【正文】 3．簡述鞣質(zhì)的一般提取方法及注意事項。 目 標 檢 測 一、選擇題 ，鞣質(zhì)是天然界植物中廣泛存在的一類（ ） A 碳苷類 B 多元酚類 C 黃烷醇類 D 酯糖苷類 E 黃烷醇多聚物類 （ ） A 沒食子鞣質(zhì) B 逆沒食子鞣質(zhì) C 可水解鞣質(zhì)低聚體 D 咖啡鞣質(zhì) E 縮合鞣質(zhì) ，為避免成分破壞常采用的提取方法是（ ） A 回流提取法 B 煎煮法 C 滲漉法 D 浸漬法 E 組織破碎提取法 （ ） A 生物堿 B 金屬鹽 C 蛋白質(zhì) D 石灰水 E 鐵氰化鉀氨溶液 （ ） A 乙醚 B 丙酮 C 含水丙酮 D 水 E 甲醇 （ ） A 水 B 甲醇 C 丙酮 D 氯仿 E 醋酸乙酯、丙酮的混合液 （ ） A 明膠 B 蛋白質(zhì) C 生物堿 D 50%的乙醇 E 醋酸鉛的堿溶液 二、分析題 依據(jù)下述鞣質(zhì)的一般提取工藝回答問題： （ 1）工藝中用 50%～ 70%含水丙酮提取有何優(yōu)點 ? （ 2）工藝中用組織破碎提取有何優(yōu)點，是否可以用熱回流、煎煮法進行提取？為什么？ （ 3）工藝中為什么藥用減壓濃縮？ 三、簡答題 1．簡述鞣質(zhì)類化合物的生理活性。再于此母液中加 1倍量的乙醇，則析出較純的蛋白質(zhì)沉淀，蛋白質(zhì)用水溶解，冷凍干燥，即為天花粉蛋白純品。 （一）設備、儀器及藥品 普通漏斗 、 紗布 、 溫度計 、 離心機 、 pH試紙 、 比色卡 、 玻璃棒 、 電爐 、 正己烷 、 KH2PO4NaOH、 硫酸銨 、 透析袋 、 天花粉粗粉 （二）天花粉中蛋白質(zhì)的提取與分離過程 精制天花粉蛋白經(jīng)化學分析，蛋白質(zhì)含量可達 80%左右，灰分在 10%以下。 一 學習目標 二 天花粉中蛋白質(zhì)的提取分離技術 天花粉是葫蘆科植物栝樓 （ Trichosanthes kirilowii Maxim.） 的根 ， 有生津止渴 ， 除火潤 燥 ， 排膿消腫等功效 。 能力要求 3 熟練進行天花粉中蛋白質(zhì)的提取、分離及鑒定操作。 熟悉天花粉中蛋白質(zhì)的結構及性質(zhì)。 任務四 天花粉中蛋白質(zhì)類化學成分的提取分離技術 學習目標 一 二 天花粉中蛋白質(zhì)類化學成分的提取分離技術 學習目標 1 掌握天花粉中蛋白質(zhì)的提取分離原理及操作技術。氯化鈉、硫酸鈉、硫酸銅等也可使用。 知識鏈接 (分級沉淀法 ) 常用的分級沉淀法有以下 2種 1．有機溶劑分級沉淀法 溶劑和蛋白質(zhì)溶液均需預先冷卻，然后將有機溶劑由低到高選擇幾個濃度，每一個濃度所沉淀的蛋白質(zhì)應立即離心分離，并溶于足夠量的水或緩沖液中，使其中所含有的有機溶劑稀釋，然后在母液中再繼續(xù)加入有機溶劑至預定的另一濃度，以沉淀另一部分蛋白質(zhì)，最常用的有機溶劑為乙醇和丙酮。但其浸出液中除含蛋 白質(zhì)外，尚含有糖、無機鹽、有機酸和苷類等雜質(zhì)，應先 加等量乙醇或丙酮，使總蛋白質(zhì)和酶沉淀。 Danasyl反應 蛋白質(zhì)或肽類分子中末端氨基酸部分中氨基在有碳酸氫鈉溶液存在時，易與 1二甲氨基萘 5磺酰氯反應生成相應的磺酰胺衍生物，從而具有強烈的黃色熒光（在紫光燈下觀察），在 ～也能藉其顯著的熒光而被檢識。蛋白質(zhì)分子中包含有色氨酸時呈陽性反應。 蛋白質(zhì)遇Millon試劑或共熱能呈紅色，證明蛋白質(zhì)中有酪氨酸的存在。 顏色反應 Millon反應 雙縮脲反應 蛋白質(zhì)中存在大量肽鏈，當其在堿性水溶液中遇少量硫酸銅溶液時，即顯紫色或紫紅色。植物中往往特定的酶和苷類共存與同一組織中，易使苷類發(fā)生水解。一般煮沸其水溶液蛋白質(zhì)即被凝結而自溶液中沉淀析出，振搖蛋白質(zhì)水溶液能產(chǎn)生似肥皂狀的泡沫。 一 蛋白質(zhì)和酶類化學成分的理化性質(zhì) 蛋白質(zhì)是由 α – 氨基酸以肽鍵的形式（即氨基與另一氨基酸分子中羧基脫水形成的化學鍵）相互結合而形成的鏈狀大分子化合物。 NHN H2C O O H南瓜子氨酸 （一）設備、儀器及藥品 強酸型陽離子交換柱色譜 、 弱堿型陰離子交換柱色譜 、 減壓濃縮裝置 、 普通漏斗 、 紗布 、 pH試紙 、 比色卡 、 氨水 、 氯酸 、 95%乙醇 、 南瓜子 （二）南瓜子中南瓜子氨酸的 提取工藝流程 南瓜子中南瓜子氨酸的提取工藝流程 南瓜子 南瓜子渣餅壓榨去油濾液水重復溫浸、濾過結晶加 9 5 % 乙醇，析晶乙酸乙酯溶液水浸出液通過離子交換樹脂樹脂水沖洗、氨水洗脫氨水洗脫液減壓濃縮、水溶、再濃縮殘渣加水溶解水溶液加 9 5 % 乙醇，濾過濾液加酸調(diào) pH ，析晶、濾過合并結晶稀乙醇反復重結晶南瓜子氨酸過氯酸鹽加水溶解，通過交換樹脂柱減壓濃縮，析晶南瓜子氨酸 純品南瓜子氨酸加混合溶劑，重結晶南瓜子 南瓜子渣餅壓榨去油水重復溫浸、濾過加 乙醇，析晶乙酸乙酯溶液水浸出液通過離子交換樹脂水沖洗、氨水洗脫氨水洗脫液減壓濃縮、水溶、再濃縮加水溶解水溶液加 乙醇，濾過加酸調(diào) ，析晶、濾過合并稀乙醇反復重結晶南瓜子氨酸過氯酸鹽加水溶解，通過交換樹脂柱減壓濃縮，析晶南瓜子氨酸 純品南瓜子氨酸加混合溶劑，重結晶 蛋白質(zhì)和酶類化學成分的提取分離技術 學習 提示 蛋白質(zhì)和酶類化學成分的結構、性質(zhì)及提取分離知識 任務四 天花粉中蛋白質(zhì)類化學成分的 提取分離技術 知識鏈接 分級沉淀法 學習提示 蛋白質(zhì)和酶類化學成分的理化性質(zhì) 一 二 蛋白質(zhì)和酶類化學成分的提取分離 蛋白質(zhì)和酶類 蛋白質(zhì)和酶是普遍存在的一類化合物，但已經(jīng)發(fā)現(xiàn)作為有效成分而存在的卻為數(shù)不多。 南瓜子氨酸是一種堿性氨基酸 ， 可與過氯酸（ HClO4） 形成結晶性的鹽 ， 從稀乙醇溶液中析出 。 學會南瓜子中南瓜子氨酸的色譜鑒定技術。 了解南瓜子中南瓜子氨酸的存在及生物活性。 知識要求 2 掌握南瓜子中南瓜子氨酸的提取、分離及鑒定技術。根據(jù)氨基酸易溶于水，難溶于有機溶劑的性質(zhì)，提取氨基酸時，可用適量水浸泡藥材，濾過，濾液減壓濃縮至 1ml相當 1g生藥后，加 2倍量 95%乙醇，沉淀除去蛋白、多糖等雜質(zhì)，濾液再濃縮至小體積，通過強酸型陽離子交換樹脂，然后用適當濃度的氫氧化鈉（ 1mol/L）或氨水（ 2mol/L）洗脫，收集與茚三酮呈陽性反應的洗脫液，濃縮處理后，可得總氨基酸，或用 70%乙醇為溶劑進行提取，再將乙醇回收至無醇味，通過強酸型陽離子交換樹脂，再用上法得總氨基酸。 NHN H 2C O O HONN HOOC H2 CHN H2C O O HN H 2 C O C H 2 C H C O O HN H 2 南瓜子氨酸 使君子氨酸 天門冬素 一 氨基酸類成分 的結構類型 常見氨基酸以組成蛋白質(zhì)的 30余種氨基酸為主，都屬 α 氨基羧酸，具有 RCH（ NH2） COOH通式，多數(shù)是一元氨基一羧酸，也有一元氨基二羧酸、二元氨基一羧酸和含有雜環(huán)的氨基酸等。 尿囊素（ allantoin） HNNOOH 2 N O C H N尿囊素 氨基酸類化學成分的提取分離技術 學習 提示 氨基酸類化學成分的結構、性質(zhì)及提