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磷在錳的脅迫下對蠶豆根尖有絲分裂的影響_畢業(yè)設計論文(參考版)

2025-07-09 10:10本頁面
  

【正文】 攀枝花學院本科畢業(yè)設計(論文) 附錄 26 附表二 磷在錳的脅迫下對蠶豆根尖細胞有絲分裂的影響 染色體短片細胞數(shù) 染色體粘連細胞數(shù) 落后染色體細胞數(shù) 染色體橋細胞數(shù) 染色體環(huán)細胞數(shù) 正常分裂細胞數(shù) 鏡檢細胞總數(shù) 1—— 1 18 13 0 0 0 24 1000 1—— 2 4 5 0 0 0 10 1000 1—— 3 9 7 0 0 0 7 1000 1—— 4 1 6 0 0 0 1 1000 1—— 5 13 18 0 0 0 21 1000 2—— 1 4 16 2 0 0 17 1000 2—— 2 9 9 0 0 0 15 1000 2—— 3 5 7 0 0 0 14 1000 2—— 4 3 6 0 1 0 10 1000 2—— 5 11 10 0 0 0 18 1000 3—— 1 6 14 2 0 0 26 1000 3—— 2 12 10 2 0 0 36 1000 3—— 3 3 3 1 1 0 14 1000 3—— 4 3 18 0 0 0 28 1000 3—— 5 5 18 0 0 0 28 1000 4—— 1 8 9 0 0 0 10 1000 4—— 2 1 5 1 0 0 21 1000 4—— 3 16 4 0 1 0 62 1000 4—— 4 1 7 0 0 0 22 1000 4—— 5 1。 攀枝花學院本科畢業(yè)設計(論文) 參考文獻 20 參考文獻 [1] 黃先飛 ,秦樊鑫 ,胡繼偉.重金屬污染與化學形態(tài)研究進展 [J]. 微量元素與健康研究 ,20xx,25(1):4851. [2] 李加宏 ,俞仁培.水-土壤-植物系統(tǒng)中鹽分的遷移和植物耐鹽性研究進展 [J].土壤學進展 ,1995,23(6):920. [3] 李戰(zhàn) ,李坤.重金屬污染的危害與修復 [J].現(xiàn)代農業(yè)科技 ,20xx(16):268270. [4] 劉紅磊 ,尹澄清 ,唐運平.太湖梅梁灣岸邊帶底泥中重金屬的形態(tài)與分布 [J].中國環(huán)境科學 ,20xx,30(3):389394. [5] 耿春女 ,李培軍 ,陳素華 ,等 .菌根生物修復技術在沈撫污水灌區(qū)的應用前景 [J].環(huán)境污染治理技術與設備 ,20xx,3(7):5155. [6] WASAY SA,BARRINGTON S,TOKUNAGA acids for the Insitu remediation of soil spolluted by heavy metals:Soil flushing in columns[J].Water,Air,amp。 (2)重金屬與磷的作用機理的區(qū)分和測評。針對運用磷酸鹽來修復重金屬對土壤污染研究的現(xiàn)狀以及其中存在的問題,并且結合當前國內外在環(huán)境科學以及土壤化學發(fā)展方面的趨勢,一致認為今后在該領域應加強如下方面的研究: (1)磷作為一種重要修復劑的環(huán)境風險的評價與分析。 同時用磷作為修復劑還有一定的 環(huán)境風險。 展望 在本次實驗中只是涉及到了不同濃度的磷對錳的修復能力的研究,但是還未涉及到磷對錳修復機理的研究,同時也沒有涉及相關的時間變量,希望在以后的研究中更多的涉及相關項目和因素的研究。并且在磷濃度高達 13 mmol/L 和低至 ,其修復效果幾乎為零。蠶豆根尖細胞錳中毒后,當有磷的加入后,染色體畸變率都會有所下降。從而判定錳中毒后磷對蠶豆根尖的細胞分裂活動具有抑制和促進的雙重作用。通過細胞分裂指數(shù)可以得出的結論為:在磷濃度為 分裂指數(shù)達到 ‰ 。微核是染色體斷片后或者是染色體濃縮形成的,它是獨立于主細胞核的 微小核體。 染色體橋,是細胞異常分裂和染色體的畸變的又一特征,因為染色體在斷裂后再融和,當兩個染色單體著絲粒分別移向相兩極后,其臂仍然粘連一起,則兩攀枝花學院本科畢業(yè)設計(論文) 結果與分析 17 極之間被拉緊而形成染色體后期橋如圖 (附錄 A 圖十四 )所示。它也是染色體畸變的主要形式之一。二是在有絲分裂的中期已經排列在赤道板上的染色體,不能正常的移向細胞的兩極形成新的子細胞核。染色體斷片少數(shù)發(fā)生在有絲分裂的后期如圖 (附錄 A 圖五 )所示,其中主要為中期斷片如圖 (附錄 A圖六 )所示。不含著絲粒的斷片通常在核分裂時被排出核外,不久即消失,也是與其它染色體發(fā)生融合、易位和插入等的原因 之一 。染色體 斷片 后 含 有著絲粒和 不含著絲粒 的兩種情況 ,其斷裂后的行為是不同的。染色體斷片是染色體畸變的主要形式之一。正常有絲分裂前期細胞如圖 (附錄 A 圖一 )。 蠶豆根尖的細胞染色體畸變的主要形態(tài) 用配置的培養(yǎng)液處理蠶豆的根尖,經過鏡檢后發(fā)現(xiàn)了大量的畸變染色體,其中包括了染色體短片、染色體粘連、落后染色體、染色體環(huán)、染色體橋以及非二極分裂等情況。由此也反應了磷對重金屬錳有一定的修復作用,并且呈現(xiàn)出了明顯的劑量 —— 效應關系,并且在磷濃度為 。 表 磷在錳的脅迫下對蠶豆根尖細胞平均染色體畸 變率( %) 一組 二組 三組 四組 五組 六組 Z1 % Z2 % Z3 % % 磷對重金屬錳的修復作用同樣也是反應的比較明顯,如表 。而且在磷濃度過高或者過低的時候都會抑制細胞的有絲分裂。其中對照一組的平均分裂指數(shù)為 ‰ ,實驗二至六組分別用 13mmol/L、 、 、 、 L 的磷修復后,隨著磷濃度的逐漸降低,平均分裂指數(shù)從 ‰ 、 ‰ 、 ‰ 、‰ 至 ‰ 呈現(xiàn)除了先增后減的趨勢,并且在磷濃度為 高位 ‰ 。仍然是隨磷濃度的遞減呈現(xiàn)出一種先減后增的趨勢,攀枝花學院本科畢業(yè)設計(論文) 結果與分析 15 同樣在磷濃度為 % 。 本次實驗從表中數(shù)據(jù)也可以直接 看出,染色體畸變的形態(tài)仍然主要以染色體斷片、染色體粘連與落后染色體出現(xiàn),而以染色體粘連更為明顯。本次實驗在磷濃度為 13mmol/L、 ‰、 ‰都明顯高于對照組的 ‰,而在磷濃度為 、 ,其有絲分裂指數(shù)與對照組較為接近。而染色體畸變率比對照組搞了 %。從實驗二組到六組,隨著磷濃度的逐漸從 13mmol/L、 、 、 ,其中染色體畸變率任然呈現(xiàn)一種先減小后增大的趨勢,并且也是在磷濃度為 ,修復作用最強,染色體畸變率減小至 %。 攀枝花學院本科畢業(yè)設計(論文) 結果與分析 14 本次實驗染色體畸變的形態(tài)同樣主要是染色體斷片和染色體粘連,而落后染色體次之。由表 三 可知,本次水平實驗在磷濃度為 到 ‰,而在磷濃度為 ‰ ,比上一組略低一些。表明不是磷濃度越高修復越好。實驗三組磷濃度為 ,此時染色體畸變率為 % ,反而比實驗四組的修復效果差了些;實驗二組磷濃度為 13mmol/L,此時染色體畸變率為 % ,此磷濃度下的修復效果比實驗三組還差。當實驗三組用 修復時,隨著磷濃度的增加,其染色體畸變率也下降到 % 。 表 —— 效應關系,其中實驗四組所用磷的修復濃度為 ,此時為修復效果最好的,其中染色體畸變率已經下降至 % ,同時此時的有絲分裂指數(shù)達到了 ‰ ,均高于其他 5個組。對照一組用蒸餾水做對照,在 2mmol/LMnCl2溶液的處理下,有絲分裂指數(shù)為 ‰ ,而此時的染色體畸變率為 % ,已經有半數(shù)的有絲分裂細胞發(fā)生了染色體畸變,表明在此濃度下其染毒效果較好,并且比較容易觀察比較。同時還要進行一些實驗步驟的錄像,記錄實驗的操作過程。 照相 本實驗拍照分為實驗過程拍照和顯微拍照。 1 號液 (ml) 20 20 __ __ __ __ __ __ __ __ __ __ 2 號液 (ml) __ __ 20 20 __ __ __ __ __ __ __ __ 3 號液 (ml) __ __ __ __ 20 20 __ __ __ __ __ __ 4 號液 (ml) __ __ __ __ __ __ 20 20 __ __ __ __ 5 號液 (ml) __ __ __ __ __ __ __ __ 20 20 __ __ 6 號液 (ml) 20 20 鏡檢計數(shù) 將已經制好的裝片于顯微鏡下鏡檢計數(shù),首先在 40倍鏡下找到視眼,在 100倍鏡下找到著色均勻,細胞分散均勻,且細胞多數(shù)為正方形或者圓形同時有較多分裂象的視眼。 5 539。 3 339。 表 實驗處理以及分組 一組 二組 三組 四組 五組 六組 1 139。 染色 取已經解離根尖先用蒸餾水浸洗兩次,每次用 10ml 蒸餾水浸洗 5min,然后取出根尖切取分生區(qū)部位 — 1mm 左右于載玻片上滴 3— 5滴染液染色 40—50min。 固定 將已經染毒 24h 的 6組蠶豆根尖截取 1cm 左右于 6個小燒杯中用 20ml 蒸餾水浸洗 5min 后,在用蒸餾水沖洗一次后于 6個已經編號為 6的塑料杯中進行固定,每個塑料杯加 10ml 現(xiàn)配固定液,最后蓋上蓋子在室溫條件下固定 5— 9h后分,用 95%乙醇浸洗 10min后轉入 70%乙醇中保存?zhèn)溆?。? 6號燒杯中的稀釋液分別量取 20ml 于 6號燒杯中,最后在 6號燒杯中分別加入 20ml4mmol/L 的 MnCl2溶液配制成所需培養(yǎng)液。 催芽 于醫(yī)用托盤上先鋪蓋兩層醫(yī)用脫脂棉,然后用 150ml蒸餾水使其浸濕,在整齊擺放已吸脹蠶豆于醫(yī)用脫脂棉上,最后蓋上一層醫(yī)用脫脂棉保濕,并在 24℃培養(yǎng)箱中催芽 42h待根長長至 — 2cm左右,且 24h 后補充水分 100ml。 攀枝花學院本科畢業(yè)設計(論文) 實驗方案與過程 9 實驗過程 浸種 選取蠶 豆顆粒飽滿,大小形狀幾乎一致的蠶豆 70粒用 %的 NaClO 溶液200ml 浸洗 10min。 6 號為分別用 13mmol/L、 、 、 液共同處理的實驗組。 實驗材料 攀枝花當年產 蠶豆 實驗方法 在本次實驗中設置一個對照組, 5 個試驗組。 染液的配制:依次如下配制 A 液、 B 液、 C 液,最后才配成染液。 最后轉入試劑瓶保存?zhèn)溆谩? 100ml26mmol/LKH2PO4溶液的配制:首先稱取 100ml小燒杯中。 儀器:醫(yī)用托盤、培養(yǎng)皿、電熱恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、水浴鍋、醫(yī)用脫脂棉、普通光學顯微鏡、數(shù)碼顯微鏡 —— Nikon200,數(shù)碼相機 —— 三星 ES5常規(guī)玻璃儀器。重金屬攀枝花學院本科畢業(yè)設計(論文) 緒論 7 引起染色體形態(tài)畸 變的原因是多種多樣的,其中主要有: DNA 造成損傷; 擾亂 DNA 和有關蛋白質合成,以及干擾 RNA 轉錄的過程,進而使與染色體移動的相關物質幾乎不能合成或者是合成量遠遠的減少,不能滿足正常的活動的需要 ; 色體造成損傷過后不能修復,重接形成新的染 色體 [31]。 蠶豆根尖的細胞學試驗也被美國的國家環(huán)保局肯定了在環(huán)境突變性檢測中的作用,許多的環(huán)境致癌物都用蠶豆根尖細胞做了標準化試驗,并且建立了巨大的相關數(shù)據(jù)庫,同時建議在全球范圍 推廣 [30];其 又被國際上推薦作為為檢查誘變劑、致癌劑常用遺傳學毒理方法之一。我國則是在 1985 年發(fā)表 了首篇用蠶 豆根尖微核試驗直接檢測淡水湖泊水質污染的論 文 [29]。該實驗則是用微核出現(xiàn)的頒率來評價環(huán)境誘變因子對生物遺傳物 質的損傷程 度 [28]。作為一種檢測化學品遺傳學毒性的方法為人們所知,并且被廣泛的應用。放射生物學家們早在 1959 年就已經用蠶豆的根尖細胞來進行 x射線的遺傳損傷研究。 蠶豆根尖細胞分裂明顯,并且其蠶豆的染色體由六組較大的染色體組成,這些特征使得蠶豆易于在顯微鏡下觀察其細胞分裂情況??墒秤?,也可制醬、醬油、粉絲、粉皮和作蔬菜。蠶豆子粒蛋白質含量約 25%— 28%,含 8 種必需氨基酸。 蠶豆為長日照作物。莢果,種子扁平,略呈矩圓形或近于球形。羽狀復葉。蠶豆株 高 30— 180 厘 米。中國以四川最多,四川攀枝花涼山州更是盛產蠶豆。自熱帶至北緯63176。蠶豆一般認為起源于西南亞和北非。 一年生或二年生草本。 蠶豆根尖細胞學實驗的研究現(xiàn)狀與進展 蠶豆 (Vic
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