高中生物同步課件：52多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段2人教版選修1(參考版)
2024-11-21 23:09本頁面
【正文】 模板 互補(bǔ)Taq聚合酶 四種脫氧核苷酸 引物 變性、復(fù)性和延伸 72℃ 實(shí)驗(yàn)總結(jié) 。 如此重復(fù)改變反應(yīng)溫度 ,經(jīng)（ ） 三個(gè)階段為一個(gè)循環(huán) ,每一次循環(huán)使特異區(qū)段的基因拷貝數(shù)放大一倍 ,一般樣品是經(jīng)過 30次循環(huán) ,最終使基因放大了數(shù)百萬倍 。 取 DNA稀釋液 100uL至比色杯中，測(cè)定 260nm處的光吸收值 ⑶ 計(jì)算 DNA含量 (?g)＝ 50 (260nm的讀數(shù) )稀釋倍數(shù) 50： 1 ?g /ml的 DNA在厚度為 1cm比色杯中的吸光值為 ⑴ 稀釋 2uLPCR反應(yīng)液，加入 98uL蒸餾水，即將樣品進(jìn)行 50倍稀釋 . 光吸收 波長(zhǎng)／ nm 260 240 220 280 比色杯 課題延伸 PCR技術(shù)是 80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。 模板鏈 模板鏈 PCR 循環(huán)第一步：高溫變性 PCR 循環(huán)第二步 ：引物與靶序列退火 PCR 循環(huán)第三步 ：引物延伸 第 1個(gè) PCR循環(huán)完成后 ：得到兩個(gè)靶序列 PCR技術(shù) 高度靈敏， 為了避免外源 DNA等因素的污染而造成干擾實(shí)驗(yàn)， PCR操作時(shí)要注意做到： ⑴ 隔離操作區(qū)，所用微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用必須進(jìn)行高壓滅菌； ⑵ 分裝試劑，簡(jiǎn)化操作程序，使用一次性槍頭 ㈠ .理論上 DNA擴(kuò)增數(shù)目的計(jì)算 課題成果評(píng)價(jià) DNA，復(fù)制 n次， DNA為 2n DNA，復(fù)制 n次， DNA為 a 2n ㈡ .實(shí)驗(yàn)中 DNA含量的測(cè)定 可以通過計(jì)算 DNA含量來評(píng)價(jià)擴(kuò)增的效果，DNA
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