第九章酶免疫技術(shù)(參考版)
2024-08-12 12:59本頁面
【正文】 最常用的是以聚苯乙烯等材料作為固相載體的酶聯(lián)免疫吸附試驗（ ELISA） ,其原理可以有夾心法、競爭法、間接法和捕獲法等。酶免疫技術(shù)可分為酶免疫組織化學(xué)技術(shù)和酶免疫測定兩大類 ,后者根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合與游離的酶標記物而分為均相和非均相兩種類型。 1．酶免疫技術(shù)的要點？ 2．酶聯(lián)免疫吸附試驗的原理（ ELISA）？ 3．競爭法在酶聯(lián)免疫檢測應(yīng)用中的原理和應(yīng)用？ 4．常用的底物有哪幾類？特點？ 5．常用的酶有哪幾類？特點？ 6．何謂包被與封閉？其作用？ 7．常用固相載體的種類和特點？ 8．舉例固相酶免疫測定應(yīng)用的原理及影響因素。 非均相免疫測定中的ELISA應(yīng)用更為廣泛 ， ELISA廣泛用于傳染病的診斷 ， 病毒如病毒性肝炎（ 甲肝抗體 、 “ 乙肝三對 ” 、 丙肝抗體 、 丁肝抗體 、 戊肝抗體 ） 、 風疹病毒 、 皰疹病毒 、 輪狀病毒等；細菌如結(jié)核桿菌 、 幽門螺桿菌等 。 應(yīng)用： 用于只有一個抗原決定簇的小分子半抗原（藥物、激素等） ELISA檢測抗原的方法 競爭法測抗原 + E E E E E E E 加待檢物 抗原與酶標抗 原競爭與抗體 結(jié)合 加酶作用 的底物不顯色 或顯色弱 加酶作用 的底物顯色 已知抗體包 被于載體表面 已知抗體包 被于載體表面 加待測物 和酶標抗原， 酶標抗原與抗 體結(jié)合 E 間接法 ?方法 用已知抗原包被，加入待測血清，再加酶標的抗人 IgG（抗抗體或二抗）加底物顯色。 原理 一、均相酶免疫測定 最具代表性的兩種技術(shù) 酶放大免疫測定技術(shù) EMIT enzymemutiplied immunoassay technique 克隆酶供體免疫分析 CEDIA cloned enzyme donor immunoassay 均相酶免疫測定 EMIT示意圖 CEDIA示意圖 ?分類： 液相酶免疫測定 固相酶免疫測定 以聚苯乙烯等材料作為固相載體的酶聯(lián)免疫吸附試驗（ ELISA） 是目前最為常用的固相酶免疫測定 與均相不同之處 需分離游離與結(jié)合的酶標記物 二、非均相酶
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