【正文】 pHVS also contains sGFP(S65T), which encodes a modified form of green fluorescent protein (GFP), as a reporter gene in the flanking region of V31. Fluorescence microscopy revealed that the leaves of 8 of the 25 independent transgenic plants obtained with pHVS expressed GFP。 however, little information concerning the inheritance of seed sucrose in soybean is available. The objective of this research was to use molecular markers to identify genomic regions significantly associated with quantitative trait loci (QTL) controlling sucrose content in a segregating F2 population. DNA samples from 149 F2 individuals were analyzed with 178 polymorphic genetic markers, including RFLPs, SSRs, and RAPDs. Sucrose content was measured on seed harvested from each of 149 F2V3 lines from replicated field experiments in 1993 and 1995. Seventeen marker loci, mapping to seven different genomic regions, were significantly associated with sucrose variation at P 0:01. Individually, these markers explained from % to % of the total phenotypic variation for sucrose content in this population. In a bined analysis these genomic regions。_, . Saghai Maroof amp。 Princess Anne, Maryland。因此,酶學(xué)標(biāo)記技術(shù)在作物育種中不失為一個(gè)有效的選擇手段。目前,在大豆品質(zhì)DNA分子標(biāo)記研究中, IEF PAGE 技術(shù)為研究各種缺失體類型的表達(dá)提供了可靠的依據(jù)。 IEF PAGE 電泳的費(fèi)用較昂貴,但分離效果好,且穩(wěn)定。這與作者在日本筑波農(nóng)研中心使用SDS PAGE法的費(fèi)用相差不大。在分析大量樣品時(shí), 為了降低成本可采取兩條措施: 11 加大同一膠板的點(diǎn)樣數(shù)量。2 　IEF PAGE 法此方法根據(jù)脂氧酶三種類型酶蛋白所具有不同等電點(diǎn)的特點(diǎn),利用高分辨率pH 梯度IEF PAGE 電泳進(jìn)行分離,其分析結(jié)果清晰、穩(wěn)定可靠,在不同的年度對(duì)同一組檢測樣品的檢測結(jié)果也是一致的,說明IEF PAGE 電泳作為脂氧酶蛋白分子檢測技術(shù)的穩(wěn)定性是很好的。日本學(xué)者Kitamura(1984) 開發(fā)出一種改良PAGE 電泳技術(shù),能將三種酶鑒別出來,但這有可能因pH 值、離子濃度以及聚膠條件等微小的變化影響測定中的各類型的分離,且有時(shí)會(huì)發(fā)生失真的現(xiàn)象。如果分子量之間的差異明顯,此方法就具有分辨率高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。近年來,對(duì)大量樣品進(jìn)行了分析鑒定,在克服一些不利因素方面取得了一定的進(jìn)展。降低大豆制品的豆腥味, 除利用各種加工技術(shù)外, 近年來, 篩選培育脂氧酶缺失體類型大豆品種,也是一種有效的方法。上述加工技術(shù)均具有一定的局限性,如: 加熱可破壞蛋白質(zhì), 使品質(zhì)下降。另外, 加入一定量的抗氧化劑, 也可抑制自由氧分子和脂氧酶對(duì)不飽和脂氧酸的氧化。豆油中所含有的不飽和脂肪酸, 如: 亞油酸(18∶2) 和亞麻酸(18∶3) 均易被脂氧酶氧化, 其氧化產(chǎn)物(小分子的醛、醇、酮等揮發(fā)性物質(zhì)) 是豆腥味產(chǎn)生的主要原因, 因而引起大豆制品的風(fēng)味降低(Chang 等, 1983) 。本文重點(diǎn)闡述在大豆育種中如何利用高分辨率pH 梯度等電聚丙烯酰胺凝膠電泳( IEF PAGE) 技術(shù)分析脂氧酶缺失,并將此技術(shù)與日本和美國學(xué)者所采用的變性聚焦聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS PAGE) 技術(shù)進(jìn)行比較,評(píng)價(jià)它們之間的優(yōu)缺點(diǎn)。作者利用上述技術(shù)對(duì)缺失Kunitz 胰蛋白酶抑制劑(ti) 、脂氧酶(Loxs) 和7S 球蛋白等基因進(jìn)行了研究,主要根據(jù)缺失突變體中蛋白酶分子的表達(dá),采用不同的電泳方法,檢測感官難以分辨的品質(zhì)基因。本研究采用順序中性字編碼,消除了由于品種名稱帶來的間接影響,樣品品嘗次序隨機(jī),這樣能較好地消除位置效應(yīng),提高品評(píng)的可行度。　品嘗方式樣品編碼造成位置效應(yīng),一直是食品感官品評(píng)界十分關(guān)注的問題,消除位置效應(yīng)最有效的途徑是品評(píng)組織者的編碼方式,常用的有23位隨機(jī)數(shù)編碼法、字母編碼法、符號(hào)法,但是都有一定的缺陷,對(duì)于數(shù)字法,不管采用什么方式,都有一定的順序信息,如53387。生食樣品在沸水中漂燙1分鐘,目的是破壞細(xì)胞內(nèi)多酚酶活性,抑制酶促褐變,消除生味,同時(shí)能去除部分豆腥味,使樣品保持鮮綠色,這與國際出口冷凍加工相一致。在品嘗每一樣品過程中,根據(jù)各評(píng)價(jià)因子的5級(jí)評(píng)語隸屬等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行鑒定,各品種評(píng)定項(xiàng)目為:生食時(shí),?！　∩?Ｕ4),生食口感(Ｕ1) 食時(shí),熟食口味(Ｕ2),熟食香味(Ｕ5)生樣時(shí),生樣可剝性(Ｕ6),粒莢外觀(Ｕ3)(5)確定菜用大豆質(zhì)量等級(jí)系數(shù)ｈ1(優(yōu)良)=,ｈ2(較好)=,ｈ3(一般)=,ｈ4(較差)=,ｈ5(低劣)=　評(píng)價(jià)因子權(quán)重的確立將菜用大豆評(píng)價(jià)因子(生食口感、熟食口味、熟食香味、粒色、粒莢外觀、生樣可剝性)重要性順序的專家、消費(fèi)者調(diào)查結(jié)果,進(jìn)行Ｆｒｉｅｄｍａｎ序數(shù)檢測,結(jié)果表明菜用大豆各評(píng)價(jià)因子的重要性之間有極其顯著差異(Ｆ= ),其重要性順序?yàn)樯晨诟惺焓晨谖读Ｇv外觀粒色熟食香味生樣可剝性。樣品用培養(yǎng)皿盛放,多種樣品采用一次性送樣,圓形擺置,樣品數(shù)量均勻一致。(3) 確定評(píng)語論域及各評(píng)價(jià)因子的隸屬標(biāo)準(zhǔn)評(píng)語論域Ｖ:Ｖ={Ｖ1(優(yōu)良),Ｖ2(較好),Ｖ3(一般),Ｖ4(較差),Ｖ5(低劣)}根據(jù)ＡＶＲＤＣ確定的熱帶地區(qū)菜用大豆的種質(zhì)特征及國內(nèi)外市場上認(rèn)定的品質(zhì)性狀特征,結(jié)合育種實(shí)踐,確定各評(píng)價(jià)因子所對(duì)應(yīng)的5級(jí)評(píng)語隸屬等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。生樣可剝性　(Ｕ6):剝開豆莢的難易程度。?！　∩?Ｕ4):子粒顏色對(duì)人產(chǎn)生的視覺感受。熟食口味　(Ｕ2):水溶性呈味物質(zhì)刺激味蕾而產(chǎn)生酸、甜、苦、澀、咸等味覺反應(yīng)。本研究通過感官鑒定摸索實(shí)驗(yàn),結(jié)合育種實(shí)踐,探討建立一種行之有效的菜用大豆感官品質(zhì)鑒定方法。鑒于分析型感官鑒定可以客觀地反映蔬菜食品固有特性,而利用模糊數(shù)學(xué)中的模糊關(guān)系對(duì)感官評(píng)定的結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)判,可以得到可靠的結(jié)果。亞洲蔬菜研究與發(fā)展中心(ＡＶＲＤＣ)、日本、韓國均曾制定適合于本地區(qū)菜用大豆的品質(zhì)特征[8,17],國內(nèi)也曾提出菜用大豆的品質(zhì)特征[14],但對(duì)于菜用大豆品質(zhì)鑒定仍無明確的鑒定方法?！　〔擞么蠖?俗稱毛豆,是一種具有豐富營養(yǎng)和藥用價(jià)值的蔬菜食品,只有我國南方和少數(shù)幾個(gè)國家有其食用習(xí)慣。參照亞洲蔬菜研究與發(fā)展中心及市場上認(rèn)定的品質(zhì)特征,確立影響其品質(zhì)的6項(xiàng)主要因子(粒色、粒莢外觀、生食口感、熟食口味、熟食香味、生樣可剝性)及各因子五等級(jí)(低劣、較差、一般、較好、優(yōu)良)隸屬標(biāo)準(zhǔn),合理確定各個(gè)因子權(quán)重,運(yùn)用模糊綜合感官評(píng)判法評(píng)定菜用大豆品質(zhì)。本研究對(duì)每次評(píng)比名次的進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,檢測主觀偏差大小,確保評(píng)價(jià)人員對(duì)毛豆固有品質(zhì)進(jìn)行分析型檢查,保證了鑒定結(jié)果的客觀性與準(zhǔn)確性。本研究采用封閉三角形(檢查判別自相矛盾程度)對(duì)檢查員的判別能力進(jìn)行考核,為能正確地鑒定毛豆感官品質(zhì)提供一定的前提和基礎(chǔ)。　感官品評(píng)主要依靠檢查人員的判斷能力,感官檢查主要依靠視覺、味覺、觸覺等感官來判斷,但往往受到心理與生理以及其它因素的干擾影響。雖然毛豆的感官品質(zhì)及其相關(guān)性狀可以借助儀器和化學(xué)方法進(jìn)行測定,但儀器和化學(xué)分析的結(jié)果不完全與人的感覺一致,更無法對(duì)其作出綜合性評(píng)價(jià),感官鑒定是品質(zhì)評(píng)定中必須的環(huán)節(jié)[5,7,8]。隨著人們生活水平的提高,消費(fèi)者越來越注意食品的感官品質(zhì),其好壞直接影響商品的價(jià)格,故市場上對(duì)毛豆提出了一定的要求。以上相關(guān)系數(shù)均較大,為70%～100%。干豆乳總糖含量與籽粒總糖含量、豆乳總糖量極顯著正相關(guān),與籽粒蛋白含量極顯著負(fù)相關(guān)。干豆乳蛋白含量與籽粒蛋白含量、豆乳蛋白量極顯著正相關(guān),與干豆乳總糖含量極顯著負(fù)相關(guān)。——蓋鈞鎰，錢虎君，吉東風(fēng)等，豆乳和豆腐加工過程中營養(yǎng)成分利用的品種間差異，大豆科學(xué)，1999，16（3）：199205摘　要:以全國261個(gè)大豆品字為材料,研究豆乳產(chǎn)量、品質(zhì)、加工性狀及籽粒營養(yǎng)成分的相關(guān)關(guān)系。,其中蛋白質(zhì)、油分、%、%、%。,其中蛋白質(zhì)、油分、。營養(yǎng)成分的抽提率、絮凝率和利用率可能與其化學(xué)組成有關(guān),應(yīng)進(jìn)一步研究籽粒中蛋白質(zhì)、脂肪、糖類的化學(xué)組成與豆乳和豆腐產(chǎn)量、品質(zhì)及加工性狀的關(guān)系,有利于明確有效的豆乳和豆腐專用品種輔助育種籽粒性狀標(biāo)記,加快育種進(jìn)程。干豆乳產(chǎn)量與加工性狀的關(guān)系也很密切,干豆乳產(chǎn)量與豆乳蛋白量、蛋白抽提率、脂肪抽提率極顯著正相關(guān)。豆乳是從大豆籽粒粉碎濾渣后得到的,豆渣中的干物質(zhì)未被利用,而豆腐又是從豆乳絮凝而來,經(jīng)乳清會(huì)流失部分營養(yǎng)物質(zhì),豆乳加工和豆腐加工實(shí)際上是大豆籽粒營養(yǎng)成分的抽提、絮凝和利用過程。許顯濱等[8]發(fā)現(xiàn)不具有11ＳＡ5端球蛋白的品種豆腐出產(chǎn)率較高。武天龍等[4]和金俊培等[5]認(rèn)為豆腐產(chǎn)量與籽粒蛋白質(zhì)含量、百粒重顯著正相關(guān)。籽?？偺呛康奶岣摺⒌鞍踪|(zhì)含量的降低均能促進(jìn)干豆乳總糖含量的提高。錢虎君等[2]研究認(rèn)為籽粒蛋白質(zhì)含量的提高能促進(jìn)干豆乳蛋白質(zhì)含量和蛋脂含量的提高。――錢虎君，蓋鈞鎰，吉東風(fēng)等，豆腐產(chǎn)量、品質(zhì)與籽粒營養(yǎng)成分及加工性狀的關(guān)系，中國糧油學(xué)報(bào)，1999，14（5）：3539大豆品種的籽粒性狀與豆乳和豆腐產(chǎn)量、品質(zhì)的關(guān)系對(duì)豆乳和豆腐加工專用品種的選育很重要,可以作為該類品種選育的輔助依據(jù)。營養(yǎng)成分利用率與其抽提率、絮凝率的典型相關(guān)分析表明蛋白絮凝率和脂肪絮凝率的提高有利于蛋白利用率的提高。增加籽粒脂肪含量及其利用率,能較大地促進(jìn)干豆腐脂肪含量的提高,蛋白利用率的提高能較大地促進(jìn)干豆腐蛋白含量的提高。――錢虎君，蓋鈞鎰，喻德躍，大豆豆乳產(chǎn)量、品質(zhì)及加工性狀的遺傳變異和遺傳規(guī)律研究，作物學(xué)報(bào)，2001，27（6）：880885摘　要　以南方、黃淮、東北地區(qū)261個(gè)品種為材料,運(yùn)用通徑分析方法研究干豆腐產(chǎn)量、品質(zhì)與籽粒營養(yǎng)成分及加工性狀的關(guān)系。六合小葉青新沂小黑豆和上饒干不死淮陰秋黑豆2個(gè)雜交組合植株世代正反交F1的干豆乳產(chǎn)量具有顯著的母體效應(yīng)。――錢虎君，蓋鈞鎰，喻德躍，大豆豆腐性狀的遺傳育種研究進(jìn)展，大豆科學(xué)，2003，22（1）：5962提　要　以全國不同地區(qū)261個(gè)大豆品種為材料分析了大豆豆乳產(chǎn)量、品質(zhì)及加工性狀在品種間的遺傳變異,以2個(gè)雜交組合為材料分析了干豆乳產(chǎn)量的遺傳規(guī)律。在高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、多抗的基礎(chǔ)上,加快大豆加工性狀的研究和專用品種的選育,是大豆遺傳育種的重要方向。在進(jìn)行豆腐高產(chǎn)選育時(shí)應(yīng)充分利用主基因效應(yīng),兼顧多基因的選擇,特別是兼顧利用多基因的加加互作效應(yīng)。本研究表明豆腐產(chǎn)量、品質(zhì)及有關(guān)加工性狀在261個(gè)大豆品種間都存在