病毒性傳染病實驗室診斷技術(shù)進展(參考版)
2025-01-25 13:47本頁面
【正文】 2023年 2月 11日星期六 1時 46分 44秒 13:46:4411 February 2023 1一個人即使已登上頂峰，也仍要自強不息。 2023年 2月 11日星期六 下午 1時 46分 44秒 13:46: 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過于提升自我。勝人者有力，自勝者強。 :46:4413:46Feb2311Feb23 1越是無能的人，越喜歡挑剔別人的錯兒。 , February 11, 2023 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 2023年 2月 11日星期六 1時 46分 44秒 13:46:4411 February 2023 1空山新雨后，天氣晚來秋。 2023年 2月 11日星期六 下午 1時 46分 44秒 13:46: 1楚塞三湘接，荊門九派通。 13:46:4413:46:4413:46Saturday, February 11, 2023 1不知香積寺，數(shù)里入云峰。 13:46:4413:46:4413:462/11/2023 1:46:44 PM 1成功就是日復(fù)一日那一點點小小努力的積累。 下午 1時 46分 44秒 下午 1時 46分 13:46: 沒有失敗，只有暫時停止成功！。 2023年 2月 下午 1時 46分 :46February 11, 2023 1行動出成果，工作出財富。 :46:4413:46:44February 11, 2023 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國見青山。 :46:4413:46Feb2311Feb23 1故人江海別，幾度隔山川。 , February 11, 2023 雨中黃葉樹，燈下白頭人。 ：標(biāo)本的量不能太少，如有可能一次取多種標(biāo)本，在病程急性期和恢復(fù)期都取標(biāo)本。短時間可低溫保存，凍存的標(biāo)本忌反復(fù)凍融。 ：病毒離活體后在室溫下很易死亡，故采得標(biāo)本應(yīng)盡快送檢。 16sDNA， 584bp. ?舉例 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 的分子診斷 TB 檢測 50 ? 標(biāo)本處理 ：痰液化，抑制物去除 ? 試劑質(zhì)控及靈敏度 ?注意事項 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 的分子診斷 TB 檢測 51 結(jié)核的 PCR臨床主要應(yīng)用 ?臨床評價 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 的分子診斷 TB 檢測 52 ? PCR方法與痰涂片及 TB培養(yǎng)的比較 應(yīng)做比對研究 ?臨床評價 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 的分子診斷 TB 檢測 53 ? RFP（利福平） ? INH（異煙肼） ? SM（鏈霉素） ? EMB（乙胺丁醇） ? PZA（吡嗪酰胺） ? 喹諾酮類 ?已確定的耐藥的抗結(jié)核藥物 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 的分子診斷 耐藥監(jiān)測 54 ?單耐藥基因檢測 耐利福平： ? 突變一般發(fā)生在 RNA聚合酶 B亞單位編碼基因（ rpoB基因） ? 突變位點： 531位 絲氨酸 ?亮氨酸 526位 組氨酸 ?酪氨酸 ? 突變導(dǎo)致 RFP 不能與 RNA聚合酶 B亞單位結(jié)合 耐異煙肼： 與三種基因突變有關(guān) ? katG基因（突變位點： 463位 精氨酸 ?亮氨酸） ? inhA基因（突變位點： 94位 絲氨酸 ?丙氨酸） ? ahpC基因 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 的分子診斷 耐藥監(jiān)測 55 ? 同時對利福平、異煙肼這兩種或以上的抗結(jié)核藥物耐藥 ? 大多數(shù)耐多藥菌株是各種藥物作用靶分子的編碼基因逐步突變所致 。 IS6110， 123bp。 CDC抗 HCV實驗室檢測結(jié)果報告導(dǎo)則 48 靶序列來源 : a. 單抗檢出的 TB抗原蛋白編碼基因 b. TB特異性核酸片段克隆 c. 插入序列 結(jié)核分枝桿菌 (TB) 的分子診斷 TB 檢測 ?實驗設(shè)計特點 49 65KD， 165bp。 ? 常只需將 1型和 4型與其它基因型相區(qū)別，以決定抗病毒治療的療程和利巴韋林的劑量，因此上述的任何一種方法均可以采用。 HCV基因分型常選用的區(qū)域 丙型肝炎的分子診斷 44 臨床工作 ? 目前常用的基因型檢測方法（ RFLP, InnoLipa, Trugene) 通常建立在 5’非編碼區(qū)，因為該區(qū)序列保守，檢測靈敏度高，是 HCV RNA診斷實驗的常用區(qū)域。adw2。ayw3。 adr。adrq+。 熒光 PCR原理 – TaqManTM技術(shù) λ 23 5’ 3’ 5’ 3’ R Q Extension Step 5’ 3’ 1. Strand Displacement Taq 3’ Q R 5’ 3’ 3’ Q Taq R 5’ 2. Cleavage 3. Polymerization Complete 5’ 3’ Taq R 3’ 5’ 4. Detection 5’ 3’ 3’ Taq R 5’ l R 熒光 PCR原理 – TaqMan
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