知識輔導：尿的方法學評價尿色和透明度判斷，受主觀因素影響。膽汁淤積性肝硬化ALT活性較高可與黃疸平行，AST升高不及ALT顯著。①液相酶免疫測定：其測定靈敏度與放射免疫方法相近，近年有取代放射免疫方法的趨勢。②克隆酶供體免疫分析：DNA重組技術可分別合成某種功能酶（如βD半乳糖苷酶）分子的兩個片段，大片段稱為酶受體（EA），小分子稱作酶供體（ED），兩者單獨均無酶活性，一定條件下結合形成四聚體方具酶活性。2012年醫(yī)學檢驗考試綜合知識輔導：均相酶免疫測定均相酶免疫測定：屬于競爭結合分析方法。（2）油鏡：選擇滿意的片膜段，觀察200～500個細胞，按細胞的種類、發(fā)育階段分別計算，并計算它們各自的百分率；仔細觀察各系統(tǒng)的增生程度和各階段細胞數(shù)量和質量的變化。髂骨后上棘此處骨皮質薄，骨髓腔大，進針容易，骨髓液豐富，被血液稀釋的可能性小，故為臨床上首選的穿刺部位。骨髓穿刺部位選擇一般要從以下幾個方面考慮：①骨髓腔中紅骨髓豐富；②穿刺部位應淺表、易定位；③應避開重要臟器。此法不僅可作為一個光化學分析方法獨立使用，而且可作為一個有特色的光檢測器，與氣相色譜儀聯(lián)用，或作為一種試樣原子化裝置，用于原子吸收光譜法中。2012年醫(yī)學檢驗考試生化檢驗輔導：火焰分光光度法的應用火焰分光光度法主要用于堿金屬和堿土金屬元素的定量分析。由于當時使用照相方法記錄譜線，致使準確定量分析工作較為繁瑣。2012年醫(yī)學檢驗考試生化檢驗輔導：火焰分光光度法的簡史，就是火焰分光光度法的起源，用此法發(fā)現(xiàn)了許多新元素。不同的燃料氣體和助燃氣組分，及其配比，稱助/燃比，決定該化學火焰能達到的最高溫度和化學作用性質（見表）。反射鏡起聚光作用。2012年醫(yī)學檢驗考試生化檢驗輔導：火焰分光光度法的儀器原始的火焰光度計由霧化器、火焰燃燒嘴、濾光片和光電池檢測器組成。雖非常敏感，但影響因素多，顯色不穩(wěn)定，重復性也較差，不能用于常規(guī)檢驗。磷鉬酸法是血清中無機磷與鉬酸鹽結合形成磷鉬酸化合物，再用還原劑將其還原成鉬藍進行比色測定。試驗也證明5個小時以后，使用vc的病人每毫升尿含vc幾十毫克，已經屬于正常值，不再干擾檢驗結果。叢玉隆說，假如一個糖尿病人，沒吃vc以前的尿糖是2個加號，吃了9片vc后，就可能是1個加號，甚至會出現(xiàn)陰性結果。一組人一天吃6片vc，第二天尿含vc90毫克。叢玉隆再仔細檢查后，發(fā)現(xiàn)在抽取病人血樣時，患者正輸著vc，結果終于弄明白了，原來是患者血樣中含有的大量vc還原了檢驗試劑中的酶，干擾了病人的血糖檢驗結果。急診醫(yī)生一看檢驗報告馬上產生疑問：怎么會是8毫克？人的正常血糖最低是80毫克，如果真是8毫克，那這個人早就死了。第一次遇到尿糖檢測失真是在1984年，叢玉隆還是醫(yī)院檢驗科的檢驗員。若不能立即測定，應將血氣標本保存在2～8℃容器內，但即使這樣待測時間也不宜超過2小時。未充分動脈化的毛細管血的PO2偏低，對PH、PCO2和HCO3—的測定結果影響不明顯。因技術條件限制，不能反復動脈穿刺時，早產兒與小嬰兒可在足后跟用肝素化毛細管采取動脈化毛細血管的血亦可。二、采血方法的選擇成人：用肝素化的玻璃注射器或一次性注射器穿刺，采血部位首選橈動脈，次選股動脈小兒：首選用顳淺動脈或頭皮小動脈，嚴格消毒后，用肝素化的5號頭皮針連接2ml注射器，待動脈血流至注射器乳頭時，立即用小止血鉗分別夾住頭皮針塑料軟管首尾兩端（），然后拔出針頭立即混勻送檢。每抽血氣前，用2ml注射器抽取肝素稀釋液2ml，完全濕潤整個針管后棄去肝素液，殘留在針頭及針管頭部死腔內的肝素液即可起到抗凝作用。根據被分離物質的浮力密度差別進行分離，所用的介質起始密度約等于被分離物質的密度，介質在離心過程中形成密度梯度，被分離物質沉降或上浮到達與之密度相等的介質區(qū)域中停留并形成區(qū)帶。需要離心分離的樣品可和梯度介質先均勻混合，離心開始后，梯度介質由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時，可以帶動原來混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布，到達與其自身密度相等的梯度層里，即達到等密度的位置而獲得分離。3）自成梯度等密度離心法。要求在離心前預先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質，常用介質有蔗糖、CsCl、Cs2SO4等，待分離樣品一般鋪在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調節(jié)樣品液密度。本法可分離各種細胞、病毒、染色體、脂蛋白、DNA和RNA等生物樣品。離心前，離心管內先裝入分離介質（如蔗糖、甘油等），使形成連續(xù)的或不連續(xù)的密度梯度介質，然后加入樣品進行離心，具體又可分為：1）速度區(qū)帶離心法。通過逐步增加相對離心力，使一個非均相混合液內形狀不同的大小顆粒分步沉淀。常用的離心機有多種類型，一般低速離心機的最高轉速不超過6000rpm，高速離心機在25000rpm以下，超速離心機的最高速度達30000rpm以上。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態(tài)的細胞、細胞器、病毒和生物大分子等。根據被分離物質的浮力密度差別進行分離，所用的介質起始密度約等于被分離物質的密度，介質在離心過程中形成密度梯度，被分離物質沉降或上浮到達與之密度相等的介質區(qū)域中停留并形成區(qū)帶。需要離心分離的樣品可和梯度介質先均勻混合，離心開始后，梯度介質由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時，可以帶動原來混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布，到達與其自身密度相等的梯度層里，即達到等密度的位置而獲得分離。3）自成梯度等密度離心法。要求在離心前預先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質，常用介質有蔗糖、CsCl、Cs2SO4等，待分離樣品一般鋪在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調節(jié)樣品液密度。本法可分離各種細胞、病毒、染色體、脂蛋白、DNA和RNA等生物樣品。離心前，離心管內先裝入分離介質（如蔗糖、甘油等），使形成連續(xù)的或不連續(xù)的密度梯度介質，然后加入樣品進行離心，具體又可分為：1）速度區(qū)帶離心法。通過逐步增加相對離心力，使一個非均相混合液內形狀不同的大小顆粒分步沉淀。常用的離心機有多種類型，一般低速離心機的最高轉速不超過6000rpm，高速離心機在25000rpm以下，超速離心機的最高速度達30000rpm以上。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態(tài)的細胞、細胞器、病毒和生物大分子等。兩類離心機由于用途不同，故其主要結構也有差異。離心機的種類很多，按照使用目的，可兩類，即制備型離心機和分析型離心機。血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝解毒中起重要作用，如SeO3，硒等。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。2012年醫(yī)學檢驗考試免疫檢驗輔導：血漿的主要作用提供基本營養(yǎng)物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。將新鮮血液離心，使血細胞沉降，上層淡黃色清液即是血漿。人體含有27503300毫升血漿，約占血液總體積的55%.血漿的絕大部分是水（體積的90%），其中溶解的物質主要是血漿蛋白，還包括葡萄糖、無機鹽離子、激素以及二氧化碳。經三次取樣化驗，結果仍然找不到精子方可確認無精子癥。見不動精子，須染色方可區(qū)分：不活動的精子、死精子、未成熟精子等。因此血常規(guī)手工操作不能丟；2012年醫(yī)學檢驗考試臨檢基礎知識輔導：精液檢查的具備條件受檢者，經歷一段經常排精過程后，禁房事5－7天（上次排精到取標本間隔時間至少不得少于100小時）；備大口有蓋清潔干燥容器一個，以手淫方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標本離體時間；貼身保溫，30分鐘內送到化驗室，并向檢驗員提供標本取出時間。二、復檢內涵尚待統(tǒng)一有人認為“復檢”就是要在鏡下重新進行白細胞分類計數(shù)而己，這是偏面的。最近日本名古屋大學醫(yī)學部附屬醫(yī)院報告，他們用SysmexXE2100（五分類）%.再次證明當前最先進血細胞分析儀也不能完全替代人工檢查。根據1987年我赴日本考察時，日本對三分群儀器白細胞分類是不收費的，而且每一例仍然需要涂片染色，在顯微鏡下重新分類后才能報告。尤其是白細胞形態(tài)學分類與血細胞分析儀的白細胞分類有本質上的不同，三分群僅僅是根據細胞大小來分而己，即使先進的五分類也與形態(tài)學也有很大差異，又如中性粒細胞毒性病變、變異淋巴細胞、瘧原蟲等臨床需要的指標無法顯示；有的幼稚細胞、有核紅細胞也不能區(qū)分；各參數(shù)之間有時還存在互相干擾?，F(xiàn)就此問題談談個人看法。據我所知有的醫(yī)院有了血細胞分析儀，把人工操作的工具、試劑全丟棄，基本上不再復檢了。2012年醫(yī)學檢驗考試臨檢基礎知識輔導：重視血常規(guī)的復檢工作目前血細胞分析儀己經普及到縣醫(yī)院或衛(wèi)生院，這對提高血細胞常規(guī)的準確性和重復性，減輕工作人員勞動強度起促進作用。（二）免疫熒光實驗（IFA）IFA法經濟、簡便、快速，曾被FDA推薦用于WB不確定樣品的診斷。如果出現(xiàn)HIV2型的特異性指示條帶，需用HIV2型免疫印跡試劑再做HIV2的抗體確認試驗，呈陰性反應，報告HIV2抗體陰性；呈陽性反應則報告HIV2抗體血清學陽性，并將樣品送國家參比實驗室進行核酸序列分析，WB的敏感性一般不低于初篩實驗，但它的特異性很高，這主要是基于HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化，能夠檢測針對不同抗原成分的抗體，因而能夠用WB方法鑒別初篩實驗的準確性。確認試驗流程：有HIV1/2混合型和單一的HIV1或HIV2型。2012年醫(yī)學檢驗考試血液檢驗復習輔導：HIV抗體確認實驗免疫印跡