動(dòng)物微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)(參考版)
2024-10-06 21:24本頁(yè)面
【正文】 實(shí)驗(yàn)十 主要病原菌的認(rèn)識(shí) ? 一、目的要求 ? 認(rèn)識(shí)鏈球菌、葡萄球菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏桿菌、炭疽桿菌、魏氏梭菌和多殺性巴氏桿菌的形態(tài)染色特性和培養(yǎng)特性。 ? 二 .原理 ? 可溶性抗原與相應(yīng)抗體相遇后 ,出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝聚物 . ? 三 試劑與器材 ? NaHPO4?12H2O, KH2PO4 , 脫脂棉，瓊脂 , ? NaCl , 硫柳汞 ,平皿 ,打孔器 ,培養(yǎng)箱 ,加樣器 ,酒精燈等 . 四、操作步驟 （以炭疽為例 ) 沉淀原的制備 方法與判定 . （以炭疽為例） ? 五 . 注意事項(xiàng) ? 意換加樣器槍頭 . ? . ? 六 瓊脂擴(kuò)散沉淀反應(yīng)結(jié)果 ? 七 .思考題 ? （ 1）瓊脂雙相擴(kuò)散試驗(yàn)操作過(guò)程。 ? 沉淀反應(yīng)通常都是利用已知抗體檢查未知抗原，以診斷傳染病。 ? 原理 將可溶性抗原與相應(yīng)的抗體混合，在適量電解質(zhì)存在下，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間，即可形成肉眼可見(jiàn)的沉淀物，稱(chēng)為沉淀反應(yīng)。 ? 五 .注意事項(xiàng) ? ? . ? 3,抗原抗體混勻 . ? 六 .思考題 : ? . ? . 實(shí)驗(yàn)九 沉淀反應(yīng) ? 一、目的要求 ? 1．了解沉淀反應(yīng)在預(yù)防醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)中的意義。 ? +： 液體不透明，僅管底有少許凝集，其余無(wú)顯著的凝集塊（ 25％菌體被凝集）。 ? +++：液體略混濁，菌體大部分被凝集于管底，振蕩時(shí)呈片狀或顆粒狀（ 75％菌體被凝集）。 ? 牛、馬和駱駝的血清在 ，而綿羊、山羊和豬的血清在 ，判為陽(yáng)性反應(yīng)；牛、馬和駱駝的血清在 ，綿羊、山羊和豬的血清在 。 ? +：液體混濁，有小的顆粒狀物，即 25％凝集。 ? +++：有明顯凝集塊、液體幾乎完全透明，即 75%凝集。 ? 二 原理 ? 顆粒性抗原與相應(yīng)抗體相遇后在電解質(zhì)存在情況下出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的顆?，F(xiàn)象 . ? 三 試劑與器材： ? 試管架、凝集管、吸管、生理鹽水、玻板、被檢血清、布病平板抗原、試管抗原、布病陽(yáng)性血清、陰性血清、恒溫箱、玻璃鉛筆等。 ? 2. 這些反應(yīng)對(duì)微生物的研究有何作用 ? 實(shí)驗(yàn)七 動(dòng)物試驗(yàn)法 ? 一、目的要求 ? 掌握實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的保定、接種、采血以及剖檢的方法 ? 二、操作步驟 ? （一）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保定法 ? ? ? ? (二 )、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接種法 ? ? ? ? ? ? ? (三 )、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血法 ? ? ? ? ? ? (四 )、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體剖檢法 ? 思考題 : ? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須具備條件 ? ? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接種方法及注意事項(xiàng) ? 實(shí)驗(yàn)八 凝集試驗(yàn) ? 一、目的要求 ? 二、操作步驟 ? 一、目的要求 ? 1. 熟悉平板凝集反應(yīng)和試管凝集反應(yīng)的操作技術(shù)，通過(guò)對(duì)凝集結(jié)果的觀(guān)察和記錄，了解凝集的判定和對(duì)被檢牲畜試驗(yàn)結(jié)果的判定。 ? 三、試劑與器材 ? 1. 器材：恒溫培養(yǎng)箱，接種環(huán)，酒精燈 ? 2. 培養(yǎng)基及試劑：蛋白胨水培養(yǎng)基，檸檬酸鐵銨，吲哚檢驗(yàn)試劑，緩沖葡萄糖蛋白胨水液體培養(yǎng)基 8管 (滅菌備用 )，甲基紅試劑，肌酸， 40%KOH液，6%α萘酚酒精溶液 ,分別裝有乳糖發(fā)酵液，葡萄糖發(fā)酵液，蔗糖等發(fā)酵液的試管 (內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管 )若干支 。 ? 靛基質(zhì)試驗(yàn)原理 ? 某些微生物如大腸桿菌，變形桿菌，霍亂弧菌等含有色氨酸酶，能分解培養(yǎng)基中的色氨酸，產(chǎn)生靛基質(zhì) (indolo)。如果培養(yǎng)基含胍基太少，可加入肌酸或肌酐酸等含胍基化合物。脫羧而成為中性的乙酰甲基甲醇，該物質(zhì)在堿性條件下能被空氣中的氧氣氧化生成二乙酰。因此 ,在培養(yǎng)物中加入 1滴甲基紅試劑，立即可以觀(guān)察到上述結(jié)果之一。酸類(lèi)增加愈多，則使培養(yǎng)基中的 pH值愈下降，當(dāng)降至 ，指示劑甲基紅則呈紅色，即為陽(yáng)性反應(yīng)。酵母菌能分解葡萄糖、蔗糖生成乙醇和 CO2，不能分解乳糖。絕大多數(shù)微生物能利用糖類(lèi)作為碳源和能源，但是它們?cè)诜纸馓堑哪芰ι嫌泻艽蟮牟町?，有些?xì)菌能分解某種糖并產(chǎn)酸 (如乳酸、醋酸、丙酸等 )和氣體 (如氫、甲烷、二氧化碳等 )；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。 ? 6. 酵母菌與細(xì)菌在其培養(yǎng)特征和個(gè)體形態(tài)上有何區(qū)別 ? 為什么 ? 實(shí)
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