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(Eds.), Fields Virology Lippincott Williams amp。這些結(jié)果表明HDV和HBV衣殼包膜化的分子機(jī)制是不同的，盡管它們利用相同的包膜蛋白。與HDV病毒粒子形成過(guò)程不同(Hwang and Lai, 1993)，在HDV病毒粒子形成過(guò)程中，HBV 的S蛋白很充足(Wang et al., 1991)。球形核殼的結(jié)構(gòu)尚哺清楚，較長(zhǎng)delta 抗原在C端比短的delta抗原多19個(gè)氨基酸，且在該區(qū)域含異戊二烯化（isoprenylation）信號(hào)。一種被稱為丁型肝炎（HDV或delta virus）的缺損病毒可增殖性感染僅HBV感染的肝細(xì)胞 (Taylor, 2003)，因?yàn)镠DV可利用HBV的包膜。所產(chǎn)生蛋白的構(gòu)象與用外源序列取代前體S2結(jié)構(gòu)域的M蛋白構(gòu)象相似。不過(guò)，通過(guò)融合S蛋白N端將外源結(jié)構(gòu)域組裝進(jìn)HBV包膜是可行的(Bruss and Ganem, 1991)。WHV的L蛋白可以代替HBV L蛋白參與HBV病毒粒子的形成盡管效率較低，而DHBV 的L蛋白則不行(Gerhardt and Bruss, 1995)。在描述20nm亞病毒顆粒形成的章節(jié)中有提到：嗜肝病毒包膜蛋白的組裝過(guò)程具有選擇性，尚沒(méi)有發(fā)現(xiàn)任何的外源蛋白被組裝進(jìn)亞病毒顆粒，即便是禽類或哺乳類來(lái)源的包膜蛋白也不能混合組裝。另外，來(lái)自HBV包膜蛋白和衣殼的多肽的體外結(jié)合實(shí)驗(yàn)也同樣證實(shí)了這點(diǎn)(Poisson et al., 1997)。人們認(rèn)為包膜蛋白的其中一個(gè)或兩個(gè)基質(zhì)結(jié)構(gòu)域可直接與衣殼表面的一個(gè)或兩個(gè)結(jié)構(gòu)域結(jié)合，這點(diǎn)在HBV的一個(gè)雙重突變體中得到了證實(shí)。 Dyson and Murray, 1995)。突觸中間區(qū)域或頂部的突變則沒(méi)有影響。在基于HBV衣殼晶體結(jié)構(gòu)的更深層次的篩選中，52個(gè)暴露在衣殼表面的氨基酸被換成丙氨酸(Ponsel and Bruss, 2003)。通過(guò)突變體分析，對(duì)衣殼上可能的結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行了定位。實(shí)驗(yàn)表明，L蛋白的兩個(gè)片段（一個(gè)從24至191位氨基酸；一個(gè)從191至322位氨基酸）在衣殼的結(jié)合中具有協(xié)同作用(Tan et al., 1999)。遺傳學(xué)分析顯示該環(huán)靠近C端的一半?yún)^(qū)域內(nèi)的短片斷的缺失會(huì)抑制病毒粒子的形成，但不抑制20nm亞病毒顆粒的形成(LofflerMary et al., 2000)，但該區(qū)域內(nèi)的點(diǎn)突變不具這種效應(yīng)(V. Bruss, unpublished)。但該結(jié)構(gòu)域的上游區(qū)域可被缺失，而不影響病毒粒子的形成(Bruss and Thomssen, 1994)；下游的大多數(shù)區(qū)域直至S結(jié)構(gòu)域內(nèi)II型信號(hào)的跨膜區(qū)的突變也沒(méi)有任何影響(Bruss,1997)。HBV的 ipreS中也發(fā)現(xiàn)了一個(gè)短的類似的區(qū)域103至124位氨基酸（或92113位氨基酸，與病毒基因型有關(guān)）。當(dāng)L蛋白不存在時(shí)，衣殼將進(jìn)入細(xì)胞核，將其基因組釋放至核質(zhì)；當(dāng)L蛋白表達(dá)達(dá)到一定的閾值，衣殼將以有包膜的病毒粒子形式被釋放。與ipreS結(jié)構(gòu)域具基質(zhì)蛋白功能相一致，胞質(zhì)內(nèi)DHBV衣殼的細(xì)胞內(nèi)途徑受DHBV L蛋白的影響 (Summers et al.,1990。L蛋白將前體S結(jié)構(gòu)域暴露在ER胞質(zhì)一側(cè)（ipreS）對(duì)于核殼的包膜化非常重要。該L融合蛋白能被組裝進(jìn)入亞病毒顆粒(Prange et al., 1995)但不能形成病毒粒子(Bruss and Vieluf, 1995)。對(duì)L蛋白在病毒粒子形成中的功能的一點(diǎn)提示來(lái)自該蛋白的跨膜拓?fù)鋵W(xué)結(jié)構(gòu)。但是，N端截短的L蛋白突變體能與野生型L蛋白一樣有效的形成病毒粒子(Bruss and Thomssen, 1994)。（ii）病毒衣殼可解除對(duì)分泌作用的阻斷。而L或S蛋白表達(dá)被抑制則會(huì)阻斷病毒粒子的形成(Bruss and Ganem, 1991。與C型反轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒（lentivirus）不同，阻斷包膜蛋白表達(dá)的HBV突變體不能釋放脂雙層包裹的衣殼。 Summers et al.,1991。將12130和132位的殘基突變成丙氨酸會(huì)阻斷HBV衣殼形成，而131位殘基的突變則對(duì)病毒衣殼或病毒粒子的形成沒(méi)有任何影響，因此還不能確定這些殘基在出芽過(guò)程中是否具有直接的重要的作用(Ponsel and Bruss, 2003)，還需要設(shè)計(jì)更多的實(shí)驗(yàn)來(lái)確定HBV是否利用late 結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)途徑出芽。通過(guò)這種相互作用，病毒得以接近宿主出芽裝置。最近有報(bào)道稱，一些包膜病毒的結(jié)構(gòu)蛋白具所謂的late 結(jié)構(gòu)域，在出芽過(guò)程中參與與宿主因子的相互作用 (Freed, 2002。不成熟、高度磷酸化且含ssDNA的衣殼則不能與膜結(jié)合。 Patzer et al., 1986)。但通過(guò)與其他包膜病毒的比較以及對(duì)嗜肝病毒粒子形成在分子水平上的分析，可以推測(cè)HBV病毒粒子是由衣殼在細(xì)胞內(nèi)膜進(jìn)行常規(guī)的出芽所形成。雖然HBV包膜對(duì)溫和型去污劑敏感，對(duì)于病毒包膜中是否含有脂質(zhì)仍不清楚。僅僅猜測(cè)亞病毒顆粒和病毒粒子的出芽處的膜組成相同?？梢韵胂螅瑏啿《绢w粒的出芽過(guò)程也反映出病毒粒子的相同過(guò)程。然而，哺乳動(dòng)物病毒W(wǎng)HV和HBV，它們相當(dāng)?shù)仡愃?，共同包裝。宿主蛋白還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)組成到亞病毒顆粒中去，這表明在形態(tài)發(fā)生過(guò)程中這些蛋白被有效地排除了。融合的I型分泌信號(hào)到蛋白L中和前體S的共翻譯則會(huì)運(yùn)輸?shù)絻?nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，從而，產(chǎn)生2個(gè)中的其中之一的蛋白L的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，其可以消除分泌抑制(Bruss and Vieluf, 1995)。Kuroki et al., 1989。這種貯存現(xiàn)象已經(jīng)得到了廣泛的觀注，然而，它在病毒生活史中的意義還不是很清楚。 Xu et al., 1997b)。 Persing et al., 1986)。點(diǎn)突分析，當(dāng)?shù)鞍譙的腔環(huán)中的4個(gè)半胱氨酸中的3個(gè)殘基突變?yōu)榻z氨酸后，則顆粒不會(huì)形成(Mangold and Streeck, 1993)，然而，這些位點(diǎn)的共價(jià)修飾，例如，脂肪酸的酰化還沒(méi)有被發(fā)現(xiàn)(Persing et al., 1987)。在亞病毒顆粒中，脂的相對(duì)量為25% (Gavilanes et al.,1982)，這與通常所說(shuō)的雙層脂膜不太一樣。這個(gè)形態(tài)學(xué)的過(guò)程機(jī)制并不清楚。分離表達(dá)蛋白S于酵母中，可以在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生20nm的HbsAg顆粒，這種材料有很高的免疫原性，可以作為乙肝的有效疫苗(McAleer et al., 1984)。實(shí)際上，亞病毒顆粒和病毒粒子有著相同的表面抗原（HBSAg），盡管它們的包膜蛋白組成并不是完全一樣。這種過(guò)量產(chǎn)生空包膜的現(xiàn)象還不清楚。這些顆粒直徑20nm，纖維狀結(jié)構(gòu)的長(zhǎng)度不等。 Patzer et al., 1986)有效地出芽(Eble et al., 1986。乙肝蛋白L的磷酸化還沒(méi)被發(fā)現(xiàn)。DHBV的蛋白L被部分地磷酸化(Grgacic and Anderson, 1994)，主要位于118位的絲氨酸上(Borel et al., 1998)。這種蛋白L的共價(jià)修飾似乎在感染的過(guò)程中表現(xiàn)出重要的作用(Bruss et al., 1996。許多模型因此顯示，蛋白