ch09遺傳重組(參考版)
2025-02-20 01:35本頁面
【正文】 ? 斷裂和重新結(jié)合反應(yīng)與 拓撲異構(gòu)酶 I催化的反應(yīng)機制相類似，不同的是相互連接的兩條鏈不是來自于同一雙螺旋，而是來自于不同的雙螺旋 。 ? 在整合反應(yīng)中，互補的 單鏈末端交互雜和 ，連接 并完成整合過程。 5’單鏈區(qū)全長 7個堿基。 λ噬菌體 DNA的整合機制 ? λDNA的整合涉及到 attB 和 attP的 核心序列DNA鏈的割裂和重接。因此位點特異性重組的方向性特征由 重組位點的特征所控制。 ? 整合和切除反應(yīng)所需要識別的序列對不相同 。催化切除反應(yīng)的除了 Int和 IHF外，還需要一種叫做 切除酶 （ exicisionase, Xis）的蛋白參加，該酶由 λ噬菌體的 xis基因 編碼。 ? Int和 IHF可以在體外進行位點特異性重組。 Int是一種 DNA結(jié)合蛋白，對 POP ’ 序列有強的親和力。 ? 其中 O 序列是 attB 和 attP 所共有的，序列完全一致，稱核心序列 （ core sequence） .是位點特異性重組發(fā)生的地方。 突變后可以阻止 λDNA的整合。 ? 整合和切除均通過細菌 DNA 和 λDNA上 特定位點 — 附著點（ attachment site， att）之間的重組 而實現(xiàn)。 兩種類型間的轉(zhuǎn)換是通過位點特異性重組實現(xiàn)的 。 第四節(jié) 位點特異性重組 ? 位點特異性重組發(fā)生在 特殊序列對 之間，這一重組型式最早是在 λ噬菌體的遺傳學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)的。 ? 一個含 4個堿基的序列提供了 Ruv C拆分Holliday連接體的熱點 。 ? RuvAB蛋白復(fù)合體可以使支鏈以 10～ 20 bp的速度遷移。 Ruv A 蛋白可以識別 Holliday連接體的結(jié)構(gòu)， Ruv B是一個腺苷三磷酸酶并可能提供支鏈遷移的動力。 三、 Ruv蛋白和 Holliday連接體的拆分 ? 大腸桿菌有一組由三個基因編碼與隨后的重組相關(guān)聯(lián)的蛋白。 。 ? RecBCD 所介導(dǎo)的解旋和切割可以被用來產(chǎn)生 末端 ，并引發(fā)異源雙鏈的形成。 ? RecBCD酶是一種多功能酶，具有
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