實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳質(zhì)量控制(參考版)
2025-01-12 00:08本頁(yè)面
【正文】 Shanghai Jiao Tong University ? 通常將 6070日齡待測(cè)小鼠雌鼠與已知毛色基因結(jié)構(gòu)的 DBA/2（ aabbCC）雄鼠交配，根據(jù)雜交 F1的毛色確定待測(cè)小鼠主要毛色基因型，鑒定是否純合。 ? F1代為不同毛色時(shí)待測(cè)小鼠的基因型判斷 F1 代毛色不同則說(shuō)明待測(cè)鼠的基因型不純，故不是純系動(dòng)物。例如用 DBA/2測(cè) BALB/C毛色基因型。 ? (3)交配方式 選用 70 日齡左右的已知復(fù)隱性基因的雄性小鼠和同樣條件的待測(cè)雌性小鼠，按 1： 1或 1： 2，自行交配，觀察并記錄交配、生產(chǎn)等時(shí)間和各數(shù)據(jù)，以便于結(jié)果分析。 但一般都選用近交系作為待測(cè)鼠，以達(dá)到了解近交系毛色基因純合程度或新培育品系的基因型之目的。 ? 所以根據(jù)遺傳學(xué)原理 ,使復(fù)隱性等位基因的小鼠與待測(cè)小鼠交配，能從其 F1仔鼠的毛色推測(cè)被檢小鼠的基因型 毛色基因交配測(cè)試 Shanghai Jiao Tong University ? “ A－ B－ C－ D－”為野生色 ? “ A－ bbC－ D－”為桂皮色 ? “ aaB－ C－ D－”為黑色 ? “ aabbC－ D－”為棕色； ? “ cc ”為白化 毛色基因交配測(cè)試 Shanghai Jiao Tong University ? (1)已知復(fù)隱性等位基因型小鼠的選擇 可選用純系 DBA/2小鼠， 它的基因型是“ aabbCCdd”。 下頜骨形態(tài)學(xué)分析 Shanghai Jiao Tong University ? 小鼠的毛色等位基因 A、 B、 C、 D、分別位于第 條染色體上。 ? 下頜骨形態(tài)分析是一種靈敏、經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、可同時(shí)檢驗(yàn)大量的遺傳位點(diǎn)的遺傳監(jiān)測(cè)方法。 下頜骨形態(tài)學(xué)分析 Shanghai Jiao Tong University ? 檢測(cè)前，制作測(cè)量用的標(biāo)準(zhǔn)直角坐標(biāo)底板， 在近交系核心群中隨機(jī)取 60日齡以上的成年雄鼠，每次取樣 10只為 1組，制備下頜骨標(biāo)本后， ? 在顯微鏡下，放大 10倍測(cè)量在直角坐標(biāo)底板上下頜骨 11個(gè)形態(tài)特征參考點(diǎn)的距離 下頜骨形態(tài)學(xué)分析 Shanghai Jiao Tong University ? 將所測(cè)量值的平均數(shù)作統(tǒng)計(jì)分析，利用判別函數(shù)確定下頜骨形態(tài)。下頜骨的形態(tài)和大小在小鼠的近交系間存在明顯差異，所以，下頜骨分析是一種合理的方法 ? 該方法是一種靈敏和有效的鑒別和檢測(cè)亞系變異（源于遺傳混雜和突變）的技術(shù)。該方法不是鑒別新品系的理想方法。 皮膚移植 Shanghai Jiao Tong University 供 體 受 體 移植結(jié)果 近交系 同品系同性別 接受 近交系 不同品系 排斥 近交系 本品系同其他品系雜交 F1 接受 近交系♀ 同品系♂ 接受 近交系♂ 同品系♀ 排斥 雜交 F1 F1親代品系 排斥 雜交 F1 雜交 F2 接受 雜交 F2 雜交 F1 排斥（少數(shù)接受） 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚移植規(guī)律 Shanghai Jiao Tong University ? 皮膚移植法優(yōu)點(diǎn)： 易掌握、高度靈敏、經(jīng)濟(jì)、不需昂貴設(shè)備、對(duì)植皮接果的排斥或接受容易判斷。 ? 植皮后至少觀察 100天，只有在 100天以上植皮雙方均不發(fā)生排斥，才能證實(shí)待測(cè)小鼠或大鼠的遺傳純合性。 ? 皮膚移植也是的常用的遺傳質(zhì)量檢測(cè)方法，在國(guó)家推薦標(biāo)準(zhǔn)（ GB/）《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物近交系小鼠 \大鼠皮膚移植法》中，對(duì)該方法的基本操作步驟有詳細(xì)的介紹和規(guī)定。 生化標(biāo)志位點(diǎn)測(cè)試 Shanghai Jiao Tong University ? 實(shí)驗(yàn)證明動(dòng)物具有接受或排斥所植皮膚的能力。 ? 該方法必須嚴(yán)格選擇每一種顯示同功酶的緩沖液，電泳的溫度、時(shí)間、電壓和電流的最佳值。 生化標(biāo)志位點(diǎn)測(cè)試 Shanghai Jiao Tong University 在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制》（ GB149232023） 對(duì)近交系小鼠選擇位于 10條染色體上的 13個(gè)生化位點(diǎn) 對(duì)近交系大鼠選擇 9個(gè)生化位點(diǎn)，作為生化標(biāo)記檢測(cè)。 ? 使用電泳技術(shù)顯示蛋白質(zhì)不同性狀，便能建立每一近交系獨(dú)特的基因概貌。 遺傳質(zhì)量檢測(cè)方案的設(shè)計(jì) Shanghai Jiao Tong University ? 在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制》 （ GB149232023） 中規(guī)定： 對(duì)基礎(chǔ)群，凡在子代留有種鼠的親本動(dòng)物都應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)；對(duì)生產(chǎn)群動(dòng)物每年至少進(jìn)行一次遺傳質(zhì)量檢測(cè)，每次應(yīng)采樣 ≥6 只。 ? 方案必須規(guī)定檢測(cè)足夠數(shù)量的染色體，以利確定被測(cè)品系具有相同的基因型。 遺傳概貌的確定 Shanghai Jiao Tong University 封閉群動(dòng)物遺傳概貌內(nèi)容 繁殖數(shù)據(jù) 整體分析 胎間隔 整體脂肪含量 成活新生數(shù) 整體干物質(zhì)含量 離乳仔數(shù) 血液學(xué)數(shù)據(jù) 幼仔體重（ 2周齡） 血紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 淘汰種鼠特點(diǎn) 血白細(xì)胞計(jì)數(shù) 形態(tài)測(cè)定數(shù)據(jù) 血紅蛋白含量 體長(zhǎng) 血細(xì)胞比容 體重 平均細(xì)胞容積 11個(gè)下頜骨測(cè)量數(shù)據(jù) 尺骨長(zhǎng) Shanghai Jiao Tong University ? 在確定了近交系動(dòng)物的遺傳概貌后，為了保證遺傳質(zhì)量檢測(cè)的可靠和完善，又實(shí)現(xiàn)“ 4E原則”，沒(méi)有必要（也不可能）不停息的對(duì)遺傳概貌中的所有位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。 ? 從理論上講，遺傳概貌應(yīng)至少由每條染色體的 3個(gè)位點(diǎn)組成：每條染色體著絲點(diǎn)相應(yīng)的近端和遠(yuǎn)端各 1個(gè)位點(diǎn)和中部 1個(gè)位點(diǎn)。 準(zhǔn)確Exact 簡(jiǎn)便 Easy 有效 Efficient 經(jīng)濟(jì) Economic 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳學(xué)質(zhì)量控制 Shanghai Jiao Tong University 目前常用的檢測(cè)方法 生化標(biāo)志基因位點(diǎn)檢測(cè) 皮
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