基因診斷與基因治療(參考版)
2025-01-09 17:59本頁面
【正文】 2023年 1月 23日星期一 12時 6分 11秒 12:06:1123 January 2023 1一個人即使已登上頂峰，也仍要自強不息。 2023年 1月 23日星期一 下午 12時 6分 11秒 12:06: 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過于提升自我。勝人者有力，自勝者強。 :06:1112:06Jan2323Jan23 1越是無能的人，越喜歡挑剔別人的錯兒。 , January 23, 2023 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 2023年 1月 23日星期一 12時 6分 11秒 12:06:1123 January 2023 1空山新雨后，天氣晚來秋。 2023年 1月 23日星期一 下午 12時 6分 11秒 12:06: 1楚塞三湘接，荊門九派通。 12:06:1112:06:1112:06Monday, January 23, 2023 1不知香積寺，數(shù)里入云峰。 12:06:1112:06:1112:061/23/2023 12:06:11 PM 1成功就是日復一日那一點點小小努力的積累。 下午 12時 6分 11秒 下午 12時 6分 12:06: 沒有失敗，只有暫時停止成功！。 2023年 1月 下午 12時 6分 :06January 23, 2023 1行動出成果，工作出財富。 :06:1112:06:11January 23, 2023 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國見青山。 :06:1112:06Jan2323Jan23 1故人江海別，幾度隔山川。 , January 23, 2023 雨中黃葉樹，燈下白頭人。 要充分估計導入外源基因?qū)C體的 不利影響 。 外源基因在人體內(nèi)的 表達調(diào)控 存在一定的問題，盡管目前已有多種基因載體可供選擇，但如何揚長避短，構(gòu)建安全、高效、靶向、可控的載體是亟待解決的問題。這是目前腫瘤基因治療最常用的方法。 包裝細胞系 目 錄 目 錄 （四）外源基因表達的篩選 在較多的表達載體中都有 neor標記基因存在，若向培養(yǎng)基中加入藥物 G418，未被轉(zhuǎn)化的細胞不存在 neor標記基因，細胞不能存活，最后只有轉(zhuǎn)化細胞存活下來。 MoMLV切除了病毒 5’端 LTR至 Gag起始密碼之間包裝信號 ψ等序列，雖能產(chǎn)生病毒蛋白但不能進行包裝。 有目的基因的插入位點 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建 目 錄 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的優(yōu)點 DNA（ 7KB） ，幾達 100% ，并穩(wěn)定表達和傳代 、比較安全 缺點 “輔助病毒”的包裝細胞系 目 錄 包裝細胞： 一種細胞，重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體只能在其中包裝成沒有感染能力的病毒顆粒，但能從中釋放出去，這種細胞即包裝細胞。 逆轉(zhuǎn)錄病毒（ retrovirus） 目 錄 目 錄 目 錄 目 錄 目 錄 主要來自莫洛尼氏小鼠白血病病毒（ Moloney murine leukemia virus， MoMLV） 其中三個結(jié)構(gòu)基因（ gag、 pol、 env）被刪除 標記基因（ marker gene）插入空缺，供陽性選擇用。 目 錄 （三）載體的選擇和外源基因的導入 病毒載體 RNA病毒載體 （逆轉(zhuǎn)錄病毒） DNA病毒： 常用的有腺病毒、皰疹病毒、 SV40病毒、巨細胞病毒、 腺相關(guān)病毒、單純皰疹病毒等 非病毒載體 質(zhì)粒、脂質(zhì)體、受體介導的蛋白
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