【正文】 不適用于食品，液體、油脂類、粉劑類等滅菌。 28 滅菌操作應(yīng)遵循生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊(cè)。 設(shè)置滅菌溫度應(yīng)充分考慮滅菌物品對(duì)溫度的耐受力；滅菌有機(jī)物品或用紙質(zhì)包裝的物品時(shí)，溫度應(yīng) ≤ 170℃。 注意事項(xiàng) 滅菌時(shí)滅菌物品不應(yīng)與滅菌器內(nèi)腔底部及四壁接觸，滅菌后溫度降到 40℃以下再開啟滅菌器柜門。 干熱滅菌 適用范圍 適用于耐熱 、不耐濕、蒸汽或氣體不能穿透物品的滅菌，如玻璃、金屬等醫(yī)療用品和油類、粉 劑等制品的滅菌。 壓力蒸汽滅菌操作程序 包括滅菌前物品的準(zhǔn)備、滅菌物品裝載、滅菌操作、無(wú)菌物品卸載和滅菌效果的監(jiān)測(cè)等步驟。應(yīng)急情況下使用時(shí)，只適用于滅菌裸露物品，使用卡式盒或者專用滅菌容器盛放。 下排氣，預(yù)排氣壓力蒸汽滅菌器的具體操作步驟、常規(guī)保 養(yǎng)和檢查措施，應(yīng)遵循生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊(cè)。 預(yù)排氣壓力蒸汽滅菌器應(yīng)在每日開始滅菌運(yùn)行前空載進(jìn)行 BD試驗(yàn)，檢測(cè)其空氣排出效果。 手提式或臥式壓力蒸汽滅菌器主體與頂蓋應(yīng)無(wú)裂縫和變形，不應(yīng)使用無(wú)排氣軟管或軟管銹蝕的手提式壓力蒸汽滅菌器。 滅菌包體積要求：下排氣壓力蒸汽滅菌器不宜超過 30cm 30cm 25cm。 檢查安全閥是否在蒸汽壓力達(dá)到規(guī)定的安全限度時(shí)被沖開。 表 快速壓力蒸汽滅菌（ 132℃ ~ 134℃）所需最短時(shí)間 物品種類 下排氣 正壓排氣 預(yù)排氣 滅菌溫度 ℃ 滅 菌時(shí)間min 滅菌溫度 ℃ 滅菌時(shí)間min 滅菌溫度 ℃ 滅菌時(shí)間min 不帶孔物品 帶孔物品 不帶孔 帶孔物品 132 132 132 3 10 10 134 134 134 132 132 132 3 4 4 注意事項(xiàng) 每天設(shè)備運(yùn)行前應(yīng)進(jìn)行安全檢查，檢查內(nèi)容包括： a) 滅菌器柜門密封圈平整無(wú)損壞，柜門安全鎖扣靈活、安全有效； b）滅菌器壓力表處在“ 0”的位置； c）由柜室排氣口倒入 500ml 水，檢查有無(wú)阻塞； d）關(guān)閉滅菌器柜門，通蒸汽檢查有無(wú) 泄漏； e）檢查蒸汽調(diào)節(jié)閥是否靈活、準(zhǔn)確，壓力表與溫度計(jì)的標(biāo)示是否吻合、排氣口溫度計(jì)是否完好； f）記錄打印裝置處于備用狀態(tài)； g）電源、水源、蒸汽、壓縮空氣等運(yùn)行條件符合設(shè)備要求。其滅菌參數(shù)如時(shí)間和溫度由滅菌器性質(zhì)、滅菌物品材料性質(zhì)（帶孔和不帶孔）、是否裸露而定，見表 。滅菌器的滅菌參數(shù)一般為溫度 132℃～ 134℃，壓力 ，滅菌時(shí)間 4min。滅菌器的滅菌參數(shù)一般為溫度 121℃，壓力 ，器械滅菌時(shí)間 20min,敷料滅菌時(shí)間 30min。根據(jù)滅菌時(shí)間的 長(zhǎng)短，壓力蒸汽滅菌程序包括常規(guī)壓力蒸汽滅菌程序和快速壓力蒸汽滅菌程序。壓力蒸汽滅菌不適用于油類和粉劑的滅菌。 附錄 C （規(guī)范性附錄） 常用消毒與滅菌方法 壓力蒸汽滅菌 適用范圍 適用于耐熱、耐濕診療器械、器具和物品的滅菌。 血瓊脂培養(yǎng)基 營(yíng)養(yǎng)瓊脂 100 ml 脫纖維羊血 (或兔血 ) 10 ml 將營(yíng)養(yǎng)瓊脂加熱熔化待冷至 50℃ 左右，以無(wú)菌操作將 10ml 脫纖維血加入后搖勻，倒平皿置冰箱備用。7H2O) 25 蛋白胨 5g 葡萄糖 10g 蒸餾水 1000ml 除葡萄糖外，上述各成分加入蒸餾水內(nèi)，微溫溶解后，調(diào)節(jié) pH 約 ，煮沸，加葡萄糖溶解后，搖勻?yàn)V清，調(diào) pH 使滅菌后為 177。 需氧 厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基 酪胨 (胰酶水解 ) 15g 牛肉膏 3g 葡萄糖 5g 氯化鈉 L胱氨酸 硫乙醇酸鈉 酵母浸出粉 5g 新鮮配制的 % 刃天青溶液 (或新配制的 % 亞甲藍(lán)溶液 瓊 脂 ~ 蒸餾水 1000ml 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成份加入蒸餾水中，微溫溶解后，調(diào) pH 至弱堿性，煮沸、濾清，加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調(diào) pH 至 ～ ，分裝于 115℃壓力蒸汽滅菌 30min。 胰蛋白胨 氯化鈉 先用 900ml 以上蒸餾水溶解，并調(diào)節(jié) pH 值在 177。 % 葡萄糖肉湯培養(yǎng)基 蛋白胨 10g 氯 化鈉 5g 葡萄糖 5g 肉浸液 1000ml 取蛋白胨與氯化鈉加入肉浸液內(nèi)，微溫溶解后，調(diào) pH 至弱堿性，煮沸、加入葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調(diào) pH 至 ～ ，分裝，于 115℃ 壓力蒸汽滅菌 30min。 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 氯化鈉 5g 蒸餾水 1000ml 將各成分溶解于蒸餾水中，調(diào) pH 至 ～ ，分裝，于 121℃ 壓力蒸汽滅菌 20min備用。 B． 4 溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液 蛋白胨 10g 葡萄糖 5g 可溶性淀粉 1g 溴甲酚紫乙醇溶液 10mL 蒸餾水 1000mL 將 蛋白胨、葡萄糖溶解于蒸餾水中，調(diào) pH 至 ～ ，加入 1%溴甲酚紫酒精溶液，搖勻后，分裝，每管 5mL，于 115℃壓力蒸汽滅菌 30min。 B． 2 無(wú)菌檢驗(yàn)用洗脫液 吐溫― 80 1g 蛋白胨 10g 氯化鈉 蒸餾水 1000mL 將各成分加入到 ，加熱溶解后調(diào) pH至 ～ ，與 121℃壓力蒸汽滅菌 20min 備用。 附 錄 B （資料性附錄） 消毒試驗(yàn)用試劑和培養(yǎng)基配方 B． 1 磷酸鹽緩沖液（ PBS。 A． 9 致病菌的檢測(cè) 當(dāng)懷疑被某致病菌污染時(shí)， 或懷疑醫(yī)院感染與某致病菌有關(guān)時(shí)，致病菌的檢測(cè)依據(jù)污染情況進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)菌的檢測(cè)。 A． 8． 3 檢測(cè)方法 將采樣管在混勻器上振蕩 20s 或用力振打 80 次，取采樣液檢測(cè)致病菌。 A8 清潔用品的消毒效果監(jiān)測(cè) A． 8． 1 采樣時(shí)間 消毒后、使用前進(jìn)行采樣。消毒液染菌量計(jì)算見式（ ）： 消毒液染菌量（ CFU/mL） =平均每皿菌落數(shù) 10稀釋倍數(shù) ??? （ ） A． 7． 2． 2 結(jié)果判斷 使用中滅菌用消毒液；無(wú)菌生長(zhǎng)；使用中皮膚黏膜消毒液染菌量：≤ 10CFU/mL，其他使用中消毒液 染菌量≤ 100CFU/mL。 A． 7． 用無(wú)菌吸管吸取一定稀釋比例的中和后混合液 接種平皿，將冷至 40℃～ 45℃的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注 15mL～ 20 mL,36℃177。 A． 7． 2 使用中消毒液染菌量測(cè)定 A． 7． 2． 1 .1 用無(wú)菌吸管按無(wú)菌操作方法吸取 被檢消毒液，加入 9mL 中和劑中混勻。 A．６． 5 注意事項(xiàng) 采樣前，關(guān)閉門、窗，在無(wú)人走動(dòng)的情況下，靜止 10min 后采樣。 A．６．４．３ 兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗(yàn)室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤ 4cfu/(5min 結(jié)果計(jì)算 沉降法按平均每皿的菌落數(shù)報(bào)告： cfu/（皿．暴露時(shí)間） 浮游菌發(fā)計(jì)算公式見式（ ） 空氣中菌落總數(shù)（ cfu/m3） = 采樣 器各 平皿 菌落 數(shù)之 和（ cfu) 采樣速度（ L/min） X 采樣時(shí)間（ min） 1000 ??（ ） A．６．４ 結(jié)果判定 A．６．４．１ 潔凈手術(shù)部（室）和其他潔凈場(chǎng)所，空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)要求應(yīng)遵循ＧＢ５０３ 3３． A．６．４．２ 非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤４ cfu／（１５ｍ ｉｎ 將送檢平皿置 36℃ 177。 未采用潔凈技術(shù)凈化 空氣的房間采用沉降法：室內(nèi)面積≤ 30 cm2，設(shè)內(nèi)、中、外對(duì)角線三點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn)應(yīng)距墻壁 1m 處；室內(nèi)面積＞ 30 cm2，設(shè)四角及中央五點(diǎn)，四角的布點(diǎn)位置應(yīng)距墻壁 1m處。監(jiān)測(cè) 21 時(shí)將采樣器置于室內(nèi)中央 ～ 高度，按采樣器使用說明書操作，每次采樣時(shí)間不應(yīng)超過 30min。 監(jiān)測(cè)方法 潔凈手術(shù)部（室）及其他潔凈用房可選擇沉降法或浮游菌法，參照 GB50333要求進(jìn)行監(jiān)測(cè)。 結(jié)果判定 潔凈手術(shù)部、其他潔凈場(chǎng)所，非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)等；物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≤ 5cfu/ cm2。 結(jié)果計(jì)算 規(guī)則物體表面 物體表面菌落總數(shù)計(jì)算方法見式（ ） 。 檢測(cè)方法 充分震蕩采樣管后，取不同稀釋數(shù)倍的洗脫液 接種平皿 ，將冷至 40℃～ 45℃ 的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 每 皿傾注 15ml～ 20ml， 36℃ 177。門把手等小型物體則采用，棉拭子直接涂抹物體表面采樣。 采樣方法 20 用 5cmx5cm 滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無(wú)菌 （ PBS）或生理鹽水采樣液的棉拭子 1 支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹 5 次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣 4個(gè)規(guī)格板面積，被采表面 ＜ 100cm2， 取全部表面 ； 被采表面≥ 100cm2取 100cm2。 注意事項(xiàng) 采樣皮膚表面不足 5cmx5cm，可用相應(yīng)面積的規(guī)格板采樣。 1℃ 溫箱培 養(yǎng) 48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。 采樣方法 用 5cmx5cm 的滅菌規(guī)格板，放在被檢皮膚處，用浸有含相應(yīng)中和劑的無(wú)菌洗脫液的棉拭子 1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各 5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)